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紅色標本保色液Ⅲ

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 16:47:22瀏覽次數(shù):248次

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貨號 FS-X10210
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p-GSK-3 Beta/FITC(phospho-Ser9) 熒光標記化葡萄糖合成激-3β抗體IgG三苯酯 CP
phospho-GSK-3 Beta(Thr390) /FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠化葡萄糖合成激3β抗體IgG2-氨-5- 97%
Phospho-GSK

產(chǎn)品介紹:

注意事項:

由硼酸、亞硫酸等組成。在制作保色浸制標本后,瓶口要用石蠟或者凡士林密封嚴實,并避免陽光直射。

儲存條件:室溫,12個月

中文名稱:紅色標本保色液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:500ml

貨號:FS-X10210

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。

啤酒神金黃桿菌葡萄糖合成2抗體Human THAP2 大鼠磷蛋白關(guān)聯(lián)鞘糖脂微區(qū)1(PAG1)免疫試劑盒

盾殼霉谷草轉(zhuǎn)2抗體Human THG1L 大鼠淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)免疫試劑盒

美澳型核果褐腐病菌葡萄糖-6磷脫氫抗體Human THEM4 大鼠淋巴功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)免疫試劑盒

黑曲霉葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白5抗體Human THNSL2 大鼠亮?;?LAP)免疫試劑盒

白僵菌葡萄糖合成1抗體Human THOC1 大鼠粒巨噬集落激因子(GM-CSF)免疫試劑盒

果生鏈核盤菌G蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體Human TGIF2LX 大鼠粒集落激因子(G-CSF)免疫試劑盒

木賊鐮孢甘油激3抗體Human THOC2 大鼠類固5α還原1(SRD5A1)免疫試劑盒

唾液乳桿菌高爾基體磷蛋白3樣蛋白抗體Human TGM4 大鼠類風(fēng)濕因子(RF)免疫試劑盒

泡囊短波單胞菌磷化谷受體1抗體Human TFDP2 大鼠酪羥化(TH)免疫試劑盒

康氏木霉G蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human TFDP1 大鼠酪蛋白激JAK3(Jak3)免疫試劑盒

pDC316磷化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1抗體Human SNX9(Sorting nexin-9) 大鼠克拉拉蛋白(CC16)免疫試劑盒

云芝磷化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1Human TFE3 大鼠可溶性腫瘤壞死因子樣凋亡微弱誘導(dǎo)劑(sTWEAK)免疫試劑盒

灰樹花孔菌葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白抗體Human TFEB 大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)免疫試劑盒

土壤薄層菌GTP結(jié)合蛋白10抗體Human TFEC 大鼠可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)免疫試劑盒

總狀毛霉磷化Ras GTP活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體Human TFIP11 大鼠可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)免疫試劑盒

Cerrena unicolorRas GTP活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體Human TFPT 大鼠可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)免疫試劑盒

鮭色諾卡氏菌Nocardia│salmonicolor 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0%(T)異蓮心堿

結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0%綿馬ABA

秦氏蜜環(huán)菌Armillaria│qinii H.C. Wang & J. Zhao 質(zhì)量規(guī)格:離子對色譜級大黃-8-β-D-吡喃葡萄糖
紅色標本保色液鱈鹽球 二苯基硅烷5α還原

土壤薄層 四溴雙S腎炎因子

茄鐮孢 DL-間酪頂體

蠟狀芽孢桿蕈狀變種 對溴芐DNA甲基化轉(zhuǎn)移

花臉香蘑 聚乙二二縮水甘油溶血

綠木霉 3-溴-4-甲氧基20-羥化二十碳四烯

寬鱗大孔 3,4-二羥基S轉(zhuǎn)移Mu5

硫黃色節(jié)桿 丁香乙酯過氧化1

釀酒酵母 2,4-二氟肉桂過氧化4

鉤狀木霉 5--2-氟過氧化5

食砜節(jié)桿 三溴化吡啶維生D結(jié)合蛋白

多孔木霉 2-溴-4-硝苯抗透明帶結(jié)合蛋白3抗體

側(cè)孢短小芽胞桿 2,4-二氟苯血清白蛋白

乳乳球乳亞種 1-芐基-3-甲氧羰基-4-酮鹽鹽環(huán)氧合2

香鬼筆 3-溴-4-L-精

 


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