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貨號 | FS-01S63439 |
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產品名稱:Na+k+ ——ATP酶檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/48樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63439
商品介紹:
測定意義 Na+K+- ATP酶廣泛分布于植物、動物、微生物和細胞中,可催化ATP水解生成ADP和無機磷。 測定原理: Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及無機磷,通過測定無機磷的量來確定ATP酶活性。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提取:
1、細胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
兔/甘(GAL)試劑盒 Anti-Carbonic Anhydrase 13/CA13 Antibody磷化p21激活激1抗體
兔激肽釋放7(KLK7)試劑盒 Anti-CARD9 Antibody磷化p21激活激2抗體
兔肝脂 (LIPC)試劑盒Anti-Cardiotrophin1(CT-1) Antibody磷化p21激活激3抗體
兔α羥基丁脫氫(αHBDH)試劑盒 Anti-CARM1 Antibody磷化p21激活激1/2/3抗體
兔球蛋白E Fc段受體I(FcεR I)試劑盒 Anti-P1(P10) Antibody磷化核糖體S6蛋白激抗體
兔血清/糖皮質調節(jié)激2(SGK2)試劑盒Anti-P1(P20) Antibody腺衍生血管內皮生長因子抗體
兔神經激肽B(NKB)試劑盒 Anti-CARS Antibody蛋白激樣內質網激抗體
兔受體TNFRSF結合絲蘇激2(RIPK2)試劑盒Anti-P1(P20) Antibody前列腺特異膜抗原抗體
兔酮脫氫磷(PDP)試劑盒Anti-P10 Antibody磷脂酰肌激抗體
兔補體成分3a(C3a)試劑盒 Anti-P12 Antibody胎盤生長因子抗體
兔鈣腔蛋白(CALU)試劑盒 Anti-P14(P10) Antibody蛋白激A抗體
兔α1連接(CTNNα1)試劑盒Anti-P2 Antibody蛋白激C beta 1/2抗體
兔色P450家族成員26A1(CYP26A1)試劑盒 Anti-P2(P12) Antibody胎盤生長因子抗體
兔蛋白激活受體4(PAR4)試劑盒Anti-P2(small) Antibody胎盤生長因子抗體
兔Smad同源物1 (Smad1/MADH1)試劑盒 Anti-P3(P12) Antibody外周髓鞘蛋白-22抗體
Na+k+ ——ATP酶檢測試劑盒微量法乙基三基溴化膦 98%二 分析標準品Anti-Insulin 胰島抗體
氯代十六烷基吡一水合物 98%5-基乙酰鹽鹽 99%Anti-Insulin (pig) 胰島抗體 (豬)
甲基氯化吡 98%蘆薈甙 分析標準品,≥97%Anti-rInsulin 抗重組人胰島抗體
甲基三基氯化膦 97%10-脫乙?;涂ǘ?III 分析標準品,≥95%Anti-rInsulin monoclonal (pig) 抗胰島單克隆抗體(豬)
甲氧甲?;鶃喖谆?/span> 98%多烯紫杉 分析標準品,≥99%Anti-rInsulin human monoclonal 重組人胰島單克隆抗體
甲氧甲?;寤?/span> 98%多烯紫杉 98%Anti-Insulin Receptor 胰島受體抗體
甲基三辛基氯化銨 97%大黃 ≥90% (HPLC)Anti-Insulin Receptor alpha 胰島受體α抗體
甲基三基溴化鏻 98%苦參 分析標準品,≥98%Anti-Insulin Receptor Alpha 胰島受體α抗體
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