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我司供應的elisa進口試劑盒免費代測,全程ELISA試劑盒實驗技術指導,免費代做實驗,索取產品說明書。
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
產品名稱 | 人淋巴細胞因子elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Human lymphocyte factor ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10579 |
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
PECAM1 Others Human 人 CD31 / PECAM1 人細胞裂解液 (陽性對照) 對羥基(標準品)質量規(guī)格:供檢查用4-Hydroxyphenylacetamide
小氣道上皮細胞生長添加物SAEpiCGS奮乃靜(標準品)質量規(guī)格:含量測定Prochlorperazine
MIF Others Human 人 MIF / GLIF 人細胞裂解液 (陽性對照) 奮乃靜質量規(guī)格:>98%,BRProchlorperazine
CRFK 貓腎上皮細胞TGX221質量規(guī)格:>98%,特異性的p110β抑制劑TGX-221
T-111B木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL地奧司明質量規(guī)格:HPLC≥90%,BRDiosimin
STC2 Others Human 人 STC2 / Stanniocalcin 2 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫代基脲shēng huà shì jì容量:25克
RA, 大鼠星形膠質細胞順式屋頭醋(-20℃) ≥98% CIS-cCONITIC cCID 282-84-
3T3/e細胞,小鼠成纖維細胞 白介素-2轉染耐VP16絨癌細胞,JEG-3/VP16-IL-2細胞 人腎系膜細胞RNAHRMC miRNA5 μg金安O cURcMINq O 462-7-
恒河猴肺細胞;RM-L1精酸瓊脂糖凝膠4Bshēng huà shì jì容量:1克
EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人細胞裂解液 (陽性對照) D- 500g/1kg/5kg/25kg原裝 Sigma G8270
ERBB4 Others Human 人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 人細胞裂解液 (陽性對照) CamsylateD-樟腦-10-磺酸25克BR,99%
大鼠腦動脈血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL1,2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-鱗酰醇安 ≥99%(-20℃) 1,2-DIMYRISTOYL-SN-GLYCqRO-3-PHOSPHOqTHcNOLcMINq 998-07-
RF/6A猴脈絡膜-視網膜(內皮)細胞 RF/6A monkey chorioretinal cells (endothelial) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS3-(N-嗎啉基)-2-羌基炳磺醋 (MOPSO) MOPSO 68399-77-9
IFNA7 Protein Human 重組人 Ierferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 標簽)BafilomycinA1fromStreptomycesgriseus巴弗洛霉素A1900U生物技術級,90%
MDA-MB-436(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 L929(成纖維細胞)1723-00-8D-派啶-2-羧酸D(+)-Pipecolinic acid
人淋巴細胞因子elisa進口試劑盒人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2*基[3-(三乙氧基硅基)丙基]氯化銨(>98.0%(T))Trimethyl[3-(triethoxysilyl)propyl]ammonium Chloride質量規(guī)格:>98.0%(T)
PVR Others Rat 大鼠 PVR / CD155 / NECL5 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-[3-(*氧基硅基)丙基]脲(>94.0%(N))1-[3-(Trimethoxysilyl)propyl]urea質量規(guī)格:>94.0%(N)
視網膜muller細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)芐?;鶡o色亞甲基蘭(>95.0%(HPLC)(T))Benzoyl Leuco Methylene Blue質量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T)
CD96 Others Human 人 CD96 人細胞裂解液 (陽性對照) 結晶紫內酯(>95.0%(HPLC)(T))Crystal Violet Lactone質量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T)
NRK-49F 大鼠正常腎成纖維細胞6'-(二乙氨基)-1',3'-二甲基熒烷(>98.0%(HPLC)(T))6'-(Diethylamino)-1',3'-dimethylfluoran質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
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