由于磷酸肽的分子量很低,電離效率也很低,用質(zhì)譜法檢測蛋白質(zhì)中的磷酸肽并不容易。因此,在LC/MS之前,盡可能地富集磷酸肽是非常重要的。
GL Sciences的產(chǎn)品(TiO2),證實了LC-MS 分析蛋白消化產(chǎn)物之前對磷酸化肽富集效果有效的方法之一, 這也取代了曾經(jīng)是磷酸肽樣品預處理主要手段的IMAC方法。 作為一種互補技術(shù),采用和IMAC結(jié)合使用,能夠使磷酸化肽分析得到優(yōu)異的結(jié)果。
以三種晶體形式存在,稱為金紅石,銳鈦礦和板鈦礦。 金紅石和銳鈦礦是常見且有效的磷酸肽富集。 金紅石與銳鈦礦的比例對于磷酸肽的有效富集是非常重要的。GL Sciences 采用*技術(shù)能夠制造出晶型結(jié)構(gòu)比例優(yōu)異、球形特別規(guī)則的二氧化肽微粒填料,這也是 GL Sciences的Phos-TiO 以及 MonoTip 系列產(chǎn)品顯示性能的主要原因。
MS分析磷酸化肽
使用GL Sciences的Phos-TiO樣品富集產(chǎn)品用于富集磷酸化肽的原理
磷酸基團在酸性條件下優(yōu)先吸附在表面上,并在堿性條件下洗脫。 通過上樣或者清洗的緩沖液中添加酸改性劑,可以減少非特異性結(jié)合TiO 2的非磷酸化酸肽。
