魚(yú)油產(chǎn)品中EPA、DHA含量測(cè)定氣相色譜儀
魚(yú)油產(chǎn)品中EPA、DHA含量測(cè)定氣相色譜儀
普瑞GC-9280型氣相色譜分析法通過(guò)新的樣品處理方法和相應(yīng)色譜條件的選擇，實(shí)現(xiàn)對(duì)魚(yú)油等保健品中EPA、DHA的含量測(cè)定。普瑞GC-9280型氣相色譜分析法通過(guò)直接加入2，6-二叔丁基對(duì)甲酚(bht)、內(nèi)標(biāo)二十三酸甲酯、鹽類物質(zhì)來(lái)配置標(biāo)準(zhǔn)品和樣品溶液，直接進(jìn)樣進(jìn)行測(cè)定。通過(guò)對(duì)此方法做了方法學(xué)驗(yàn)證，專屬性好，無(wú)雜質(zhì)干擾；線性關(guān)系：r2＝0.9998；精密度6針EPA含量rsd為0.49％，DHA含量rsd為0.36％；回收率EPA達(dá)到99.5％，DHA達(dá)到99.7％。各項(xiàng)驗(yàn)證指標(biāo)良好，均符合法規(guī)要求。且本方法測(cè)定簡(jiǎn)便易行，適用于工業(yè)生產(chǎn)中不同批次魚(yú)油樣品的測(cè)定。
作為優(yōu)選，樣品溶液的配制方法：
魚(yú)油原料：稱取20mg樣品于玻璃瓶中，按照衍生化部分描述進(jìn)行操作；
魚(yú)油軟膠囊：取20粒軟膠囊的內(nèi)容物于一燒杯中，充分混合，確保不分層，然后按照衍生化部分描述進(jìn)行操作。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，普瑞GC-9280型氣相色譜分析法具有如下顯著優(yōu)點(diǎn)：
1、普瑞GC-9280型氣相色譜分析法是以GC法測(cè)定魚(yú)油中EPA和DHA的含量，而且此GC法適用于軟膠囊、魚(yú)油原料中EPA和DHA含量的測(cè)定。
2、普瑞GC-9280型氣相色譜分析法先用20g/l氫氧化鈉-甲醇溶液與樣品進(jìn)行皂化反應(yīng)后，再用甲醇溶液與樣品溶液進(jìn)行反應(yīng)，可更甲酯化樣品。
3、用bht異辛烷溶液溶解樣品，除易于溶解相應(yīng)樣品外，bht還能起到抗氧化作用，減少樣品處理過(guò)程中的損失。
4、內(nèi)標(biāo)法的運(yùn)用，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確。
5、色譜柱選擇hpinnowax，30m×0.25mm，0.25μm,能更好的對(duì)組分進(jìn)行分離的同時(shí)，節(jié)約儀器運(yùn)行時(shí)間。
6、根據(jù)魚(yú)油中各組分沸點(diǎn)的不同，對(duì)柱溫溫度進(jìn)行選擇，能更好分離樣品，節(jié)約儀器運(yùn)行時(shí)間。
以下所用試品及試劑：
試劑：丁羥甲苯(bht)：分析純；二十三酸甲酯：標(biāo)準(zhǔn)品；氫氧化鈉：分析純；甲醇：色譜級(jí)；14％甲醇溶液：分析純；異辛烷：色譜級(jí)；氯化鈉：分析純；分析純；水：超純水。
標(biāo)準(zhǔn)品：EPA甲酯批號(hào)：bcbm9475v，純度：≥98.5％，來(lái)源：sigma-aldrich
DHA甲酯批號(hào)：bcbn2286v，純度：≥98.5％，來(lái)源：sigma-aldrich；
樣品：1.魚(yú)油軟膠囊，2.魚(yú)油原料，
例1魚(yú)油軟膠囊中EPA、DHA含量的測(cè)定
魚(yú)油軟膠囊EPA和DHA含量的測(cè)定：
(1)bht溶液
取50mgbht溶于1000ml異辛烷。
(2)內(nèi)標(biāo)溶液
精密稱取150mg二十三酸甲酯于25ml容量瓶，用bht溶解，并稀釋至刻度。
(3)對(duì)照品溶液的配制：
分別精密稱取16mgEPA標(biāo)準(zhǔn)品、12mgDHA標(biāo)準(zhǔn)品于10ml容量瓶，用內(nèi)標(biāo)溶液溶解，并稀釋至刻度線。
(4)樣品處理：
成品(軟膠囊)：取20粒軟膠囊的內(nèi)容物于一燒杯中，充分混合，確保不分層。然后按照衍生化部分描述進(jìn)行操作。
(5)衍生化：
移取2.0ml內(nèi)標(biāo)溶液于每一玻璃瓶中，氮?dú)獯蹈桑患尤?.5ml20g/l的氫氧化鈉-甲醇溶液，擰緊聚四氟乙烯瓶帽；水浴加熱并攪拌7min。冷卻至室溫；加2ml甲醇溶液，擰緊瓶帽；水浴加熱，并時(shí)時(shí)振搖30min；冷卻至40～50℃，加入1ml異辛烷；轉(zhuǎn)移溶液至20ml試管；加蓋，并快速振搖30s；立刻加入5ml飽和氯化鈉溶液于玻璃瓶中；加蓋，振搖15s；轉(zhuǎn)移上層液于10ml試管；用1ml異辛烷重復(fù)萃??；分兩次用1ml水沖洗異辛烷層；用干燥，得到待檢測(cè)樣品溶液。
(6)采用氣相色譜儀對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)：
色譜條件：進(jìn)樣量1μl，
a)色譜柱：hpinnowax，30m×0.25mm，0.25μm；
b)載氣：氮?dú)猓?/p>
c)柱溫：170℃，保持5min；1.5℃/min至188℃保持2min；1.0℃/min
至212℃；5.0℃/min至230℃保持10min；
d)進(jìn)樣口溫度：250℃；
e)檢測(cè)器溫度：280℃；
f)分流比：75:1；
g)進(jìn)樣體積：1μl；
h)流速：1.0ml/min；
i)氫氣流速：40ml/min；
j)空氣流速：400ml/min。
