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ZCPCRCAL 核酸擴(kuò)增檢測(cè)分析儀核酸提取儀溫度檢定系統(tǒng)

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  • 型號(hào)ZCPCRCAL
  • 品牌其他品牌
  • 所在地合肥市
  • 更新時(shí)間2022-04-13
  • 廠(chǎng)商性質(zhì)生產(chǎn)廠(chǎng)家
  • 入駐年限5
  • 實(shí)名認(rèn)證已認(rèn)證
  • 產(chǎn)品數(shù)量48
  • 人氣值6528
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智測(cè)電子,專(zhuān)業(yè)致力于計(jì)量校驗(yàn)、傳感器檢測(cè)技術(shù),研發(fā)生產(chǎn)計(jì)量校驗(yàn)儀器設(shè)備、檢測(cè)儀器、傳感器等,為用戶(hù)提供計(jì)量、驗(yàn)證、檢測(cè)解決方案。

公司產(chǎn)品:

如熱阻熱偶檢定系統(tǒng)、環(huán)境試驗(yàn)設(shè)備校準(zhǔn)系統(tǒng)、電工儀表檢定系統(tǒng)、滅菌驗(yàn)證系統(tǒng)、純蒸汽質(zhì)量測(cè)試系統(tǒng)、無(wú)線(xiàn)記錄儀、校準(zhǔn)恒溫槽等廣泛應(yīng)用于計(jì)量、質(zhì)檢、科教、工業(yè)、生物醫(yī)藥等領(lǐng)域。


同時(shí),公司是計(jì)量校準(zhǔn)、工業(yè)測(cè)試儀器行業(yè)*美國(guó)FLUKE公司的核心經(jīng)銷(xiāo)商,美國(guó)FLIR熱像儀公司*代理商。為用戶(hù)提供*的測(cè)試儀器及計(jì)量校準(zhǔn)技術(shù)信息,助你與世界同步。

旗下機(jī)構(gòu):

合肥智測(cè)電子有限公司

上海智與懋檢測(cè)儀器設(shè)備有限公司





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產(chǎn)地國(guó)產(chǎn) 加工定制 適用領(lǐng)域醫(yī)藥
核酸擴(kuò)增檢測(cè)分析儀核酸提取儀溫度檢定系統(tǒng)
系統(tǒng)配備高精度測(cè)溫儀1611A,采集速度可達(dá)10ms/通道2.鍍金工藝探頭,高貼合實(shí)驗(yàn)孔,高精度測(cè)溫3.升級(jí)工藝軟排線(xiàn),不易折損,體積更小4.支持定制探頭板,適用于便攜基因擴(kuò)增儀、熒光檢測(cè)法檢測(cè)核酸濃度的全自動(dòng)分析工作
站、堆疊站等,滿(mǎn)足超多孔數(shù)需求5.雙供電方式,支持充電和插電,方便現(xiàn)場(chǎng)使用
核酸擴(kuò)增檢測(cè)分析儀核酸提取儀溫度檢定系統(tǒng) 產(chǎn)品詳情

核酸擴(kuò)增檢測(cè)分析儀核酸提取儀溫度檢定系統(tǒng)

PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;剛開(kāi)始時(shí), 探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步?;蛘呤褂脽晒馊玖?span>SYBR。SYBR可以結(jié)合到雙鏈DNA上面,當(dāng)體系中的模板被擴(kuò)增時(shí),SYBR可以有效結(jié)合到新合成的雙鏈上面,隨著PCR的進(jìn)行,結(jié)合的SYBR染料越來(lái)越多,被儀器檢測(cè)到的熒光信號(hào)越來(lái)越強(qiáng),從而達(dá)到定量的目的。

折疊編輯本段應(yīng)用領(lǐng)域

臨床疾病診斷:各型肝炎、艾滋病、結(jié)核、性病等傳染病診斷和療效評(píng)價(jià);地中海貧血、血友病、性別發(fā)育異常、智力低下綜合癥、胎兒畸形等優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè);腫瘤標(biāo)志物及瘤基因檢測(cè)實(shí)現(xiàn)腫瘤病診斷;遺傳基因檢測(cè)實(shí)現(xiàn)遺傳病診斷。


食品安全:食源微生物、食品過(guò)敏源、轉(zhuǎn)基因、乳品企業(yè)阪崎腸桿菌等檢測(cè)。

科學(xué)研究:醫(yī)學(xué)、農(nóng)牧、生物相關(guān)分子生物學(xué)定量研究。

智測(cè)電子基因擴(kuò)增儀溫度校準(zhǔn)系統(tǒng)多通道PCR溫度計(jì)可被廣泛應(yīng)用于PCR儀制造商,基因研究實(shí)驗(yàn)室,生物研究所, 醫(yī)藥研發(fā),計(jì)量所,第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu),疾控中心,血液中心,出入境檢驗(yàn),刑事鑒定,司法鑒定,試劑生產(chǎn)商等行業(yè)


