單細胞檢測的得力助手！
高通量 多參數(shù) 非標記 實時無損檢測！
多參數(shù)：可獲取細胞活力、數(shù)量、濃度等信息，并追蹤細胞分化、衰老、凋亡及癌變等生理狀態(tài)
通用性：適用于1-50μm內所有類型的單細胞 (人體、動/植物細胞、細菌、酵母、孢子、藻類、體細胞等)
高效性：實時標準化無損檢測、幾分鐘內獲得結果，通量高、重復性高、精確度高
易用性：無需染色、標記或細胞再培養(yǎng)，操作簡單易上手
靈活性：可根據(jù)細胞類型、研究目標自定義測量和分析協(xié)議
Ampha X30實時微流控阻抗流式細胞儀 開創(chuàng)了單細胞分析的新紀元，通過整合微流控技術、電阻抗技術與流式細胞術，能夠在微流體精準參考條件下，實現(xiàn)流動態(tài)單細胞的高通量、連續(xù)、無損阻抗檢測，實時獲得細胞活力、數(shù)量、濃度等信息，并追蹤細胞分化、衰老、凋亡及癌變等生理狀態(tài)。與常規(guī)細胞分析儀相比，Ampha X30實時微流控阻抗流式細胞分析儀具有非標記、多參數(shù)、低污染、檢測速度快、標準化程度高等顯著優(yōu)勢，是生物學、醫(yī)學和藥學等領域中的強有力工具。
工作原理：
基于細胞膜的電特性（膜電容和膜電阻），當不同大小和活性的細胞隨懸浮液流經廣頻（0-30 MHz）交流電場時將產生不同的電阻抗信號，經解析獲得細胞的濃度、數(shù)量、活性及大小等信息。如下圖所示：A）細胞在不同頻率的交流電場中的檢測結果：低頻電場反映細胞的體積特性即電直徑，高頻電場反映細胞的介電特性即細胞活性；B) 微流控芯片；C）細胞電阻抗信號（藍色實部即電阻信號，綠色虛部即容性電抗信號），細胞膜完整性決定容性電抗的大小，故可通過虛部信號來區(qū)分活細胞和死細胞，最終以阻抗相位角-振幅散點圖反映出來。
Ampha X30信號的采集和轉導
應用領域：
細胞發(fā)育研究：細胞分化、衰老、凋亡及癌變等生理狀態(tài)
微生物發(fā)酵：酒品的釀造、生物燃料的生產、奶酪/酸奶的生產、/疫苗等藥物的生產
生物醫(yī)學：腫瘤診斷、腫瘤機制研究、細胞信號調控、細胞免疫、臨床即時診斷
藥物/毒理分析：毒性/藥性應激反應、藥篩/藥物降解、病毒滴定、材料安全檢測
混濁、不透明或自發(fā)熒光介質：牛奶/其他食品基質、乳狀液、金屬工作液、自發(fā)熒光介質（如微藻）等
高精確度：
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圖1. 酵母活性（Ampha X30與PI熒光染色法） | 圖2. BL2細胞濃度（Ampha X30與Neubauer血球計數(shù)板） |
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| 圖3. 感染桿狀病毒（BV）后Sf9昆蟲細胞的變化（Ampha X30與Countess™自動細胞計數(shù)儀） | |
應用案例分享：
微生物發(fā)酵在線監(jiān)測
微生物發(fā)酵過程中，菌種的生產性能、培養(yǎng)基的配比、原料的質量、滅菌條件、發(fā)酵條件等均影響著發(fā)酵結果的好壞。在此過程中，密切關注酵母活力和酵母密度是控制和改進發(fā)酵過程的關鍵。
微生物發(fā)酵過程中，利用Ampha X30在線監(jiān)測酵母細胞濃度和活力隨時間的變化（圖1，細胞濃度-灰色，細胞活力-藍色），能夠間接反映出反應器中發(fā)酵條件的變化，結果表明酵母細胞的總體密度隨發(fā)酵時間持續(xù)增長，但細胞活性卻先逐漸降低后又逐漸升高，其中發(fā)酵后的第11個小時活性（圖2）。Ampha X30對發(fā)酵過程的監(jiān)測不僅顯示出滯后階段和早期對數(shù)階段，而且揭示了酵母細胞在進入指數(shù)增長對數(shù)階段之前的活力損失。
