LSI系列激光片層掃描顯微鏡以靈敏度,分辨 率以及成像速度幫助生物學家解讀活體樣品的三維動態(tài)過程。LSI系列顯微鏡使用了光學和工程技術(shù)來 產(chǎn)生一束超薄的線性貝塞爾片層光,并用它來實現(xiàn)對生物樣品的高精度光學層析。此項技術(shù)的應用不僅顯 著提高了片層光顯微系統(tǒng)的成像分辨率,而且允許系統(tǒng)使用超弱的激發(fā)光便可從樣品中獲得足夠的信號強度, 所以極大的減弱了樣品在成像時承受的光毒性,延長了樣品的有效觀測時間,以此幫助觀測者獲得更多高質(zhì)量的成像數(shù)據(jù)。
超越激光共聚焦顯微技術(shù)
LSI系列顯微鏡將激發(fā)光的能量嚴格限制在中心厚度不到400納米的片層光中。片層光與探測物鏡的焦平面重合,用來激發(fā)僅在探測景深范圍內(nèi)的樣品結(jié)構(gòu),因此在成像時不會產(chǎn)生任何的背景噪聲。
同時配合探測物鏡具有超大數(shù)值孔,可以高效的接收樣品發(fā)出的微弱熒光信號,且產(chǎn)生的圖像可達光學極限分辨率。相較與共聚焦顯微,LSI系列在以下方面具有顯著優(yōu)勢:
高速活細胞成像 超低的光毒性
★拍攝速度可達500幅每秒 ★相較共聚焦減弱1000倍!
高分辨率三維結(jié)構(gòu)成像 LBS激光片層掃描顯微系統(tǒng)
★250nm橫向分辨率 開創(chuàng)了五維活細胞生物成像的時代:
★350nm軸向分辨率 ★3維空間+1維時間+1維顏色
LSI系列片層掃描顯微系統(tǒng)的成像原理示意簡圖
超越傳統(tǒng)激光片層掃描顯微技術(shù)
傳統(tǒng)的片層光顯微技術(shù)普遍通過掃描匯聚的高斯光束或者使用柱面鏡壓縮一個準直的高斯頭束來產(chǎn)生片層光而這兩種方式產(chǎn)生的片層光在厚度和長度皆被光的衍射特性限制。而LBS技術(shù)通過一系列光學手段則可以打破這一限制:產(chǎn)生更薄且更長的LSI系列片層光。因此LSI系列系統(tǒng)在保持傳統(tǒng)片層掃描顯微技術(shù)具有的高成像速度和低光毒性優(yōu)勢的同時,憑藉更精細的光學層析能力進一步顯著地提高了成像分辨率和靈敏度。
通過掃描或者用柱面鏡壓縮一個高斯光束得到的?。ǖL度不足)或者長(但過厚)的片層光
LSI系列系統(tǒng)產(chǎn)生的超薄且長的LSI系列片層光
相較于傳統(tǒng)片層光顯微系統(tǒng),LSI系列技術(shù)顯著提高了成像系統(tǒng)的光學層析能力和圖片的信噪比。比例尺:3微米
亞細胞分辨多維光片成像系統(tǒng)
高度集成的設計
LSI系列片層掃描顯微鏡可立即用于活細胞成像實驗:每臺顯微鏡都集成的一套活細胞培養(yǎng)(灌注)系統(tǒng),這一系統(tǒng)配有精確的溫度/二氧化碳環(huán)境控制模塊從而實現(xiàn)長時間活細胞成像;同時集成了一套具有大視野的EPI熒光顯微模塊用于定位拍攝目標;以及一套可達納米精度的三維電動樣品臺,和最多可集成6通道的Solar2.0光纖激光模塊作為光源
具有溫度/C02控制的活細胞樣品灌注池
◆可注入2-5ml培養(yǎng)液或任何液體用于浸潤樣品
◆可實現(xiàn)拍攝時更換培養(yǎng)液或加入藥物
◆集成了一個Epi熒光成像通道,可選配4x/10x/50x空氣物鏡
適用范圍
LSI系列激光片層掃描顯微鏡可適用于不同種類與大小的樣品??捎^測的樣品范圍包括了細胞爬片,酵母菌細胞或植物細胞組織等。加裝大樣品成像模塊后可將應用擴展至胚胎、小型動物如線蟲,果蠅幼蟲或者斑馬魚的觀測
應用實例
LSI系列片層掃描顯微系統(tǒng)拍攝的細胞中微管(綠色)和線粒體(紅色)結(jié)構(gòu)的三維熒光顯微圖像
Hela細胞中的囊泡運 酵母菌細胞中的高爾基體(綠色)和待研究蛋白(紅色) 原代培養(yǎng)神經(jīng)元在 動三維追跡 受到化學刺激后的
動態(tài)變化