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組織 / 細(xì)胞基因組 DNA 快速提取試劑盒

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  • 100次1279.20元15 盒可售
  • 100 次×22496.00元15 盒可售
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  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時(shí)間2023-11-06
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限9
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  • 產(chǎn)品數(shù)量9954
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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。


上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚(yú))的科研試劑。


公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國(guó)科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!


公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問(wèn)題可申請(qǐng)退換,有技術(shù)疑問(wèn)可隨時(shí)給于解答,一對(duì)一的客服服務(wù),客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。







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貨號(hào)A-Hc2031 分類核酸純化 規(guī)格100 次、100 次×2
品牌撫生
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組織 / 細(xì)胞基因組 DNA 快速提取試劑盒 產(chǎn)品詳情

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

產(chǎn)品介紹:

組織 / 細(xì)胞基因組 DNA 快速提取試劑盒保存條件:本試劑盒在室溫儲(chǔ)存 12 個(gè)月不影響使用效果。

產(chǎn)品介紹:
結(jié)合液/蛋白酶 K 迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶,然后基因組 DNA 在 高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過(guò)一系列快速的漂洗-離心的 步驟,抑制物去除液和漂洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,最后低鹽的洗脫緩沖 液將純凈基因組 DNA 從硅基質(zhì)膜上洗脫。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.重復(fù)性好:離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小??朔藝?guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280 典型的比值達(dá) 1.7~1.9,長(zhǎng)度可達(dá) 30kb -50kb,可直接用于 PCR,Southern-blot 和各種酶切反應(yīng)。
注意事項(xiàng):
1.結(jié)合液 CB 或者抑制物去除液 IR 低溫時(shí)可能出現(xiàn)析出和沉淀,可以在 37℃水浴幾分 鐘幫助重新溶解,恢復(fù)澄清透明后冷卻到室溫即可使用。

 2.避免試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH 值變化。
 3.結(jié)合液 CB 和抑制物去除液 IR 中含有刺激性化合物,操作時(shí)要戴乳膠手套,避免沾染皮膚,眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí),要用大量清水或者生理鹽水沖洗。

4.洗脫液 EB 不含有螯合劑 EDTA,不影響下游酶切、連接等反應(yīng)。也可以使用水洗脫, 但應(yīng)該確保批 pH 大于 7.5,pH 過(guò)低影響洗脫效率。用水洗脫 DNA 應(yīng)該保存在-20℃。 DNA 如果需要長(zhǎng)期保存,可以用 TE 緩沖液洗脫(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是 EDTA 可能影響下游酶切反應(yīng),使用時(shí)可以適當(dāng)稀釋。
自備試劑:無(wú)水乙醇、1xPBS 緩沖液、RNase A(10mg/ml)(RNase A(10 mg/ml) 有售)。
操作步驟:
提示:第一次使用前請(qǐng)先在漂洗液 WB 中加入
量無(wú)水乙醇,充分混勻,加入后請(qǐng)及時(shí)在方框打鉤標(biāo)記已加入乙醇,以免多次加入!
如果需要去除 RNA,可在加蛋白酶 K 溶液前先加入 4μl RNaseA(10mg/ml)溶液振蕩 15sec,室溫放置 5 min

