商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/24樣 |
檢測(cè)方法 | 可見分光光度法 |
貨號(hào) | GOY-01S6326 |
商品介紹：
測(cè)定意義
LDH（EC 1.1.1.27）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是糖酵解途徑的末端酶，催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng)，伴隨著NAD+/NADH之間互變。
測(cè)定原理：
LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸進(jìn)一步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在堿性溶液中顯棕紅色，顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制： 市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。 肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集： 全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
化中心粒蛋白Nudel抗體Human P3(Caspase-3) ELISA Kit犬骨橋素elisa檢測(cè)試劑盒多少錢
類固脫氫樣蛋白NSDHL抗體Human CYCS(Cytochrome c) ELISA Kit犬甲狀腺素elisa檢測(cè)試劑盒多少錢
化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human APOA1(Apolipoprotein A-I) ELISA Kit犬雌二醇elisa檢測(cè)試劑盒多少錢
化1型神經(jīng)纖維瘤抗體Human NOS1/nNOS(Nitric oxide synthase, brain) ELISA Kit犬組elisa檢測(cè)試劑盒多少錢
化谷受體2B抗體Human APOC1(Apolipoprotein C-I) ELISA Kitα1微球蛋白elisa檢測(cè)試劑盒多少錢
化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human PDGFB(Plaet-derived growth factor subunit B) ELISA Kit鮭魚補(bǔ)體蛋白4elisa檢測(cè)試劑盒哪里有買
化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human APCS(Serum amyloid P-component) ELISA Kit鴨白介素1elisa檢測(cè)試劑盒品牌
化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human P1(Caspase-1) ELISA Kit猴白介素6elisa檢測(cè)試劑盒哪里有買
乳酸脫氫酶（LDH）可見分光光度法檢測(cè)試劑盒聚烯酰 非離子型，分子量：200萬-1400萬Anti-OVA/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體IgG雞τ-蛋白激1(τPK1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
N-鄰 99%Anti-ox-LDL/FITC 熒光素標(biāo)記抗氧化低密度脂蛋白抗體IgG雞膀胱腫瘤抗原(BTA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
蘿卜硫素 90%Anti-OXR /FITC 熒光素標(biāo)記整合素樣金屬蛋白與1型-7抗體IgG雞抗環(huán)胍氨肽抗體(ACCPA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
酵母DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
溶壁酶（破壁酶）干粉
蝸牛酶干粉
消解酶（溶細(xì)胞酶）干粉
真菌DNAout
柱式真菌DNAout
細(xì)胞器DNA提取
絲狀真菌線粒體DNAout
線狀DNA清除劑
柱式動(dòng)物線粒體DNAout，PCR級(jí)
柱式動(dòng)物線粒體DNAout，測(cè)序級(jí)
柱式昆蟲mtDNAout，測(cè)序級(jí)（停產(chǎn)）
柱式血液mtDNAout，測(cè)序級(jí)（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
柱式植物mtDNAout，測(cè)序級(jí)（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
柱式植物葉綠體DNAout
細(xì)菌DNA提取
Southern級(jí)細(xì)菌（G+）DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
Southern級(jí)細(xì)菌（G-）DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
百萬堿基級(jí)細(xì)菌（G+）DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
百萬堿基級(jí)細(xì)菌（G-）DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
大提柱式土壤DNAout
大提柱式細(xì)菌DNAout
六方氮化 99.9% metals basis,1～2μmAnti-P38 MAPK/FITC 熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激p38抗體IgG綿羊血清淀粉樣蛋白A(SAA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
碳化 1-10 μm，98%Anti-P38 MAPK/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記絲裂原活化蛋白激p38抗體IgG綿羊化腺苷活化蛋白激(AMPK)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。
