我司供應(yīng)的elisa進(jìn)口試劑盒免費(fèi)代測，全程ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)，免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)，索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格：96T/48T
特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究，不得用于臨床診斷
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)
試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
待檢樣本：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等

備試劑與收集血樣：
1.  收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時(shí)；更長時(shí)間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。
2.  標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管，管加標(biāo)本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3.  10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA進(jìn)口試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-谷胱甘肽（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品,還原型Glutathione (Reduced)

CL-0338G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2谷胱甘肽（氧化型）質(zhì)量規(guī)格：度大于98%,BRGlutathione(Oxidized)

ESAM Others Mouse 小鼠 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DL-異亮氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRDL-Isoleucine

小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLL-谷氨酸-γ-芐酯質(zhì)量規(guī)格：0.98L-Glutamic acid γ-benzyl ester

Eca-109人食管癌細(xì)胞 Human esophageal cancer cell line Eca-109. 1640+10% FBSL-苯丙氨酸芐酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：0.98L-Phenylalanine benzyl ester
人小腦顆粒細(xì)胞HCGC2-(2-羥苯基)苯并惡唑(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)2-(2-Hydroxyphenyl)benzoxazole

CD276 Others Human 人 CD276 / B7-H3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5,6-二溴-2,1,3-苯并噻二唑(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)5,6-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole

L929 小鼠成纖維細(xì)胞2-(2-羥苯基)苯并噻唑(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)2-(2-Hydroxyphenyl)benzothiazole

CM-H043人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL1-氨基芘(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)1-Aminopyrene

SK-MEL-1, 人皮膚色素瘤細(xì)胞2,5-二溴噻唑(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)2,5-Dibromothiazole
人膠質(zhì)細(xì)胞(少突細(xì)胞)(HO) (1×106 ) 細(xì)胞名稱 種屬CALCIUMCHLORIDEANxy7noUS錄化鈣,無水ACS級2.5KG10043-52-4RT

CM-H097人椎間盤髓核細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL1-(2-) 99% 1-(2-Pyridyl)pipqrczinq 34803-66-

IL10RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL10RA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三拂磺醋 McGNqSIUM TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 60871-83-

人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞HPASMC十四酸異丙酯，英文名或英文縮寫：IPM，級別：高，98%，規(guī)格：1公斤

RWPE2細(xì)胞，人前列腺上皮細(xì)胞 兔晶體上皮細(xì)胞永生系,N/N1003A(RLE)細(xì)胞 小鼠心肌細(xì)胞MCML-乳酸脫氫酶(+4℃)NA
小鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)elisa進(jìn)口試劑盒SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-71酸氫二鈉七水 phosphate, dibasic, heptahydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

SW-13細(xì)胞，腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 色素瘤,Bowes Melanoma細(xì)胞 人肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]dATP溶液(100 mM)dATP 100 mM solution質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

小鼠肝癌瘤株;H22癸酸鈉 decanoate質(zhì)量規(guī)格：>99%,進(jìn)分

SPARC Others Human 人 SPARC / Osteonectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 瓊脂糖(美侖電泳級)Agarose質(zhì)量規(guī)格：美侖，電泳級

人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Daoy瓊脂糖(Sigma)Agarose質(zhì)量規(guī)格：Sigma原裝
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37℃濕盒中孵育 30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色；
15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。