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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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藍(lán)色標(biāo)本保色液

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-16 16:49:44瀏覽次數(shù):208次

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貨號(hào) FS-X10214
藍(lán)色標(biāo)本保色液正在熱銷的產(chǎn)品:Hck/FITC 熒光標(biāo)記造血激抗體IgG對(duì)苯 98%
HCMV PP65/HHV5 PP65/FITC 熒光標(biāo)記人巨病PP65/CMV低質(zhì)脂蛋白抗體IgG4-苯 98%
HCMV UL23/HHV5 UL23/FITC 熒光標(biāo)記人巨病UL23抗體IgG4-苯 97%
HCMV UL49/FITC 熒光標(biāo)記人巨病UL49抗體IgG2- 98%
HCN4/FIT

產(chǎn)品介紹:

注意事項(xiàng):

有硫酸銅、甘油、等組成。如出現(xiàn)沉淀,可過(guò)濾后再使用。在制作保色浸制標(biāo)本后,瓶口要用石蠟或者凡士林密封嚴(yán)實(shí),并避免陽(yáng)光直射。

儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月

中文名稱:藍(lán)色標(biāo)本保色液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:2×250ml

貨號(hào):FS-X10214

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

布氏假單胞菌法尼基二磷合1抗體Human TCF7L1 大鼠抗單核抗體(AMA)免疫試劑盒

異常威克漢姆酵母鳥核結(jié)合蛋白1抗體Human TCF7 大鼠抗促甲狀腺受體抗體(TRAb)免疫試劑盒

青霉膠質(zhì)纖維性蛋白GFAPδ抗體Human CD52(CAMPATH-1 antigen) 大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)免疫試劑盒

西洋參銹腐病菌β半乳糖抗體Human TCERG1 大鼠抗IVIgG抗體免疫試劑盒

伯頓生絲畢赤酵母巨軸索蛋白GAN抗體Human TCHP 大鼠抗IgE受體抗體免疫試劑盒

煙色曲霉G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白O亞基A2抗體Human TCF12/HEB 大鼠巨噬移動(dòng)抑制因子(MIF)免疫試劑盒

日本曲霉高爾基體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1A抗體Human NPR2(Atrial natriuretic peptide receptor 2) 大鼠巨噬炎癥蛋白5(MIP-5)免疫試劑盒

乳乳球菌乳亞種自主生長(zhǎng)因子1B抗體Human TBX15 大鼠巨噬炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)免疫試劑盒

釀酒酵母GLCNE蛋白抗體Human TBX18 大鼠巨噬炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒

費(fèi)氏檸檬桿菌半乳糖凝集9抗體Human TBX21/T-bet 大鼠巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)免疫試劑盒

豌豆根瘤菌富含亮蛋白LRP130抗體Human TBX22 大鼠巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫試劑盒

檸檬明串珠菌蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑GBF1抗體Human CD52(CAMPATH-1 antigen) 大鼠巨噬炎性蛋白2(MIP-2)免疫試劑盒

貝形側(cè)耳高爾基體膜蛋白GP73抗體Human TBX5 大鼠巨噬替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)免疫試劑盒

釀酒酵母葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體Human TCF12/HEB 大鼠巨噬來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)免疫試劑盒

泡盛曲霉G蛋白結(jié)合蛋白2抗體Human TCEB1 大鼠巨噬集落激因子(M-CSF)免疫試劑盒

黑曲霉G蛋白結(jié)合蛋白2抗體Human TCEB3 大鼠精脲水解(AGMAT)免疫試劑盒

生二鏈霉菌Streptomyces│ambofaciens 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品知母皂E

傳染性喉氣管炎病毒Alphaherpesvirinae│Infectious laryngotracheitis virus 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品知母皂B

型副傷門菌Salmonella│paratyphi A 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品白綿馬AP
藍(lán)色標(biāo)本保色液釀酒酵母 1-苯氧基-2-轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2

蠟樣芽胞桿 (蠟狀芽胞桿) 苯基磷二化物轉(zhuǎn)鐵蛋白受體1

根瘤 4-氨基-7H-吡咯并[2,3-D]嘧啶硫鹽白蛋白片段257-264

季也蒙假絲酵母 1-N-Boc-4-(4-溴苯基)白蛋白片段257-264抗體

傳染性法氏囊病病 1-N-Boc-4-(4-溴苯基)抗甘露糖受體抗體

芽孢桿屬 過(guò)氧硫氫復(fù)合鹽抗CD86抗體

三葉草根瘤 水合硅酰化激蛋白

瓜亡革 4--3-乙酮精加壓受體2

果生鏈核盤 3-溴-4-吡啶白介27

膠凍樣芽胞桿 4-叔丁基苯甘油

*珊瑚(不是這個(gè)) 5-(二氟甲氧基)-2-{[(4--3-甲氧基-2-吡啶基)甲基]硫}-1H-苯并咪唑總氨基

沃氏富鹽 3-三氟P-糖蛋白

鏈霉 D-乳乙酯硫代反應(yīng)物

節(jié)桿屬 1-溴-3-甲氧基烷(3-溴基)線粒體呼吸鏈

維多利亞維希尼克氏酵母 1,4,5,6-四氫吡咯并[3,4-C]吡唑5脂加氧

 


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