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抗球蛋白試驗(yàn)原理及應(yīng)用2022/08/08: 抗球蛋白試驗(yàn)原理及應(yīng)用：利用抗球蛋白抗體作為第二抗體起橋聯(lián)作用，鏈接與紅細(xì)胞表面抗原結(jié)合的特異抗體，使紅細(xì)胞凝集，用于檢測(cè)抗紅細(xì)胞不*抗體。直接Coombs試驗(yàn)：新生兒溶血癥，自身免疫性溶血癥，特發(fā)性自身免疫性貧血（患者紅細(xì)胞上不*抗體）間接Coombs試驗(yàn)：檢測(cè)母體Rh（D）抗體，紅細(xì)胞不相容輸血后產(chǎn)生的血型抗體測(cè)定（血清中游離的不*抗體）由于不*抗體只能與一個(gè)RBC的決定簇結(jié)合，而不能同時(shí)與兩個(gè)RBC的決定簇結(jié)合，而抗球蛋白抗體作為第二抗體可達(dá)到連接與RBC表面抗原結(jié)合的特異性抗體，使RBC

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)2022/08/01: 細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)：1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。2.研究條件可以人為控制pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化

幾種具有不同特異性的二抗總結(jié)2022/07/25: 下面總結(jié)了幾種具有不同特異性的二抗：針對(duì)整個(gè)抗體分子（H＋L）具有特異性：如anti-IgG(H+L)，此類抗體既可以與抗體的重鏈結(jié)合也可以與輕鏈結(jié)合，即與抗體分子的Fc，F(xiàn)(ab')2/Fab部分均可反應(yīng)，anti-IgG(H+L)也可以與其他免疫球蛋白家族反應(yīng)（如IgM和IgA），因?yàn)樗械拿庖咔虻鞍锥季哂邢嗤妮p鏈（κ鏈或λ鏈）。針對(duì)Fab片段具有特異性：這類抗體與重鏈輕鏈均可以結(jié)合，由于它們可以與輕鏈反應(yīng)，它們同時(shí)也可以和具有相同輕鏈的其他種類的免疫球蛋白反應(yīng)。針對(duì)Fc片段或重鏈具有特異

標(biāo)準(zhǔn)的PCR三個(gè)基本反應(yīng)步驟2022/07/18: 類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火（復(fù)性）--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：1、模板DNA的變性（90℃-95℃）：模板DNA經(jīng)加熱至90~95℃一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備，雙鏈DNA在高溫作用下，氫鍵斷裂，形成單鏈DNA。2、模板DNA與引物的退火（復(fù)性）（60℃-65℃）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至50~60℃，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序

一抗的選擇考慮因素2022/07/12: 抗體(英語:antibody)，抗體是一類能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白。(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌，被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì)，僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中，及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面。檢測(cè)任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇，為縮小抗體的選擇范圍選中合適的抗體，需要考慮的因素：1.實(shí)驗(yàn)應(yīng)用的類型一般抗體說明書都列出該抗體經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證過適用于何種分析類型，如：可以應(yīng)用于WB/IHC/ICC/ELISA分析等，如果抗體說明

熒光素標(biāo)記抗體鑒定及應(yīng)用范圍2022/07/05: 熒光素標(biāo)記抗體鑒定：1、抗體的效價(jià)鑒定：鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。2、抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力?？贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)

解決細(xì)胞成團(tuán)問題幾種方式2022/06/28: 細(xì)胞抱團(tuán)是利用細(xì)胞培養(yǎng)瓶進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的常見問題，細(xì)胞成團(tuán)后將影響細(xì)胞的正常生長(zhǎng)與繁殖，那么，如果出現(xiàn)這種情況該如何解決呢？首先，細(xì)胞成團(tuán)并不一定都會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)程。如果細(xì)胞輪廓清晰胞體通透，呈串狀均勻聚集，證明細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)良好。但多數(shù)情況下，聚團(tuán)的細(xì)胞都是輪廓模糊、透光性差，甚至?xí)霈F(xiàn)合胞體，伴有細(xì)胞碎片，這證明細(xì)胞已經(jīng)衰老或產(chǎn)生病變，狀態(tài)不佳。解決細(xì)胞成團(tuán)問題可以通過以下幾種方式：1、如果細(xì)胞抱團(tuán)不影響生長(zhǎng)就沒問題，只是計(jì)數(shù)時(shí)較麻煩。在消化時(shí)，可在細(xì)胞由多角形變成圓型之前，用手輕磕細(xì)胞培

