【儀表網(wǎng) 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)】近日，由國家糧食和物資儲(chǔ)備局組織起草的《糧油檢驗(yàn) 谷物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的測(cè)定 時(shí)間分辨熒光免疫層析法》行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)已形成征求意見稿，現(xiàn)向社會(huì)公開征求意見，截止日期為2023年5月17日，意見反饋郵箱tc270sc1@ags.ac.cn。
 

　　脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(Deoxynivalenol，DON)，又名嘔吐毒素，主要是由鐮刀菌屬的禾谷鐮刀菌、黃色鐮刀菌等菌株產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，主要污染小麥、玉米、大麥等，具有很強(qiáng)的毒性。2003 年我國對(duì)小麥、玉米、稻谷中 DON 的污染情況調(diào)查顯示，小麥、玉米 DON 污染較稻谷嚴(yán)重。我國早在 2005 年頒布了糧食和食品中 DON 的限量標(biāo)準(zhǔn)，2017 年頒布了《國家食品安全標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素限量》規(guī)定小麥、玉米中 DON 的最高限量為 1000 µg/kg。
 

　　本標(biāo)準(zhǔn)旨在建立谷物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的時(shí)間分辨熒光免疫層析檢測(cè)技術(shù)，用于谷物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的快速檢測(cè)，便于基層糧庫、糧油企業(yè)以及糧食監(jiān)管部門對(duì)谷物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的污染情況進(jìn)行掌握和防控，實(shí)現(xiàn)對(duì)谷物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的有效監(jiān)管，保障我國糧食質(zhì)量安全和人民群眾的身體健康。
 

　　本文件按照 GB/T 1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第 1 部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。參考GB 5491 糧食、油料檢驗(yàn) 扦樣、分樣法；GB/T 6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法；GB/T 27404 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測(cè)等文件內(nèi)容編制。
 

　　本文件規(guī)定了時(shí)間分辨熒光免疫層析法測(cè)定谷物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的原理、試劑及材料、儀器及設(shè)備、樣品制備、樣品測(cè)定、結(jié)果表述和重復(fù)性。本文件適用于小麥、玉米等谷物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的快速定量檢測(cè)。
 

　　原理：
 

　　試樣中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇與含銪-螯合物的聚苯乙烯微球標(biāo)記的特異性抗體發(fā)生結(jié)合后，抑制了層析過程中抗體與硝酸纖維膜檢測(cè)線上脫氧雪腐鐮刀菌烯醇-BSA偶聯(lián)物的免疫反應(yīng)，使檢測(cè)線上熒光強(qiáng)度降低，通過熒光強(qiáng)度變化和熒光分析儀的內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線，自動(dòng)計(jì)算出試樣中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的含量。
 

　　儀器及設(shè)備：
 

　　1.粉碎機(jī)：電機(jī)轉(zhuǎn)速 ≥ 1000 r/min。
 

　　2.分樣篩：1 mm 孔徑。
 

　　3.天平：分度值 0.01 g。
 

　　4.離心機(jī)：≥轉(zhuǎn)速 4000 r/min。
 

　　5.振蕩器：轉(zhuǎn)速 ≥ 2500 r/min。
 

　　6.計(jì)時(shí)器。
 

　　7.時(shí)間分辨熒光分析儀：在激發(fā)波長為 365 nm ± 5 nm，檢測(cè)波長為 615 nm ± 5 nm 條件下測(cè)定。
 

　　樣品測(cè)定：
 

　　1.將檢測(cè)卡(5.1)從冷藏狀態(tài)(2 ℃～8 ℃)取出，室溫平衡15min。
 

　　2.儀器校準(zhǔn)：選取測(cè)試項(xiàng)目為脫氧雪腐鐮刀菌烯醇，準(zhǔn)確移取 100 µL 脫氧雪腐鐮刀菌烯醇標(biāo)準(zhǔn)溶液(5.3)通過樣品稀釋液稀釋 10 倍后，加到檢測(cè)卡加樣小孔中，室溫孵育 10 min 后，將其放入時(shí)間分辨熒光分析儀(6.7)中，點(diǎn)擊儀器主界面“測(cè)量”菜單中“標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量”按鈕，然后按“是”按鈕進(jìn)行校準(zhǔn)。
 

　　3.樣品檢測(cè)：準(zhǔn)確移取 100 µL 待測(cè)溶液(7.3)，加到檢測(cè)卡加樣小孔中，室溫孵育 10 min 后，將其放入時(shí)間分辨熒光分析儀(6.7)中，點(diǎn)擊儀器主界面“測(cè)量”菜單進(jìn)行測(cè)量，即可讀取樣品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的含量。
 

　　結(jié)果表述：
 

　　試樣中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇含量由時(shí)間分辨熒光分析儀自動(dòng)計(jì)算并顯示，單位為微克/千克(μg/kg)。計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的2次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算數(shù)平均值表示，保留至小數(shù)點(diǎn)后兩位。
 

　　重復(fù)性：
 

　　在同一實(shí)驗(yàn)室，由同一操作人員，使用同一儀器，按照相同的測(cè)定方法，對(duì)同一被測(cè)試對(duì)象進(jìn)行相互獨(dú)立測(cè)試獲得的兩次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差值大于其算術(shù)平均值20%的情況不超過5%。
 

　　更多詳情請(qǐng)見附件。