(7)根據(jù)峰面積及計(jì)算公式計(jì)算，得到樣品EPA和DHA的含量：
式中：
樣品比率(EPA，DHA)------樣品的峰面積(EPA，DHA)/內(nèi)標(biāo)峰面積(EPA，DHA)；
標(biāo)準(zhǔn)品比率(EPA，DHA)-------標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積(EPA，DHA)/內(nèi)標(biāo)峰面積(EPA，DHA)。
儀器特點(diǎn)
(1) 采用了技術(shù)百兆/千兆以太網(wǎng)通信接口、并內(nèi)置IP協(xié)議棧、使儀器可以通過(guò)企業(yè)內(nèi)部局域網(wǎng)、互聯(lián)網(wǎng)實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)距離的數(shù)據(jù)傳輸；方便實(shí)驗(yàn)室的架設(shè)、簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)室的配置、方便分析數(shù)據(jù)的管理；
(2) 儀器內(nèi)部設(shè)計(jì)3個(gè)獨(dú)立的連接IP地址，可以連接到工作電腦（實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)場(chǎng)）、分管電腦（如質(zhì)檢科、生產(chǎn)部等）、以及高管電腦，需要時(shí)可實(shí)時(shí)監(jiān)控儀器的運(yùn)行以及分析數(shù)據(jù)結(jié)果；
(3) 儀器配備的專用工作站可以同時(shí)支持多臺(tái)色譜儀接入，實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)處理以及儀器反向控制，簡(jiǎn)化文檔管理；
(4) 儀器可以通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)連接到生產(chǎn)廠家，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程診斷、遠(yuǎn)程更新等（需用戶設(shè)置）；
(5) 儀器配備的8吋彩色液晶觸摸屏，支持熱插拔，可作手持控制器使用；
(6) 儀器采用了多處理器并行工作方式，使儀器更加穩(wěn)定可靠；可選配多種高性能檢測(cè)器選擇，如FID、TCD、ECD、FPD和NPD，最多可同時(shí)安裝三個(gè)檢測(cè)器，滿足復(fù)雜樣品的分析需求。
儀器采用模塊化的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，后期維護(hù)簡(jiǎn)單方便。
(7) 全新的微機(jī)溫度控制系統(tǒng)，控溫精度高，可靠性和抗干擾性能；具有八路獨(dú)立的溫度控制輸出，可實(shí)現(xiàn)二十階程序升溫，具有柱箱自動(dòng)后開(kāi)門(mén)系統(tǒng)，近室溫控制能力得到提高，升/降溫速度更快；
(8) 色譜機(jī)內(nèi)置低噪聲、高分辨率24位AD電路，并具有基線存儲(chǔ)、基線扣除的功能。
技術(shù)指標(biāo)
操作顯示：彩色液晶觸摸屏
溫控區(qū)域：8路
外部事件：8路；輔助控制輸出2路
進(jìn)樣器種類：填充柱進(jìn)樣、毛細(xì)管進(jìn)樣、六通閥氣體進(jìn)樣、自動(dòng)進(jìn)樣器
檢測(cè)器數(shù)目：3個(gè)（最多）；FID、TCD、ECD、FPD和NPD任選
啟動(dòng)進(jìn)樣：手動(dòng)、自動(dòng)可選
通信接口：以太網(wǎng)：IEEE802.3
溫度控制
柱室溫度；
控溫范圍：室溫加+3℃～399℃。
控溫精度：優(yōu)于±0.1℃。
溫度梯度：室溫加+3℃～399℃，柱室有效區(qū)域內(nèi)不大于1%。
設(shè)定溫度與指示溫度之間偏差不大于1℃。
設(shè)定溫度和實(shí)際溫度之間的偏差不大于2%。
升溫階數(shù)：20階。
設(shè)定升溫速率：0.1～60℃/min。
線性程序升溫范圍：
每分種30℃時(shí)為150℃。
每分種15℃時(shí)為300℃。
每分種10℃時(shí)為350℃。
初溫終溫控制時(shí)間：0～600min。
程序升溫的重復(fù)性不大于2%。
降溫速度：由300℃降至50℃所需時(shí)間不大于10min。（其它檢測(cè)器溫度升至300℃）。
汽化室、檢測(cè)室溫度
控溫精度：
汽化室：±0.1℃（室溫+5℃至200℃以內(nèi)），200℃以上為±0.2℃。
檢測(cè)室：±0.1℃（室溫+5℃至200℃以內(nèi)），200℃以上為±0.2℃。
設(shè)定溫度與指示溫度之間的偏差不大于1℃。
閥配置系統(tǒng)
最多搭載8自動(dòng)控制個(gè)閥，可自動(dòng)序列運(yùn)行(四通閥、六通閥、十通閥以及液體進(jìn)樣閥可選)
可裝側(cè)閥箱、獨(dú)立小柱箱
輔助電子流路控制模塊（可壓力/流量控制模式）
零泄漏吹掃技術(shù)
高速切換電磁閥壽命長(zhǎng)(100萬(wàn)次，10mS)
檢測(cè)器技術(shù)指標(biāo)
氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）
檢測(cè)限：≤1.9pgC/s [n-C16]
基線噪聲：≤1PA
基線漂移：≤1PA/30min
線性范圍： ≥107(±10%)
數(shù)據(jù)采集頻率100Hz
