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細胞凋亡方法步驟：
1、三尖杉酯堿誘發(fā)HL-60細胞凋亡
?。?）實驗前約24小時，接種兩瓶HL-60細胞，標記①、②，每瓶含約6ml培養(yǎng)液，置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
?。?）實驗前約2.5小時，當細胞密度達到70%，①號瓶加入三尖杉酯堿200μl，使終濃度為1μg/ml，②號瓶中加入同等量PBS（pH7.4）作對照。共同放入培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)2.5小時。
2、Ho33342和PI雙重染色鑒別三種細胞
?。?）染色：將瓶中的細胞搖勻取200μl于1.5ml的離心管中，加入Ho33342母液2μl，PI 20μl，染色15分鐘。
?。?）滴片：取一載玻片用雙面膠圍成一小室，從離心管中各取以上染色后的細胞懸液10μl，加入小室內蓋上蓋玻片，熒光鏡下用紫外激發(fā)光，高倍鏡下觀察，區(qū)別三種細胞，并注意三者比例。
注意事項：
1、誘導培養(yǎng)HL-60細胞時間要準確；
2、熒光顯微鏡下觀察細胞時，由于熒光易碎滅，觀察時要盡量快。
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