ELISA實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范原則2022/06/21: ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中的原則有哪些呢？一、隨機(jī)原則：即運(yùn)用“隨機(jī)數(shù)字表"實(shí)現(xiàn)隨機(jī)化；運(yùn)用“隨機(jī)排列表"實(shí)現(xiàn)隨機(jī)化；運(yùn)用計(jì)算機(jī)產(chǎn)生“偽隨機(jī)數(shù)"實(shí)現(xiàn)隨機(jī)化。盡量運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)知識(shí)來設(shè)計(jì)自己的實(shí)驗(yàn)，減少外在因素和人為因素的干擾。二、照原則：空白對(duì)照組的設(shè)立——只有通過對(duì)照的設(shè)立我們才能清楚地看出實(shí)驗(yàn)因素在當(dāng)中所起的作用。當(dāng)某些處理本身夾雜著重要的非處理因素時(shí)，還需設(shè)立僅含該非處理因素的實(shí)驗(yàn)組為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組；歷史或中外對(duì)照組的設(shè)立一一這種對(duì)照形式應(yīng)慎用，其對(duì)比的結(jié)果僅供參考，不能作為推理的依據(jù)；多種對(duì)照形

大鼠α2抗纖溶酶elisa定量檢測(cè)試劑盒夾心法操作步驟2022/06/14: 大鼠α2抗纖溶酶elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)夾心法操作步驟實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑和樣本均應(yīng)平衡至室溫；樣本復(fù)融后需再次離心，取上清檢測(cè)；試劑或樣本配制時(shí)，需充分混勻并盡量避免起泡；標(biāo)曲和樣本建議做復(fù)孔檢測(cè)。1.加樣：將標(biāo)準(zhǔn)品工作液依次加入到前兩列孔中，每個(gè)濃度的工作液并列加兩孔，每孔100μL。待測(cè)樣品加入到其他孔，每孔100μL(若樣本濃度高于檢測(cè)范圍，需用標(biāo)準(zhǔn)品&樣本稀釋液稀釋后取樣)。給酶標(biāo)板覆膜，37℃孵育90分鐘。提示：加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，避免產(chǎn)生氣泡

凍存原代細(xì)胞的培養(yǎng)過程2022/06/10: 凍存原代細(xì)胞的培養(yǎng)過程：1.將一管細(xì)胞從液氮罐中取出，注意保護(hù)手和眼睛。2.將凍存管快速的放入37℃水浴中，輕輕握住并旋轉(zhuǎn)，直到管內(nèi)物體*融化。3.將凍存管立即從水浴中拿出，擦干，轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。4.用70％的酒精沖洗凍存管，然后擦去多余酒精。5.打開蓋子，注意手指不要碰到里面的螺紋（注意，由于凍存管有負(fù)壓，開蓋時(shí)可能會(huì)有少量溢出，這是正?，F(xiàn)象）。6.用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶。多數(shù)細(xì)胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個(gè)細(xì)胞。7.蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子，輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要?dú)怏w交換可打開

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素elisa試劑盒性能及特點(diǎn)2022/06/07: 試劑盒性能：1.靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。試劑盒特點(diǎn)：1、高效、靈敏、特異的抗體；2、重復(fù)性和可靠性高；3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；5、可檢測(cè)指標(biāo)齊全：細(xì)胞因子檢測(cè)、心肌梗塞檢測(cè)、內(nèi)分泌檢測(cè)、肝纖維化檢測(cè)、自身免疫檢測(cè)、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)、傳染病檢測(cè)、特種

培養(yǎng)基依照用處分類2022/05/31: 如今培養(yǎng)基種類繁多，它能夠按成分、物理狀況、用處等方面來區(qū)別，依照用處能夠分為根底培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、養(yǎng)分培養(yǎng)基、挑選培養(yǎng)基四大類。一、鑒別培養(yǎng)基是一類含有某種特定化合物或試劑的培養(yǎng)基。某種微生物在這種培養(yǎng)基上培育后，它所產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與這種特定的化合物或試劑能發(fā)生某種明顯的特征性反應(yīng)，依據(jù)這一特征性反應(yīng)能夠?qū)⒛撤N微生物與其他中微生物區(qū)別開來。主要用于不同類型微生物的快速鑒定，如用來查看細(xì)菌能否產(chǎn)生硫化氫的醋酸鉛培養(yǎng)基。二、根底培養(yǎng)基含有一般細(xì)菌成長(zhǎng)繁殖需求的基本的養(yǎng)分物質(zhì)。常用的根底培養(yǎng)基

