一、樣品 DNA 的制備

用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。

二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。

1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（最好用帶芯槍頭，下同）。

3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。

4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。

5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。

6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。

7. NC 管中不加任何陽性對照。

8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

服務(wù)流程：

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱：巨球菌PCR熒光定量檢測試劑盒

英文名稱：Macrococcus spp.PCR

貨號:BJ-P6948

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

運輸：低溫

注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

實驗外包:

基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、使用方法:

實驗外包:

1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建

特點優(yōu)勢：

1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。

2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。

1000支 10 μL RNase-free 白吸頭（袋裝帶芯）  常溫 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human ADP-ribosyl cyclase 1

100mL Earle溶液 Earle Solution 4℃保存 78-5000 pg/mL 人血小板衍生生長因子C(PDGF)ELISA試劑盒

50T 傷寒桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Electron transfer flavoprotein-ubiquinone oxidoreductase, mitochondrial

50T 立克次體PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人E3泛素蛋白連接HUWE 1(E3 ubiquitin-protein ligase HUWE1)ELISA試劑盒

50T 杏仁PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人毛細血管擴張性共濟失調(diào)突變基因(ATM)ELISA試劑盒

50U Furin 蛋白 Furin Protease -20℃保存 31.2-2000 pg/mL 人前列腺酸性(PAP/PSAP)ELISA試劑盒

100g 聚乙二醇 PEG 室溫 0.312-20 ng/mL 人神經(jīng)生長抑制因子(Necdin)ELISA試劑盒

1瓶 P815株 P815 低溫運輸和保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Vasopressin V1b receptor

250mL RIPA without SDS with EDTA  RIPA without SDS with EDTA  常溫保存 0.312-20 ng/mL 人肽抑制因子K1(SPINK1)ELISA試劑盒

麥芽糖發(fā)酵管（軍團菌）  20支 0.312-20 ng/mL 人腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3(TNF alpha-induced protein 3)ELISA試劑盒

2 ug pLEGFP- N1 pLEGFP- N1 低溫運輸，-20℃保存3.5% NaC1乳糖發(fā)酵管進口、國產(chǎn)3.5% NaC1乳糖發(fā)酵管20支BR

巨球菌PCR熒光定量檢測試劑盒LDK378 dihydrochloride  ALK抑制劑（LDK378 2Hcl）  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

Anamorelin  ghrelin receptor激動劑（Anamorelin）  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

GNE-317  PI3K/mTOR抑制劑(GNE-317)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

GDC-0980  PI3K抑制劑(GDC-0980)  1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

SR-3677  ROCK-II抑制劑(SR-3677)  1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

Osthole  組胺H1受體活性抑制劑(Osthole)  1mL(10mM)|250mg|1g|5g

SAR245409  PI3K抑制劑(SAR245409)  1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

TGX-221  PI3K p110β抑制劑(TGX-221)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

FRAX486  FRAX486是group I PAKs有效抑制劑  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

K145 hydrochloride  SphK2抑制劑（K145鹽酸鹽）  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

PR-619  DUB抑制劑(PR-619)  1mL(10mM)|10mg|50mg