*節(jié) 概 述
人們?nèi)粘I钪惺秤玫母鞣N蔬菜水果,由于自然環(huán)境的變化和各種病蟲害的侵蝕及耐藥性的增強,造成許多菜農(nóng)、果農(nóng)在蔬菜水果生產(chǎn)過程中違規(guī)濫用或大量使用各種農(nóng)藥。這些農(nóng)藥違規(guī)濫用或使用不當(dāng),會殘留在蔬菜、水果等食品上。人們食用帶有農(nóng)藥殘留的水果、蔬菜后,嚴(yán)重者會發(fā)生食物中毒。長期食用,日積月累,會產(chǎn)生人體慢性中毒,甚至導(dǎo)致各種癌癥等不治之癥。農(nóng)藥殘留嚴(yán)重地威脅著人們的生命安全,吞噬著人們的身心健康。我國目前農(nóng)藥殘留較為突出的是蔬菜中的農(nóng)藥殘留問題。近年來蔬菜被農(nóng)藥污染的情況有增無減,有機磷農(nóng)藥殘留尤為突出。加強食品農(nóng)藥殘留檢測,已成為食品安全衛(wèi)生檢測的重點之一。
目前農(nóng)藥殘留快速測定方法有生物法、化學(xué)法、儀器
法。生物法采用的是生物材料,主要有活體生物測定法、分子生物測定法、生物化學(xué)測定法?;铙w生物測定法使用發(fā)光細菌或敏感性家蠅作為測定材料;分子生物測定法則采用免疫反應(yīng),如酶聯(lián)免疫反應(yīng),使用特意性的酶聯(lián)免疫試劑盒;生物化學(xué)測定法利用*脂酶抑制原理,使用范圍于能抑制*脂酶活性的農(nóng)藥。
儀器法主要有:氣相色譜儀和液相色譜儀(農(nóng)藥殘留掃描法)、農(nóng)藥殘留分光光度計法(抑制率法)、目視法(如有機磷農(nóng)藥速測靈法、農(nóng)藥殘留試紙法、酶片法)。
國內(nèi)農(nóng)藥殘留的檢測方法中,大量采用的方法有速測卡法(紙片法)和儀器法。
速測卡法(紙片法):農(nóng)藥殘留速測卡,是用對農(nóng)藥高度敏感的*酯酶和顯色劑做成的酶試紙,可以快速檢測蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯這兩大類用量較大、毒性較高的殺蟲劑的殘留情況,選用的酶對敏感,抗干擾
性強,操作簡便,不需要配制試劑,不需要*的技術(shù)培訓(xùn),可以不需要任何儀器設(shè)備單獨使用,產(chǎn)品容易貯存,攜帶方便,是現(xiàn)場檢測的*方法。目前,廣州、深圳、珠海、惠州、香港、重慶、廈門、青島、南寧、西安、鄭州、石家莊、合肥、寧波和柳州等城市都已把農(nóng)藥速測卡作為常規(guī)的檢測方法。如用本品先對大量的樣品進行初篩,然后才用儀器法對少量陽性樣品進行定量分析,就可以大大的提高工作效率,節(jié)省大量人力物力。
該產(chǎn)品已經(jīng)過衛(wèi)生部食品衛(wèi)生檢驗、北京市產(chǎn)品質(zhì)量檢驗、香港政府化驗、香港衛(wèi)生署、廣東省食品衛(wèi)生檢驗、廣東省出入境檢驗檢疫、廣東省農(nóng)藥、華南農(nóng)業(yè)大學(xué)昆蟲毒理研究室、深圳市衛(wèi)生防疫站、深圳出入境檢驗檢疫和深圳農(nóng)科中心等多個技術(shù)部門的質(zhì)量認定。農(nóng)藥速測卡快速檢驗方法已經(jīng)*標(biāo)準(zhǔn)委員會通過,定為*標(biāo)準(zhǔn)方法GB/T5009.199-2003。
儀器法:農(nóng)藥殘留速測儀是根據(jù)*標(biāo)準(zhǔn)方法:采用酶抑制率法,、速測卡法(紙片法),使用*標(biāo)準(zhǔn),快速檢測出樣品的農(nóng)藥殘留量。主要用于果、蔬、茶、糧食、水及土壤中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的快速檢測。
第二節(jié) 農(nóng)藥殘留測試技術(shù)和方法
一、 儀器法
1、依據(jù)的*標(biāo)準(zhǔn)方法:*標(biāo)準(zhǔn)方法GB/T5009.199-2003《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量快速檢測》