折疊編輯本段前景展望

實(shí)時(shí)熒光定量PCR的出現(xiàn),極大地簡(jiǎn)化了定量檢測(cè)的過(guò)程,而且真正實(shí)現(xiàn)了定量。多種檢測(cè)系統(tǒng)的出現(xiàn),使實(shí)驗(yàn)的選擇性更強(qiáng)。自動(dòng)化操作提高了工作效率,反應(yīng)快速、重復(fù)性好、靈敏度高、特異性強(qiáng)、結(jié)果清晰。隨著生物芯片技術(shù)和熒光探針定量技術(shù)的結(jié)合,熒光定量PCR在醫(yī)學(xué)檢測(cè)及其他各個(gè)領(lǐng)域中的應(yīng)用前景將更加廣闊,令人欣喜。盡管如此我們也應(yīng)清晰認(rèn)識(shí)到,FQ-PCR技術(shù)在我國(guó)各個(gè)研究領(lǐng)域的應(yīng)用并不多見(jiàn),這就需要我國(guó)學(xué)者迎頭趕上,使FQ-PCR技術(shù)更充分地推廣,以推動(dòng)研究工作的快速發(fā)展。

折疊編輯本段操作步驟

熒光定量PCR 實(shí)驗(yàn)步驟:

折疊樣品RNA的抽提

取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的氯仿,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚氯仿相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。

折疊RNA質(zhì)量檢測(cè)

1)紫外吸收法測(cè)定

先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。

濃度測(cè)定

A260下讀值為1表示40 μg RNA/ml。樣品RNA濃度(μg/ml)計(jì)算公式為:A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 μg/ml。具體計(jì)算如下:

RNA溶于40 μl DEPC水中,取5ul,1:100稀釋至495μlTE中,測(cè)得A260 = 0.21

RNA 濃度= 0.21 ×100 ×40 μg/ml = 840 μg/ml 0.84 μg/μl

5ul用來(lái)測(cè)量以后,剩余樣品RNA35 μl,剩余RNA總量為:

35 μl × 0.84 μg/μl = 29.4 μg

純度檢測(cè)

RNA溶液的A260/A280的比值即為RNA純度,比值范圍1.82.1。

2)變性瓊脂糖凝膠電泳測(cè)定

制膠

1g瓊脂糖溶于72ml水中,冷卻至60℃,10 ml10× MOPS電泳緩沖液和18 ml37%

10×MOPS電泳緩沖液

濃度 成分

0.4M MOPSpH 7.0

0.1M 乙酸鈉

0.01M EDTA

灌制凝膠板,預(yù)留加樣孔至少可以加入25 μl溶液。膠凝后取下梳子,將凝膠板放入電泳槽內(nèi),加足量的1×MOPS電泳緩沖液至覆蓋膠面幾個(gè)毫米。

準(zhǔn)備RNA樣品

3μgRNA,加3倍體積的甲醛上樣染液,加EB于甲醛上樣染液中至終濃度為10μg/ml。加熱至70℃孵育15分鐘使樣品變性。

電泳

上樣前凝膠須預(yù)電泳5min,隨后將樣品加入上樣孔。5–6V/cm電壓下2h,電泳至溴酚蘭指示劑進(jìn)膠至少2–3cm

紫外透射光下觀(guān)察并拍照

28S18S核糖體RNA的帶非常亮而濃(其大小決定于用于抽提RNA的物種類(lèi)型),上面一條帶的密度大約是下面一條帶的2倍。還有可能觀(guān)察到一個(gè)更小稍微擴(kuò)散的帶,它由低分子量的RNA(tRNA5S核糖體RNA)組成。在18S28S核糖體帶之間可以看到一片彌散的EB染色物質(zhì),可能是由mRNA和其它異型RNA組成。RNA制備過(guò)程中如果出現(xiàn)DNA污染,將會(huì)在28S核糖體RNA帶的上面出現(xiàn),即更高分子量的彌散遷移物質(zhì)或者帶,RNA的降解表現(xiàn)為核糖體RNA帶的彌散。用數(shù)碼照相機(jī)拍下電泳結(jié)果。

探頭板支持客戶(hù)定制,滿(mǎn)足不同孔數(shù)需求

智測(cè)電子發(fā)布PCR基因擴(kuò)增儀、基因分析工作站、核酸擴(kuò)增檢測(cè)分析儀核酸提取儀溫度檢定系統(tǒng)



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