近期研究表明細(xì)胞外的囊泡-外泌體（exosomes）跟各種病的進(jìn)程和發(fā)展有很大的相關(guān)性，包括癌癥的轉(zhuǎn)移等；因此外泌體做為生物標(biāo)記物在藥物開發(fā)應(yīng)用中被廣泛關(guān)注。
然而它很難在生物體液（例如血清）中被分離純化。EVSecond 是一種與門為外泌體開發(fā)的尺寸排阻類型的固相萃取小柱. 高度純化的外泌exosomes 可以被簡單的從血清、血漿以及細(xì)胞上清液中分離出來。
＊：EVSecond：Extracellular Vesicle Isolation by Size Exclusion Chromatography on Drip Column
■特點(diǎn)
? 不使用超速離心機(jī)，以自然滴落的方式操作，操作簡單
? 更快的去除樣品中的自由RNA和自由蛋白質(zhì)，收集到的miRNA具有高解析和高感度
? 外泌體被PBS輕輕洗脫下來，不會破壞結(jié)構(gòu)，使得可以在更廣泛的應(yīng)用中得到使用。
? EVSecond L70在室溫條件下進(jìn)行純化操作，與EVSecond相比混合時(shí)間大幅縮短
■參數(shù)對比
new EVSecond L70 EVSecond
長度 110 mm 75 mm
填料長度 70 mm 50 mm
保存方式 冷藏保存 冷藏保存
操作條件 室溫 低溫室
混合方式 室溫條件
10～30分鐘 低溫條件
一段時(shí)間
上樣量 50～1,500 μL 50～700 μL
結(jié)塊處理 PBS 1,500 μL×3 次 PBS 700μL×6 次
不需要超速離心和配置抽吸裝置，全部通過自然滴落的方式進(jìn)行提純。但是配備GL-SPE EXO餾分收集架操作更方便。
注：請用anti-CD9-anti-CD63 sandwich ELISA, anti-CD9 Western blotting 等方法來確定外泌體洗脫的初次片段
【 與傳統(tǒng)提取方法比較 】
比較了密度梯度離心法、抗體親和法以及EVSecond三種提取方法，提取的外泌體、以及細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)經(jīng)LC/MS方法分析。EVSecond提取方法得到的游離蛋白質(zhì)比例較低
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