二、PCR基本原理
基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：
1、模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；
2、模板DNA與引物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；
3、引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍(Plateau)。到達(dá)平臺(tái)期所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。
在此同時(shí)認(rèn)識(shí)到蛋白質(zhì)是接受RNA的遺傳信息而合成的。50年代Zamecnik等在形態(tài)學(xué)和分離的亞細(xì)胞組分實(shí)驗(yàn)中已發(fā)現(xiàn)微粒體(microsome)是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成的部位；1957年Hoagland、Zamecnik及Stephenson等分離出tRNA并對(duì)它們?cè)诤铣傻鞍踪|(zhì)中轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸的功能提出了假設(shè)；1961年Brenner及Gross等觀察了在蛋白質(zhì)合成過程中mRNA與核糖體的結(jié)合；1965年Holley測(cè)出了酵母tRNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)；特別是在60年代Nirenberg、Ochoa以及Khorana等幾組科學(xué)家的共同努力破譯了RNA上編碼合成蛋白質(zhì)的遺傳密碼，隨后研究表明這套遺傳密碼在生物界具有通用性，從而認(rèn)識(shí)了蛋白質(zhì)翻譯合成的基本過程。
從分子生物學(xué)的發(fā)展過程，可以看到在近半個(gè)世紀(jì)中它是生命科學(xué)范圍發(fā)展迅速的一個(gè)前沿領(lǐng)域，推動(dòng)著整個(gè)生命科學(xué)的發(fā)展。至今分子生物學(xué)仍在迅速發(fā)展中，新成果、新技術(shù)不斷涌現(xiàn)，但分子生物學(xué)的歷史還短，積累的資料還不夠。例如：在地球上千姿萬(wàn)態(tài)的生物攜帶龐大的生命信息，迄今人類所了解的只是極少的一部分，還未認(rèn)識(shí)核酸、蛋白質(zhì)組成生命的許多基本規(guī)律；又如即使到2005年我們已經(jīng)獲得人類基因組DNA3×109bp的全序列，確定了人的5-10萬(wàn)個(gè)基因的一級(jí)結(jié)構(gòu)，但是要搞清楚這些基因產(chǎn)物的功能、調(diào)控、基因間的相互關(guān)系和協(xié)調(diào)，要理解80%以上不為蛋白質(zhì)編碼的序列的作用等等，都還要經(jīng)歷漫長(zhǎng)的研究道路?？梢哉f(shuō)分子生物學(xué)的發(fā)展前景光輝燦爛，道路還會(huì)艱難曲折。
平或放大真核細(xì)胞單拷貝基因，通過PCR方法都是不難完成的。
4、特異性強(qiáng) 作為引物的寡核苷酸與模板結(jié)合的正確性是決定反應(yīng)產(chǎn)物是否特異的關(guān)鍵。
5、對(duì)原始材料質(zhì)量要求低含微量(pg,ng)的目的DNA的粗制品或者總RNA，就可以用做反應(yīng)起始材料來(lái)獲取目的產(chǎn)物。
主要適用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)、環(huán)境科學(xué)、考古學(xué)及歷史事件解讀和衛(wèi)生安全方面。
三、儀器特點(diǎn)：
◆可調(diào)節(jié)壓力的熱蓋,防止液體揮發(fā)，彩色寬屏顯示，內(nèi)容豐富，色彩鮮明視覺明快。
◆方便靈活的加熱模塊更換裝置,輕松更換所需模塊,可更換彩色孔號(hào)標(biāo)記，標(biāo)記更清晰，美觀。
◆新穎的模塊導(dǎo)線插座設(shè)計(jì),真正做到模塊無(wú)線更換。
◆封閉的擴(kuò)增區(qū)域,有效防止液體在管壁的結(jié)露現(xiàn)象，熱蓋壓力報(bào)警裝置,防止壓力過大而損壞試管。
◆的擴(kuò)增區(qū)與操作區(qū)左右結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì),使操作者更為方便與安全。
四、型號(hào)規(guī)格
| 樣本容量 | 64×0.2ml | 36×0.5ml |
| 模塊工作溫度范圍 | 0℃ | 0℃ |
| 升溫速率 | ≥3.0℃/s | ≥2.8℃/s |
| 降溫速率 | ≥2.8℃/s | ≥2.5℃/s |
| 溫度均一性 | ≤±0.5℃(95℃) | ≤± 0.3℃(20℃-75℃) |
| 溫度精確性 | ≤0.1℃ | ≤0.1℃ |
| 溫度波動(dòng)度 | ≤0.1℃ | ≤0.1℃ |
| 循環(huán)數(shù) | 99 | 99 |
| 耗能（輸入功率 | 350W | 350W |
| 外形尺寸(長(zhǎng)×寬×高) | 370mm× | 370mm× |
| 重量 | 4.8kg | 4.8kg |
