1、原理及適用范圍

腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現(xiàn)的食物傳播性疾病的病因。它除了引起腹瀉、出血性腸炎外，還可發(fā)生溶血性尿毒綜合癥、血栓性血小板減少性紫癜等嚴(yán)重的并發(fā)癥。自1982年美國(guó)發(fā)現(xiàn)因該致病菌引起的食物中毒以來(lái)，腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開(kāi)始逐漸擴(kuò)散和蔓延，相繼在英國(guó)、加拿大、日本等多個(gè)國(guó)家引起腹瀉爆發(fā)和流行。我國(guó)已陸續(xù)有十余個(gè)省份在市售食品、進(jìn)口食品、腹瀉病患者、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7。大腸桿菌O157測(cè)試片（FilmplateTM E.coli O157BO204）采用進(jìn)口高選擇性顯色培養(yǎng)基作為主要原料，運(yùn)用微生物測(cè)試片專有技術(shù)，做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品，一步培養(yǎng)15～24h就可確認(rèn)，大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序，非常適合各級(jí)檢驗(yàn)部門(mén)和食品企業(yè)使用。本品適用于海產(chǎn)品、水產(chǎn)品、各類熟肉制品和冷葷、蛋及蛋制品等的快速檢測(cè)。參照標(biāo)準(zhǔn)：食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸埃希氏菌O157:H7/NM檢驗(yàn)（GB/T4789.36）。

2、操作方法

2.1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液（或生理鹽水）的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液。

2.2、接種：將大腸桿菌O157測(cè)試片置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，揭開(kāi)上層膜，用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固，最后用手輕輕地壓一下，每個(gè)稀釋度接種兩片，同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。

2.3、培養(yǎng)：將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中，并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。

3、結(jié)果判讀

對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察，呈紫紅色的菌落為大腸桿菌O157；呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌群。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本，用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證，沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。

4、報(bào)告方式

報(bào)告每25g（或25ml）樣品中檢出或未檢出大腸桿菌O157。

5、附加說(shuō)明

5.1、本品所用培養(yǎng)基已在國(guó)外得到比較廣泛的應(yīng)用，有關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)表明，接純菌種可以產(chǎn)生典型的紫紅色菌斑，準(zhǔn)確率達(dá)到98%（K.A. Bettelheim. 1998. J. Clin. Microbiol.85：425-428）。

5.2、經(jīng)本公司檢測(cè)，大腸桿菌O157測(cè)試片對(duì)純菌的檢測(cè)靈敏度為1CFU/mL。

5.3、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌，需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。

6、保存條件

本產(chǎn)品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質(zhì)期為一年，鋁箔袋打開(kāi)后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個(gè)月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水，在拆封前將整包回溫至室溫。