臺(tái)盼藍(lán)染色液 (0.4%)100ml售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
臺(tái)盼藍(lán)染色液 (0.4%)100ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
臺(tái)盼藍(lán)染色液 (0.4%)100ml售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
恒河猴腎細(xì)胞;MMK3
GFRA1 Others Canine 狗 GFRA1 / GFR alpha-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
Ls-174-T細(xì)胞,人結(jié)腸癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,SK23細(xì)胞 人細(xì)胞;Hela
人肺細(xì)胞;HLF-a
APP Others Human 人 APP / Protease nexin-II 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
心室肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
IgG3 Others Human 人 IgG3-Fc / IGHG3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CTLA4 Ig-24中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 CTLA4 Ig-24 China hamster ovary cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
NOV Protein Canine 重組狗 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標(biāo)簽)
G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞RM
HA Others H5N9 甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人扁桃體上皮細(xì)胞HTEpiC
雪羊皮膚細(xì)胞;SSHS1
倉(cāng)鼠源細(xì)胞 管癌細(xì)胞,T-47D細(xì)胞 B6YH4細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞支原體陽(yáng)性
QBC-939, 人膽管癌細(xì)胞 Human
SFTPD Others Cynomolgus 食蟹猴 SFTPD / COLEC7 / Collectin-7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠可溶性糖蛋白VI(sGPVI)ELISA試劑盒 ,英文名: sGPVI ELISA Kit
人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor3,VEGFR-3ELISAKit 96T/48T
鳥(niǎo)H5N1 IgG抗體ELSIA 試劑盒 Bird influenza A virus subtype H5N1 IgG antibody ELISA Kit
CLIAKitforOPG(RabbitOsteoprotegerin)ELISAKit兔骨保護(hù)素規(guī)格:48T/96T
糖類總量氨基熒光定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitPγ人γ肽規(guī)格:48T/96T
小鼠凋亡抑制基因(Bcl-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human myeloperoxidase specificity of anti neutrophil cytoplasmic antibody IgG (MPO-ANCA IgG)ELISA Kit 人髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒
HumancoagulationfactorⅩⅢ,FⅩⅢELISAKit 人*ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanArginase,ArgELISA試劑盒人*酶(Arg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物源性食品大麥(barley)基因檢測(cè)試劑盒20次
HumanThyroidAntibody,TAbELISAKit人甲狀腺抗體(TAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
臺(tái)盼藍(lán)染色液 (0.4%)100ml售后服務(wù)兔血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔血清一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