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大鼠elisa檢測試劑盒實驗時所具備的新作用2018/06/22
大鼠elisa檢測試劑盒實驗時所具備的新作用1.作前應(yīng)對實驗的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度(保持在18C～25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數(shù)等，要先查看水育箱溫度，ELISA試劑盒是否符合要求。2.正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標本或試劑，避免刮擦包被板底部。ELISA試劑盒加樣過程中避免液體外濺，血清殘留在反應(yīng)孔壁上，加樣器吸頭要清洗干凈，避免污染，加樣次序要與ELISA試劑盒SCI文章說明書一致，否則可導(dǎo)致結(jié)果錯誤，實驗重復(fù)性差。3.手工洗板加洗液時沖擊力不要太大，洗滌次數(shù)不要
小鼠elisa檢測試劑盒加樣時的防錯小經(jīng)驗2018/06/15
小鼠elisa檢測試劑盒加樣時的防錯小經(jīng)驗：（1）用一張寫滿字的紙，字越多越好，比如報紙，墊在下面，這樣，加過標本的小孔看過去下面的字會變小，沒加的字正常，非常容易區(qū)分。（2）可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別（3）在標本加完后，再把加樣槍全壓下，使液面產(chǎn)生小氣泡，也可以加以區(qū)分實驗常見問題解答：問：做間接Elisa法測試小鼠血清中的IgE抗體，設(shè)空白對照、和陰性對照、陽性血清稀釋倍數(shù)為5千、1萬、10萬、20萬不等，用的是生物素標記的羊抗鼠IgE抗體，和親和素的辣根過氧化物酶?？墒墙Y(jié)果除了空
elisa檢測試劑盒保存應(yīng)該注意以下幾點：2018/06/11
elisa檢測試劑盒保存應(yīng)該注意以下幾點：（1）需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂.（2）熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分（complement）滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量.補體參與反應(yīng)有:
大鼠elisa檢測試劑盒保存應(yīng)該注意的6大事項2018/06/08
大鼠elisa檢測試劑盒保存應(yīng)該注意的6大事項（1）需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂.（2）熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分（complement）滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量.補體參與反應(yīng)
小鼠elisa檢測試劑盒使用要點2018/06/06
小鼠elisa檢測試劑盒使用要點：1、按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。2、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。3、試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。4、標本由于冷藏時IgG聚合成多聚體，F(xiàn)ib非特異性吸附，反復(fù)凍融機械切力致使蛋白分子受損。5、實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。6、使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。7、加樣時不準
elisa檢測試劑盒測定操作表2018/06/01
elisa檢測試劑盒測定操作表：1、分光光度計或酶標儀預(yù)熱30min，波長調(diào)節(jié)至620nm，蒸餾水調(diào)零。調(diào)節(jié)水浴鍋至95℃。2、工作液的配制：臨用前在每瓶試劑一中加入7mL蒸餾水后，緩慢加入28mL濃硫酸，不斷攪拌，充分溶解，待用。用不完的試劑4℃保存一周。3、標準曲線的建立：取60?l標準液和240?l現(xiàn)配的工作液混勻，95℃水浴10min，（蓋緊，防止水分散失）自然冷卻至室溫，取200?l至比色皿或酶標板中，在620nm處測吸光值A(chǔ)。根據(jù)標準樣本的濃度（y）和吸光度（x）建立標準曲線。4、樣
elisa檢測試劑盒試驗中留意事項2018/05/30
elisa檢測試劑盒試驗中留意事項1．elisa試劑盒應(yīng)按標簽闡明書貯存，運用前恢復(fù)到室溫。稀稀往后的規(guī)范品應(yīng)丟掉，不行保留。2．試驗中不必的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保留，防止蛻變。3．不必的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。elisa試劑盒不相同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前運用。4．運用一次性的吸頭防止穿插污染，汲取停止液和底物a、b液時，防止運用帶金屬有些的加樣器。5．運用潔凈的塑料容器裝備洗滌液。運用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標板時應(yīng)充沛拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反響孔中吸
大鼠elisa檢測試劑盒需要重點注意的細節(jié)問題2018/05/28
大鼠elisa檢測試劑盒需要重點注意的細節(jié)問題1.設(shè)置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。2.檢測標準樣品時，應(yīng)按濃度遞增順序進行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準確性。3.標準曲線的樣品數(shù)一般為7個點，但至少要保證有5個點。4.做出的標準曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎?，但一般來說，相關(guān)系數(shù)R
小鼠elisa檢測試劑盒操作是需要注意的環(huán)節(jié)2018/05/25
