技術(shù)簡(jiǎn)介
酵母雙雜交系統(tǒng)(Yeast two-hybrid system)是將待研究的兩種蛋白質(zhì)A和B的編碼DNA序列分別克?。ㄈ诤希┑浇湍副磉_(dá)質(zhì)粒的轉(zhuǎn)錄激活因子(如GAL4等)的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域(B-BD)和轉(zhuǎn)錄激活域(A-AD)上,構(gòu)建成融合表達(dá)載體,從表達(dá)產(chǎn)物分析兩種蛋白質(zhì)相互作用的系統(tǒng)。
如果A和B蛋白能夠相互作用,則DNA結(jié)合域和激活域緊密靠近,使轉(zhuǎn)錄激活因子起作用,啟動(dòng)報(bào)告基因(如b-半乳糖苷酶)的表達(dá),通過(guò)檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物可以判斷相互作用的強(qiáng)弱。
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