釀酒酵母活性檢測
啤酒釀造過程中酵母菌種、酵母接種量、酵母使用代數(shù)、發(fā)酵工藝條件等都會影響啤酒的風味。Ampha X30能夠在啤酒釀造生產過程，高通量、快速、精準監(jiān)控啤酒酵母細胞的活力、濃度、代謝、繁殖和健康狀態(tài)，實時評估溫度、滲透壓、培養(yǎng)條件等因素對酵母菌的影響，進而及時優(yōu)化發(fā)酵工藝。
啤酒釀造過程中酵母菌密度、活性及酒精濃度的變化
該案例分析了啤酒釀造過程中，啤酒酵母菌密度、活性及酒精濃度的變化。如圖所示發(fā)酵1天后 (紅)，酵母細胞從滯后期進入早期指數(shù)(對數(shù))期；第1-2天為發(fā)生細胞顯著增殖的指數(shù)生長期 (綠)；第3天，由于細胞的劇烈增殖和營養(yǎng)物質的耗盡，高相位酵母群逐漸向低相位移動（紅-綠-藍，活力逐漸降低）。該過程反映了發(fā)酵罐中酵母活性及發(fā)酵條件的變化，即發(fā)酵初期酵母細胞濃度低、活力低且發(fā)酵罐中存在大量氧氣，當發(fā)酵罐中的氧氣全部消耗完后，酵母細胞轉入?yún)捬醢l(fā)酵產生乙醇，乙醇濃度迅速增加并逐漸對酵母細胞產生毒性，導致酵母細胞活性降低。
腫瘤細胞凋亡進程
| A Fresh Culture | B Old Culture |
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| 不同培養(yǎng)時期BL2細胞的阻抗相位和細胞活力的變化 |
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| Staurosporine誘導下BL2細胞的凋亡過程 |
腫瘤細胞培養(yǎng)是研究癌變機理、抗癌藥檢測、癌分子生物學極其重要的手段，監(jiān)測藥物對腫瘤細胞的影響對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用。該案例研究了Staurosporine對BL2淋巴瘤細胞的影響。從圖中可以看出，在Staurosporine處理1小時后，BL2細胞活性（藍）顯著下降，而對照組（黑）BL2細胞在10小時內始終保持高活性，之后才逐漸下降。Ampha X30實時微流控阻抗流式細胞儀無需進行細胞的染色、標記或培養(yǎng)，可在腫瘤細胞培養(yǎng)過程中隨時檢測腫瘤細胞生理特性的變化，準確評估腫瘤細胞對凋亡誘導劑、細胞毒劑的劑量反應或分化、凋亡進程。
CHO細胞發(fā)育變化
人體和動物細胞，特別是哺乳動物細胞，在藥物研究、藥效表達、臨床診斷等應用中發(fā)揮著重要作用。哺乳動物細胞常被用于生產抗體、蛋白質、疫苗、再生醫(yī)學等領域，中國倉鼠卵巢細胞（CHO）是目前研究較多的一種表達系統(tǒng)，在生物制藥領域中應用較為廣泛。
本案例利用Ampha X30監(jiān)測了CHO細胞在三周內的發(fā)育變化，上圖為第4天（藍色）、9天（紅色）和19天（綠色）的CHO細胞相位角-振幅散點疊加圖，散點圖左下方的小群體代表死亡細胞，而右側的大群體代表活性細胞，從疊加圖中可以看到CHO細胞活性在前9天里并未發(fā)生變化，而在第19天，散點圖顯著向較低相位角偏移，這表明由于缺乏底物CHO細胞逐漸失去活性。
Sf9昆蟲細胞BV感染后活性變化