1.組織培養(yǎng)細(xì)胞
a. 收集約 105-10
6懸浮細(xì)胞到一個(gè) 1.5ml 離心管;對(duì)于貼壁細(xì)胞,應(yīng)該先用胰蛋白消化后吹打下來(lái)收集。
b. 12,000rpm 離心 10 sec,使細(xì)胞沉淀下來(lái)。棄上清,留下細(xì)胞團(tuán)和大約 10-20μl殘留的液體。
c. 加 200μl 1×PBS 重懸洗滌細(xì)胞,12,000rpm 離心 10 sec,使細(xì)胞沉淀下來(lái)。棄上清, 將細(xì)胞沉淀重懸于 180μl 1XPBS 中。
d. 加入 20μl 蛋白酶 K (20mg/ml)溶液,充分混勻(可選步驟:為清除 RNA,加入 5µl RNase A(10mg/ml),振蕩混勻,可選擇室溫放置 5min),再加入 200μl結(jié)合液 CB,立刻渦旋振蕩充分混勻,在 70℃放置 10 min。
e. 冷卻后入 200μl 無(wú)水乙醇,立刻渦旋振蕩充分混勻,此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀。
f. 將上一步混合物(包括可能有的沉淀)加入吸附柱 AC 中,(吸附柱放入收集管中)12,000rpm 離心 1 min,倒掉收集管中的廢液。
g. 按操作步驟 4 繼續(xù)后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
2.動(dòng)植物組織(例如鼠肝腦或者植物葉片)
a. 新鮮或者解凍的組織在液氮中研磨成細(xì)粉后或者用解剖切成小碎塊(切成微塊可以提高產(chǎn)量)后取 20-50mg,轉(zhuǎn)入裝有 180μl 組織裂解液 TL 的 1.5ml 離心管中, 用大口徑槍頭吹打混勻。
b. 加入 20μl 的蛋白酶 K 溶液(20mg/ml),立刻渦旋振蕩充分混勻。
c. 將裂解物放置在 55℃水浴 1-3 小時(shí)或者直到組織消化
,期間輕柔的振蕩幾次幫助裂解。為清除 RNA,加入 5µl RNase A(10mg/ml),振蕩混勻(可選擇室溫放置 5 min)。
d. 加入 200μl 結(jié)合液 CB,立刻渦旋振蕩充分混勻,70℃放置 10 min。
e. 冷卻后加入 200μl 無(wú)水乙醇,立刻渦旋振蕩充分混勻,此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀。
f. 用 1ml 的槍頭吸取混合物,將混合物加入一個(gè)吸附柱 AC 中,(吸附柱放入收集管中)12,000rpm 離心 1 min,倒掉收集管中的廢液。
g. 按操作步驟 4 繼續(xù)后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
3.動(dòng)物組織(鼠尾)
a.將 0.2-0.5cm 的鼠尾巴尖(即 20-50mg)剪碎(一定要剪 0-2cm 范圍內(nèi)的尾巴尖,否則裂解效果不好),或者在液氮中研磨組織成細(xì)粉后,轉(zhuǎn)入裝有 180μl 組織裂解液 TL 的 1.5ml 離心管中, 用大口徑槍頭吹打混勻。
b.加入 20μl 的蛋白酶 K(20mg/ml),立刻渦旋振蕩充分混勻。
c.將裂解物放置在 55℃水浴 3 小時(shí)或者直到組織消化
,期間輕柔的振蕩幾次幫助裂解。為清除 RNA,加入 5µl RNase A(10mg/ml),振蕩混勻(可選擇室溫放置 5 min)。
d.用一個(gè) 1ml 不帶針頭的一次性輸液抽打裂解物 2-3 次。
e.加入 200μl 結(jié)合液 CB 和 200μl 無(wú)水乙醇,立刻渦旋振蕩充分混勻。
f.12,000rpm 離心 5 min,將上清加入一個(gè)吸附柱 AC 中,(吸附柱放入收集管中)12,000rpm 離心 30-60 sec,倒掉收集管中的廢液。
g.按操作步驟 4 繼續(xù)后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
4.加入 500μl 抑制物去除液 IR,12,000rpm 離心 30 sec,棄廢液。
5.加入 500μl 漂洗液 WB(請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇!),12,000rpm 離心 30 sec,棄掉廢液。
6.重復(fù)操作步驟 5。
7.將吸附柱 AC 放回空收集管中,12,000rpm 離心 2 min,將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘,以晾干吸附材料中殘余的漂洗液, 以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。
8. 取出吸附柱 AC,放入一個(gè)干凈的離心管中,在吸附膜的中間部位加 50-100 洗脫緩沖液 EB(洗脫緩沖液事先在 65℃水浴中預(yù)熱效果更好),室溫放置 3-5 min,12,000rpm 離心 1 min。為了增加基因組 DNA的得率,將得到的溶液重新加入離心吸附柱中,室溫放置 2 min,12,000rpm 離心 1 min。(注意: DNA 產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防 DNA降解。)



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