非洲豬瘟試劑盒 非洲豬瘟試劑盒 減少操作人員的操作步驟，降低由人工操作帶來(lái)的誤差，進(jìn)而提高結(jié)果的準(zhǔn)確性。
核酸DNA提取試劑盒（柱膜法）使用說(shuō)明書(shū)
【產(chǎn)品名稱(chēng)】
通用名稱(chēng)：病毒DNA提取試劑盒
英文名稱(chēng)：Extraction Kit for Virus DNA
【預(yù)期用途】
本試劑盒主要用于疑似病毒等病原感染抗凝血、血淸、拭子、組織、飼料及環(huán)境中的病毒DNA的提取，純化的核酸可適用于各種常規(guī)操作及PCR試驗(yàn)。
【試劑盒組分】
I、試劑盒組成及貯藏條件
名稱(chēng) | 20 T | 50 T |
1、吸附柱 | 20個(gè) | 50個(gè) |
2、收集管 | 20個(gè) | 50個(gè) |
3、裂解液 | 5 mL | 11 mL |
4、洗液I | 13 mL | 32 mL |
5,洗液II | 13 mL | 32 mL |
6.洗脫液 | 1.2 mL | 3 mL |
2、 保存條件及有效期：室溫下保存，有效期12個(gè)月.
3、 需自備材料：無(wú)水乙醇、1.5 mL無(wú)菌離心管、1.5 mL無(wú)菌離心管（長(zhǎng)臂型）、生理鹽水、研缽、無(wú)菌
1mL, 2OOuL、10uL槍頭、記號(hào)筆等。
【操作步驟】
一、樣品制備
1、 血液樣品：抗凝血樣品置離心管中，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上層血漿；非抗凝血樣品置離心 管中，待凝固后，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上層血清，置于滅菌離心管中，編號(hào)待檢。
2、 組織樣品：采集脾臟、肝臟、淋巴結(jié)、扁桃體等病變組織樣品0.1g.組織勻漿器或研缽中充分勻漿或研磨，加入1 mL生理鹽水混勻，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心骨中，編號(hào)待檢。
3、 口腔液：進(jìn)食前用拭子/口腔液采集袋或自制棉線綁紗布團(tuán)吸引動(dòng)物咀嚼，收集口腔液大于 500uL， 8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心管中，編號(hào)待檢。
4、 飼料：取適量研磨后的飼料（約0.2g），放入含1 mL生理鹽水或PBS（PH為7.4）緩沖液的2 mL EP 管屮，振蕩混勻，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心管中,編號(hào)待檢.
5、 灰塵：用無(wú)菌棉簽蘸取適量環(huán)境表面上的灰塵，放入含1 mL生理鹽水或PBS（PH為7.4）緩沖液的2 mL EP管中，振蕩混勻，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心管中，編號(hào)待檢。
二、DNA的提取
1、取裂解液200uL加入無(wú)核酸酶1.5 mL離心曾屮，分別加入血漿/血清/組織液等樣品液200uL. 震蕩混勻10秒或顛倒混勻10次，室溫放置5分鐘（如果室內(nèi)溫度較低時(shí).需放置25C水浴溫育），再加入200uL無(wú)水乙醇，顛倒混勻10秒；若樣品渾濁則先12000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘處理，取上清液，以避免堵塞柱子；
2、 將液體轉(zhuǎn)入套有收集管的吸附柱中， 12000rpm離心1分鐘：
3、 棄收集管液體，向吸附柱中加600uL洗液I , 12000 rpm離心1分鐘;
4、 棄收集管液體，向吸附柱中加600uL洗液II， 12000 rpm離心I分鐘；
5、 棄收集管液體，12000 rpm離心2分鐘，以*去除殘留洗液；
6、將吸附柱轉(zhuǎn)入新的無(wú)核酸酸1.5mLEP管（長(zhǎng)臂型）中，向柱中央滴加50 uL洗脫液，靜置1分鐘, 12000 rpm離心1分鐘，EP管中液體即為病毒DNA。
【注意事項(xiàng)】
1、 實(shí)驗(yàn)前諾仔細(xì)閱讀本試劑盒說(shuō)明書(shū)，嚴(yán)格按照操作步驟執(zhí)行.在操作過(guò)程中對(duì)時(shí)間、試劑體積等 粘確控制可以獲得好的結(jié)果。
2, 樣本應(yīng)新鮮采集使用，或低溫運(yùn)輸儲(chǔ)存；
3, 樣本具有潛在感染風(fēng)險(xiǎn)，核酸的提取應(yīng)在核酸提取實(shí)驗(yàn)室的生物安全柜中進(jìn)行。
4、 核酸提取冇關(guān)耗材確保高溫滅菌，提取后核酸盡快進(jìn)入下一步試驗(yàn)或冷凍保存待用。
5, 試劑使用前應(yīng)混合均勻，試劑具有一定腐蝕性，使用時(shí)請(qǐng)戴手套、口罩做好防護(hù)。
6. 低溫下裂解液出現(xiàn)結(jié)晶數(shù)屬正?，F(xiàn)象，可在60°C水浴加熱助溶后使用。
7、 實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢棄物應(yīng)及時(shí)收集，遠(yuǎn)離PCR實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行無(wú)害化處理。
僅供獸醫(yī)診斷使用
