當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞系>>小鼠細(xì)胞系>> P815小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞
貨號(hào) | A01X1095 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
細(xì)胞形態(tài) | 肥大細(xì)胞 | 生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 | P815小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞 | 貨號(hào) | A01X1095 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | P815:P815 |
分類 | 小鼠系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹:
別稱 | P-815 |
種屬 | 小鼠 |
年齡(性別) | 不詳 |
組織來源 | 肥大細(xì)胞;肥大細(xì)胞瘤 |
生長特性 | 半貼半懸 |
細(xì)胞形態(tài) | 肥大細(xì)胞 |
詳情簡介 | P815細(xì)胞源自DBA/2小鼠的肥大細(xì)胞瘤;P815細(xì)胞可吞噬乳膠微球,但不吞噬酵母聚糖或卡介苗;P815細(xì)胞沒有抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。硫酸右旋糖酐、LPS或PPD不能抑制P815細(xì)胞生長;P815細(xì)胞產(chǎn)生,鼠痘病毒陰性。 |
生物安全等級(jí) | 1 |
生長培養(yǎng)基 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 2×10^5cells/mL |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時(shí)間 | ~18-22小時(shí) |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候,這時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí),再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時(shí),吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品:
細(xì)胞外基質(zhì)蛋白FREM2抗體 英文名;FREM2Taq-DNA聚合酶抗體 英文名;Taq DNA polymerase
細(xì)胞外基質(zhì)蛋白OMD抗體 英文名;OMD/OsteomodulinTar DNA 結(jié)合蛋白43/TDP-43抗體 英文名;TARDBP
細(xì)胞外基質(zhì)底物反應(yīng)蛋白1抗體 英文名;SPON1Tar DNA 結(jié)合蛋白43抗體 英文名;TARDBP
細(xì)胞外基質(zhì)底物反應(yīng)蛋白2抗體 英文名;SPON2TATA盒結(jié)合蛋白相關(guān)因子1樣蛋白抗體 英文名;TAF1L
細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子抗體 英文名;CD147TATA盒結(jié)合蛋白相關(guān)因子TAF1A抗體 英文名;TAF1A
細(xì)胞外基質(zhì)磷酸化抗體 英文名;MEPETATA盒結(jié)合蛋白相關(guān)因子TAF1B抗體 英文名;TAF1B
細(xì)胞外基質(zhì)糖蛋白MMRN2抗體 英文名;MMRN2TATA盒結(jié)合蛋白相關(guān)因子TAF1C抗體 英文名;TAF1C
P815小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶4抗體 英文名;MAPK4TATA結(jié)合蛋白(核內(nèi)參)單克隆抗體 英文名;TBP (Nuclear Loading Control)
細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶5抗體 英文名;ERK5TATA結(jié)合蛋白抗體 英文名;TBP
細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶5重組兔單克隆抗體 英文名;ERK5TATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子12抗體 英文名;TAF12
細(xì)胞維甲酸結(jié)合蛋白1抗體 英文名;CRABP1Tat結(jié)合蛋白7抗體 英文名;TBP7
細(xì)胞維甲酸結(jié)合蛋白2抗體 英文名;CRABP2Tau微管蛋白激酶2抗體 英文名;TTBK2
請輸入賬號(hào)
請輸入密碼
請輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。