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貨號(hào)	FS-X10198

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

中文名稱：藻類保色液Ⅱ

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：100ml

貨號(hào)：FS-X10198

產(chǎn)品介紹:

用途：

用于除綠藻外的其他藻類的保色保存。

注意事項(xiàng)：

主要由硫酸銅、乙醇、福爾馬林等組成。

儲(chǔ)存條件：室溫，避光，12個(gè)月

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

桿菌屬腸高血糖相關(guān)肽抗體Human TRIP4 大鼠瘦(LEP)免疫試劑盒

墳?zāi)构?jié)桿菌葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白10抗體Human TRPC6 大鼠嗜性粒陽離子蛋白(ECP)免疫試劑盒

動(dòng)物雙歧桿菌乳亞種腸高血糖相關(guān)肽抗體Human TRPM1 大鼠嗜性粒過氧化物(EPO)免疫試劑盒

核盤菌G蛋白偶聯(lián)受體120抗體Human TRPM5 大鼠嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1)免疫試劑盒

鴨疫里氏桿菌G蛋白偶聯(lián)受體40抗體Human HNRNPF(Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein F) 大鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)A(CyPA)免疫試劑盒

假單胞菌屬20號(hào)染色體開放閱讀框100抗體Human TRMT1 大鼠視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)免疫試劑盒

朱紅鏈霉菌促性腺釋放激受體2抗體Human TRIM44 大鼠生長抑(SS)免疫試劑盒

煙曲霉G蛋白偶聯(lián)受體106抗體Human TRIM46 大鼠生長激(GH)免疫試劑盒

越桔假絲酵母G0/G1期開關(guān)調(diào)節(jié)蛋白2抗體Human TPM4(Tropomyosin-4) 大鼠生長分化因子15(GDF15)免疫試劑盒

巨孢毛霉G蛋白偶聯(lián)受體GPR162蛋白抗體Human TPPII 大鼠生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)免疫試劑盒

兩型孢毛霉鋅指蛋白461抗體Human TRIM5 大鼠腎腫瘤抗原(RAGE)免疫試劑盒

扣囊復(fù)膜孢酵母G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體Human TPP1 大鼠腎損傷分子1(Kim-1)免疫試劑盒

黑曲霉G激錨定蛋白1抗體Human TPPP2 大鼠腎(Renin)免疫試劑盒

大腸埃希菌DNA修復(fù)蛋白GIYD2抗體Human TPPP3 大鼠腎上腺髓質(zhì)(ADM)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌生長抑制和分化相關(guān)蛋白抗體Human TOR3A(Torsin family 3 member A) 大鼠腎上腺能a1A受體(ADRA1A)免疫試劑盒

溜曲霉生發(fā)中心相關(guān)核蛋白MCM3抗體Human TOR1AIP1 大鼠腎上腺(EPI)免疫試劑盒

紫褐牛肝菌Boletus│violaceofuscus W. F. Chiu 質(zhì)量規(guī)格：TLC五味子

: HBUM172183資源名稱: 鏈霉菌質(zhì)量規(guī)格：AR歐當(dāng)歸內(nèi)酯A

產(chǎn)朊假絲酵母Candida│utilis 質(zhì)量規(guī)格：99.99%,1-3mm千金子二萜二乙酰酰酯
藻類保色液Ⅱ綠僵 5-氟吡啶-3-甲血管生成2

芹側(cè)耳（杏鮑菇）雙環(huán)[2.2.2]辛烷-2,5-二烯-2-羧乙酯血管生成受體酪激1

解脂亞羅酵母 5-硝基吡唑-3-羧乙酯血管性血友病因子

植物乳桿 3-(4-苯甲酰)血紅蛋白

松衫暗孔 3-酮庚甲酯血紅氧合1

側(cè)孢短芽孢桿脒鹽鹽血肌酐

短芽孢桿 4-(4-溴苯基)吡啶血漿前激肽釋放

釀膿鏈球 6-苯基吡啶-2-羧血尿

茄鏈格孢 6-甲基-3-氨基-2-吡啶血凝樣氧化低密度脂蛋白受體-1

小煤炱屬 3-溴-5-鹽鹽血清淀粉樣蛋白A

羊邊蟲（綿羊無漿體—永壽株） 3,5-二-4-甲血清鐵

下彎巴克斯霉 3--4-羥基血清鐵蛋白

黃綠木霉 2-氨基間苯二甲血清總補(bǔ)體

黃海芽孢桿 3-羥基丁縮二甲血栓A2

雙孢蘑菇（可訂購） 1-(2-)哌血栓B2
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)