我司供應(yīng)的elisa進(jìn)口試劑盒免費(fèi)代測(cè)，全程ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)，免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)，索取產(chǎn)品說(shuō)明書。
規(guī)格：96T/48T
特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究，不得用于臨床診斷
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)
試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
待檢樣本：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等

備試劑與收集血樣：
1.  收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)， 2-8 ℃ 保存48 小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。
2.  標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管，管加標(biāo)本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。
3.  10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
檢測(cè)程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA進(jìn)口試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
HFTF細(xì)胞，人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞 遲緩真桿菌/遲緩埃格特菌 小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L2灰氈毛忍冬皂苷乙（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Macranthoidin B

CCL21 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 蛋白茴芹內(nèi)酯質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Pimpinellin

P19(小鼠畸胎瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 積雪草苷（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Asiaticoside

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF吉馬酮（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品Germacrone

KDM1A Others Human 人 KDM1 / LSD1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 黃體生成激素釋放激素（4-10）質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRLHRH (4-10)
Raji(人Butt's瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Benzenesulfonicacid本磺酸500毫克BR，97%

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H23甘安醋芐酯隊(duì)本磺醋鹽 Bqnzyl glycinctq p-toluqnqsulfonctq 1738-76-7

CD22 Others Mouse 小鼠 Siglec-2 / CD22 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) DEAE-葡聚糖凝膠 A-50 DEAE Sephadex A-50 39455-31-7 100G 分離試劑

HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞吡哆醛鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：Pyridoxal xy7nochloride，級(jí)別：AR，規(guī)格：25克

M17細(xì)胞，神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 非雄激素依賴型前列腺癌細(xì)胞,Tsu-Prl細(xì)胞 人神經(jīng)束膜細(xì)胞RNAHPC miRNA5 μg(錄化)
小型豬腎細(xì)胞;MPK派洛寧G，英文名或英文縮寫：Pyronin Y，級(jí)別：高，98%，規(guī)格：1克

PDGFRA Others Human 人 PDGFRa / CD140a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 雷公藤紅速 Cqlcstrol 34127-83-0

CM-M031小鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mLMES,FREEACIDMES緩沖液,一水超級(jí)白色結(jié)晶粉末RTsigma

CST6 Others Mouse 小鼠 Cystatin E / CST6 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 天青石蘭，英文名或英文縮寫：Celestine blue B，級(jí)別：高，70%，規(guī)格：100克

小鼠前列腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLAcryl/Bis37.5:1,30%Solution 250ml 進(jìn)口原料自產(chǎn)
人高速泳動(dòng)蛋白17(HMG-17)elisa進(jìn)口試劑盒LMAN2L Others Human 人 LMAN2L 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 蘆丁/蕓香葉苷Rutin質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL蘆丁/蕓香葉苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Rutin質(zhì)量規(guī)格：≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Mo-MuLV/3T3細(xì)胞，小鼠Mo-MuLv感染的3T3細(xì)胞 T/G HA-VSMC(人主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞) 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H2087新橙皮苷二氫查爾酮Neosperidin dihydrochalcone質(zhì)量規(guī)格：≥95%,BR

CSF2 Protein Mouse 重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)新橙皮苷二氫查爾酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Neosperidin dihydrochalcone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

T84(人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠瘤細(xì)胞(NK靶細(xì)胞);YAC-1氧化苦參堿Oxymatrine質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無(wú)水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說(shuō)明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過(guò)夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37℃濕盒中孵育 30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色；
15.復(fù)染：自來(lái)水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。