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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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土壤堿性磷酸酶測(cè)試盒50管/48樣

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更新時(shí)間:2022-04-21 08:50:05瀏覽次數(shù):112次

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貨號(hào) BJ-01S10031
土壤堿性磷酸酶測(cè)試盒50管/48樣公司*的商品:10 mg Lucigenin(光澤精) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存100mL CAPS Buffer,0.5M,pH10.0 CAPS Buffer,0.5M,pH10.0 常溫保存40次 miRNA PAGE膠回收試劑盒 miRNABACK 4℃保存2 ug pGL4.29[Luc2P/CRE

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檢測(cè)方法

規(guī)格

貨號(hào)

土壤堿性磷酸酶測(cè)試盒50管/48樣

可見(jiàn)分光光度法

50管/48樣

BJ-01S10031

商品介紹:

測(cè)定意義:

土壤磷酸酶是一類催化土壤有機(jī)磷化合物礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性,是評(píng)價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其最適pH范圍,分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。

測(cè)定原理:

堿性環(huán)境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成,通過(guò)測(cè)定酚的生成量即可計(jì)算出S-AKP/ALP活性。

自備儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水、無(wú)水乙醇和甲苯。

QQ截圖20220307153443.png 

注意事項(xiàng):

①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用

樣品制備:

1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。

2). 過(guò)濾混濁溶液。

3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書過(guò)過(guò)濾)。

4 ). 果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。

6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。

7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。

9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10).含脂肪的樣品用熱水提取。

PRKCZ 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

Syk 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

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FGFR4 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

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PKN2 / PRK2 / Prkcl2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

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PPP1CA 基因全長(zhǎng)ORF克隆

MMP-1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

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操作流程:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

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