標(biāo)記熒光抗體常用Marsshall法方法及步驟2022/05/23: 標(biāo)記熒光抗體常用Marsshall法方法及步驟：一、材料抗體球蛋白溶液、0．5mol／L(pH9．0)碳酸鹽緩沖液、無菌生理鹽水、異硫氰酸熒光素、1％硫柳汞水溶液、50ml小燒杯、4℃冰箱、電磁攪拌器、透析袋、玻棒、pH7．2或3．0的0．01mol／LPBS等。二、方法及步驟抗體的準(zhǔn)備取適量已知濃度的球蛋白溶液于燒杯中，再加人生理鹽水及碳酸鹽緩沖液，使最后免疫球蛋白濃度為20mg／ml，碳酸鹽緩沖液容量為總量的1／10，混勻，將燒瓴置電磁攪拌器上(速度適當(dāng)以不起泡沫為宜)5～10min。熒光素

基質(zhì)金屬蛋白酶-12抗體實(shí)驗(yàn)原理2022/05/17: 基質(zhì)金屬蛋白酶-12抗體實(shí)驗(yàn)原理:（1）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞，通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。（2）活補(bǔ)體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。（3）結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，參與免疫應(yīng)答。（4）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進(jìn)入胎

實(shí)時(shí)熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)原因2022/05/09: 實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測(cè)的局限，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測(cè)一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度，并記錄在電腦軟件之中，通過對(duì)每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。因此，實(shí)時(shí)熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個(gè)基礎(chǔ)之上的：1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時(shí)，剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期（對(duì)數(shù)期），此時(shí)微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現(xiàn)性ji好，即同一模板不同時(shí)間擴(kuò)增或同一時(shí)間不同管內(nèi)擴(kuò)增，得到的Ct值是恒定的。2）Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對(duì)數(shù)

轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G3PP抗體實(shí)驗(yàn)原理2022/05/05: 實(shí)驗(yàn)原理:（1）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞，通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。（2）活補(bǔ)體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。（3）結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，參與免疫應(yīng)答。（4）產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，

小鼠Ⅰ型膠原 elisa分析檢測(cè)試劑盒樣本的制備2022/04/24: 小鼠Ⅰ型膠原elisa分析檢測(cè)試劑盒樣本的制備:血清和血漿均是不含細(xì)胞（包括血小板）等有形成分的血液液體部分，其主要區(qū)別是血清不含凝血因zi和血小板，血漿則含有凝血因zi，它們的制備方法如下：1)血清的制備：獲得的血液不能抗凝，盛于離心管或可以離心的器皿中，靜置或置于37℃環(huán)境中促其凝固，待血液凝固后，將其平衡并離心（一般為3000rpm，離心5～10min），得到的上清液即為血清，可小心將上清吸出（注意切勿吸出細(xì)胞成分），分裝備用。2)血漿的制備：在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝劑（抗凝劑：

細(xì)胞凍存時(shí)的注意事項(xiàng)2022/04/19: 細(xì)胞凍存時(shí)的注意事項(xiàng)：1.在冷凍保存之前，應(yīng)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)是否良好(logphase)且存活率高，凍存的細(xì)胞密度為80–90％最佳2.冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否保有其*性質(zhì)，例如是否有雜細(xì)胞或者支原體等。3.使用的DMSO應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，以5~10ml小體積分裝，4度避光保存，勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。4.冷凍保存的細(xì)胞濃度：4-1.正常的成纖維細(xì)胞:1-3x10^6cells/ml4-2.雜交瘤細(xì)胞:1~3x10^

進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)的原因與目的2022/04/13: 進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)的原因與目的：1、選擇2~3個(gè)預(yù)期結(jié)果差異比較大的樣品，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作，注意儀器工作狀態(tài)，操作規(guī)范，控制好測(cè)定條件，尤其是時(shí)間和溫度。2、預(yù)實(shí)驗(yàn)的目的是：①確定該試劑盒是否適合您的樣本檢測(cè)，以免造成試劑盒和樣本的浪費(fèi)；②幫助您熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒的客戶；③確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否適合該試劑盒的測(cè)定；④幫助你了解實(shí)驗(yàn)過程中可能出現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或者是問題，好及時(shí)作出調(diào)整。

ELISA Kit 檢測(cè)操作步驟2022/03/29: 操作步驟：夾心法，一般的操作步驟為:將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體;加入待測(cè)檢體，檢體中若含有待測(cè)的抗原，則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié);洗去多余待測(cè)檢體，加入另一種對(duì)抗原專一的一次抗體，與待測(cè)抗原進(jìn)行鍵結(jié);洗去多余未鍵結(jié)一次抗體，加入帶有酶的二次抗體，與一次抗體鍵結(jié);洗去多余未鍵結(jié)二次抗體，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果;間接法，一般的操作步驟為：將已知的抗原固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余的抗原。加入待測(cè)檢體，檢體中若含有待測(cè)的一次抗體，則其會(huì)

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