當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>elisa進口試劑盒>>小鼠elisa進口試劑盒>> 48T/96T小鼠白介素15(IL-15)elisa進口試劑盒
我司供應的elisa進口試劑盒免費代測,全程ELISA試劑盒實驗技術指導,免費代做實驗,索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
產(chǎn)品名稱 | 小鼠白介素15(IL-15)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Mouse interleukin 15 (IL-15) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G9799 |
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
HCCC-9810細胞,膽管細胞型肝癌細胞 人二倍體細胞系,HL細胞 小鼠肝癌細胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]橙黃ⅠOrangeⅠ質(zhì)量規(guī)格:IND
小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32藍VF Patent Blue VF質(zhì)量規(guī)格:Indicator
RTN4R Others Mouse 小鼠 Nogo Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 酚酞(IND)Phenolphthalein質(zhì)量規(guī)格:IND
人間充質(zhì)干細胞-骨髓裂解物HMSC-bm L化鉀溶液(100g/L)Potassium iodide solution質(zhì)量規(guī)格:100g/L
GPNMB Others Mouse 小鼠 GPNMB / Osteoactivin 人細胞裂解液 (陽性對照) 化鉀溶液(1/60mol/L(0.1N))Potassium iodide solution質(zhì)量規(guī)格:1/60mol/L(0.1N)
CTLA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 CTLA4 / CD152 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,4-二甲氧基本shēng huà shì jì容量:2~8℃,避光1克
小鼠瘤細胞(NK靶細胞);YAC-13-錄肖基本 3-nitnochlorobqnzqnq 11-73-3
A2細胞,人肺腺癌細胞 大鼠腎細胞,NRK-52E細胞 CL-0162MS1(小鼠胰島內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×2Zincchloride鋅錄粉25克超,99%
U-2 OS(人骨肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2L-LysineL-2,6-二基己酸25克BR,99%
HAoAF-c 人主動脈外膜成纖維細胞(HAoAF) 500,000cells 腎動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)4-基;γ-基;酪酸4-AMinobutyric acid;γ-AMinobutanoic acid;γ-AMinobutyric acid;Piperidic acid
CM-H129人視網(wǎng)膜色素上皮細胞*培養(yǎng)基100mL5-溴-4錄-3-吲哚-β-D-半乳糖苷1公斤
LAYN Others Cynomolgus 食蟹猴 Layilin / LAYN 人細胞裂解液 (陽性對照) 氧化槐定堿 Oxysophoridine,98% 54809-74-4 1G 通用試劑
人髓核細胞HNPC亞油醋標準液(+4℃) Linolqic ccid 60-33-3
9L-E細胞,人前列腺癌細胞 果子貍腎上皮細胞,Hed68細胞 小鼠腦脊神經(jīng)元MN-r馬來酰1克2~8℃
KiMA(人胚腎上皮細胞系) 5×106cells/瓶×2VJ瓊脂NA
小鼠白介素15(IL-15)elisa進口試劑盒ZR-75-1細胞,導管癌細胞 人絨癌細胞耐藥株,JEG-3/VP16細胞 人氣管平滑肌細胞RNAHTSMC miRNA5 μg硫酸鋰一水(分子生物學級)Lithium sulfate monohydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學級
恒河猴腎細胞;MMK3L-蘇糖酸鈣(>99%,BR)L-Threonic acid calcium salt質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
EPHB6 Others Human 人 EphB6 / EPHB6 人細胞裂解液 (陽性對照) L-酪氨酸二鈉鹽(>98%,BC)L-Tyrosine di salt hydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
人細胞;Hela 229 [HeLa229]魯米諾鈉(>98%,BS)Luminol, salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,BS
NELL2 Others Human 人 NELL2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 溴-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(>98%,BR)Magenta-Gal質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
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