基于昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)自身的特點和優(yōu)勢，目前已被廣泛應用于藥物研發(fā)、疫苗生產、重組病毒殺蟲劑等眾多領域。Ampha X30實時微流控阻抗流式細胞分析儀可幫助在昆蟲細胞BV感染過程中檢測細胞活力變化、確定多重性感染（MOI）范圍、篩選理想的表達條件并預測BV昆蟲細胞系統(tǒng)中收獲胞內蛋白的時間。
感染桿狀病毒（BV）數(shù)小時內Sf9昆蟲細胞活性的變化
如案例所示，Sf9昆蟲細胞在感染BV后的數(shù)小時（hpi）內，Ampha X30細胞分析儀所獲得的相位-振幅散點圖可明顯分離出三個細胞類群，分為是活細胞（viable）、感染晚期（LPI）和死細胞（dead）類群。感染48hpi后，活細胞的阻抗振幅降低（細胞）且數(shù)量逐漸減少，直至99hpi細胞全部死亡。感染晚期（LPI）細胞類群出現(xiàn)在較低相位，這部分細胞在0-60hpi逐漸增加隨后減少直至消失。
腫瘤藥物藥效評估
腫瘤患者來源的異種移植(PDX)是進行藥物敏感性和毒性評估的有效手段，對預測療效十分重要。在藥物處理下分泌到培養(yǎng)基中的亞細胞凋亡小體(ABs)和微泡（MVs），可作為藥物敏感性的標志物。目前，實體瘤的體外藥物敏感性評估主要通過：一、對貼壁細胞進行顯微鏡鏡檢分析ABs細胞的數(shù)量和形狀；二、流式細胞儀測量統(tǒng)計凋亡條件下ABs和細胞的數(shù)量，并根據(jù)熒光染色結果鑒定細胞大小并進行分類。然而由于ABs復雜多樣，很難確定每種AB型的適配熒光染料并預估ABs對不同染料滲透動力學的依賴性，因此利用流式細胞儀量化細胞分解過程存在極大的挑戰(zhàn)。
不同濃度的吉西他濱誘導下PDAC細胞系的凋亡變化（顯微鏡鏡檢vs. 流式細胞術vs. Ampha Z32）
該研究通過不同方法評估了不同藥物濃度下PDAC細胞系的凋亡變化，結果表明實時微流控阻抗流式細胞儀可在不同的腫瘤微環(huán)境模型和藥物類型下高通量、非標記、快速無損檢測ABs表型并追蹤細胞凋亡過程，進而準確評估藥物敏感性和毒性，是一個測量單細胞電生理學特性的有效工具，不僅免除了費力耗力的細胞收集和染色標記過程，還可避免因染色不當所造成的細胞凋亡。
納米材料毒性評估
納米材料廣泛應用于工業(yè)、農業(yè)、食品、日用品、醫(yī)藥等各個領域的同時，已不可避免的給我們的環(huán)境和健康帶來不利影響。因此，為確保納米材料的安全性，促進納米技術的發(fā)展，進行納米材料毒性評估十分必要且緊迫。Ampha X30實時微流控阻抗流式細胞儀可以非標記、高通量、快速評估納米材料的毒性，避免假陰性或假陽性的檢測結果，是一種可靠且經濟高效的檢測方法。
U937細胞對NM-300K（Ag，100μg/ mL）的急性毒性效應
微藻培養(yǎng)生產脂肪酸
微藻培養(yǎng)生產脂肪酸是一個復雜但有前景的生物技術過程。與其他類型的細胞相比，微藻細胞體積較小且具有自發(fā)熒光，傳統(tǒng)光學分析方法難度極大。Ampha X30實時微流控阻抗流式細胞儀基于細胞本身的電特性，不受自身熒光或細胞大小的影響，可以有效監(jiān)測生物反應器中脂肪酸的過生產過程，幫助篩選合適的微藻種類、優(yōu)化培養(yǎng)條件（如光照、溫度、營養(yǎng)鹽濃度等）以實現(xiàn)高效、可持續(xù)的脂肪酸生產。
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產地：瑞士Amphasys