小鼠elisa檢測試劑盒操作是需要注意的環(huán)節(jié)（1）要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有類似過氧化物的活性，因此，在以HRP為標記酶的ELISA測定中，如血清標本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。（2）樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染，一則細菌的生長，其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用；二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。（3）血清標
elisa檢測試劑盒需要樣本應(yīng)該這樣做2018/05/21
elisa檢測試劑盒需要樣本應(yīng)該這樣做1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清
大鼠elisa檢測試劑盒檢驗常見問題分析2018/05/16
大鼠elisa檢測試劑盒檢驗常見問題分析1、試劑孵育的時間沒有按說明書操作。解決方法：確定生物素抗體，連接的HRP試劑或鏈霉親和素-HRP使用的時間是否適當2、不同試劑盒或不同批號的試劑混用。解決方法：重新檢查試劑的標簽，確準所有組份都屬于正使用的試劑盒中的。不能混用不同試劑盒或不同批號的試劑3、漏加酶或顯色劑。解決方法：檢查操作流程，注意不要漏加4、HRP酶污染了疊氮鈉。解決方法：使用新配制的試劑，禁含疊氮鈉5、標準品有問題(若在標本孔中有信號)解決方法：按說明書檢查標準品的制備使用新標準品6
小鼠elisa檢測試劑盒檢驗常見問題分析2018/05/09
小鼠elisa檢測試劑盒檢驗常見問題分析1、試劑孵育的時間沒有按說明書操作。解決方法：確定生物素抗體，連接的HRP試劑或鏈霉親和素-HRP使用的時間是否適當2、不同試劑盒或不同批號的試劑混用。解決方法：重新檢查試劑的標簽，確準所有組份都屬于正使用的試劑盒中的。不能混用不同試劑盒或不同批號的試劑3、漏加酶或顯色劑。解決方法：檢查操作流程，注意不要漏加4、HRP酶污染了疊氮鈉。解決方法：使用新配制的試劑，禁含疊氮鈉5、標準品有問題(若在標本孔中有信號)解決方法：按說明書檢查標準品的制備使用新標準品6
elisa檢測試劑盒實驗高手的操作技巧2018/05/02
elisa檢測試劑盒實驗高手的操作技巧1.保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。2.將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。3.一旦在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時，應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。4.解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。5.勿將血清置于37℃
大鼠elisa檢測試劑盒實驗解析2018/04/18
大鼠elisa檢測試劑盒實驗解析1）取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置30分鐘。2）分組：取出96孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準品組（6個濃度）、空白孔、待測樣品組。3）標準品的稀釋：準備小試管6只，依次編好號碼，先在各小試管中加入標準品稀釋液100ul，然后取原濃度標準品100ul加入一只已編好號的試管中，充分混勻;再在該試管中取100ul加入第二支試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第三只試管中，充分混勻；再在該試管中
小鼠elisa檢測試劑盒試驗標本收集方法2018/04/16
小鼠elisa檢測試劑盒試驗標本收集方法1、將抗原和淋巴細胞在體外混合，刺激并預(yù)孵育，是通用的方法。預(yù)孵育的淋巴細胞，在置入ELISPOT板之前應(yīng)使用復(fù)溫到37℃的培養(yǎng)液清洗細胞1-2次。置入ELISPOT板以后通常在37℃培養(yǎng)5～6小時。2、對于高度特異性抗原，可以采用將淋巴細胞和抗原同時加入ELISPOT板孔中，37℃培養(yǎng)箱中，同步進行刺激、培養(yǎng)、和細胞因子捕獲。淋巴細胞板內(nèi)同步刺激培養(yǎng)的時間通常為22～24小時。3、ELISPOT試驗檢測的是每一個分泌細胞因子的活化細胞。在培養(yǎng)細胞過程中，
elisa檢測試劑盒使用時的注意事項2018/04/08
elisa檢測試劑盒使用時的注意事項（1）固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。（2）包被抗體或抗原的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃1
大鼠elisa檢測試劑盒技術(shù)檢測法2018/03/28
大鼠elisa檢測試劑盒技術(shù)檢測法應(yīng)用：1）了解細胞大小及顆粒度2）細胞狀態(tài)：pH值、氧化還原、氧自由基、Ca2+3）細胞表面蛋白：CD系列等4）細胞內(nèi)蛋白：胞內(nèi)因子、P53等5）細胞功能檢測：細胞周期、凋亡、分化、細胞增殖活力、吞噬功能、藥物泵的功能7）免疫表型分析流程：1）根據(jù)實驗需要預(yù)處理待檢測細胞2）上機檢測相關(guān)參數(shù)3）對所得結(jié)果進行數(shù)據(jù)分析4）細胞分選流程（略）大鼠elisa檢測試劑盒大鼠8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒，英文名：8-epi-PGF2αE
小鼠elisa檢測試劑盒常見液體樣本處理方法2018/03/23
小鼠elisa檢測試劑盒常見液體樣本處理方法1、血清：用無菌管收集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2、血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3、尿液：用無菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清
elisa檢測試劑盒常用的標記法2018/03/21
elisa檢測試劑盒常用的標記法:烙印法用刺數(shù)鉗在動物耳上刺上號碼，然后用棉簽蘸著溶在酒精中的黑墨在刺號上加以涂抹，烙印前對烙印部位預(yù)先用酒精消毒。打號法用刺數(shù)鉗將號碼打在動物耳朵上。打號前用蘸有酒精的棉球擦凈耳朵，用耳號鉗刺上號碼，然后在烙印部位用棉球蘸上溶在食醋里的黑墨水擦抹。該法適用于耳朵比較大的兔、狗等動物針刺法用七號或八號針頭蘸取少量碳素墨水，在耳部、前后肢以及尾部等處刺入皮下，在受刺部位留有一黑色標記。該法適用于大小鼠、豚鼠等。在實驗動物數(shù)量少的情況下，也可用于兔、狗等動物。號牌法用
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