2、采用儀器:便攜式農(nóng)藥殘留速測儀。
3、主要技術(shù)指標(biāo):
(1)測量通道數(shù):12個;
(2)恒溫溫度:38℃;
(3)反應(yīng)時間:10分鐘;
(4)顯色時間:3分鐘;
(5)電源適配器:
輸入 100~240VAC 50/60Hz0.3A
輸出 5VDC 3A。
4、檢測原理:利用速測卡中的*酯酶(白色藥片)可催化靛酚乙酸酯(紅色藥片)水解為乙酸和靛酚,由于有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對*酯酶的活性有強烈的抑制作用,因此,根據(jù)顯色的不同,即可判斷樣品中含有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留情況。
5、使用方法:
(1)開機:接上適配器電源,打開儀器左側(cè)的電源開關(guān),儀器開機:此時儀器進行預(yù)熱,提示亮點閃爍,;按[模式]鍵切換至“溫度”,當(dāng)溫度達到 38 ℃時,儀器發(fā)出一聲提示音,預(yù)熱完成,可以開始測試。
(2)裝片:將速測卡沿中線對折一下撕去上蓋膜對折后再展開,插入壓紙條下的各通道加熱板上(注意紅色藥片一端在上方,白色藥片一端在下方),檢查速測卡放置位置是否正確,速測卡中間的虛線應(yīng)與壓條對齊,不要歪斜。
(3)取樣:
方法A:選擇有代表性的蔬菜或瓜果皮 ,擦去表面泥土,剪成一平方厘米左右碎片,取 5 克放入瓶中,加入 10 毫升純凈水或緩沖溶液震蕩 50 次(有條件可配備*攪拌),靜置 2 分鐘以上,每批*同時做一個純凈水或緩沖液的空白對照,每剪完一個樣品,剪刀要洗凈后方可處理下個樣品,以免交叉污染。用移液搶取 150 微升樣品液加到白色藥片上。
方法B:取5克左右的蔬菜或水果樣品,用剪刀剪成指甲蓋大小,放入塑料或玻璃小燒杯中,按1:1比例加水(葉菜按1:2比例加水),用玻璃棒攪拌,10分鐘后取3滴滴在白色藥片上。
(4)檢測步驟:
取一片速測卡,中間線對折,放置加熱到溫度的樣品槽中,提取待測樣品液3滴加入白色藥片上后,按一下“啟動”鍵,, 儀器顯示“10:00”,并進行倒計時,開始測試,注意此階段不可蓋上蓋子;10分鐘后,儀器發(fā)出急促的蜂鳴提示音,此時請關(guān)閉上蓋,儀器顯示“3:00”, 顯色時間并進行倒計時,3分鐘后,儀器發(fā)出和緩的三聲蜂鳴提示音,這時打開儀器上蓋進行結(jié)果判斷。
(5)結(jié)果判斷 :
觀察速測卡上白色藥片的顏色,若顯示:
A、明顯的藍色為陰性,表示無農(nóng)藥殘留或濃度很低;
B、淺藍色為弱陽性,表示有農(nóng)藥殘留,且濃度較高;
C、白色為強陽性,表示有農(nóng)藥殘留,且濃度很高;
空白對照:在速測卡白色藥片上滴3滴洗脫液,按上述步驟反應(yīng)后呈現(xiàn)的藍色即為無農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)對照顏色。
6、注意事項:
(1)本方法是生物化學(xué)反應(yīng),應(yīng)盡可能避免一些物理和化學(xué)因素對酶活性的影響。
(2)反應(yīng)*適酸堿度為 PH7.5 左右,樣品偏酸或偏堿時應(yīng)改用磷酸緩沖液浸提處理。
(3) 蔥、蒜、蘿卜、芹菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中含有對酶活性有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時,不宣剪切過碎,浸提時間不宜過長,以免液汁過多釋放影響檢測檢測結(jié)果。必要時可采用整株(體)蔬菜浸提的方法進行測定。
(4)白色藥片與紅色藥片接觸反應(yīng)需要有足夠的水分作介質(zhì),每一批*將樣品處理好后一起加樣,以免時間過長蒸干。
(5)速測卡在常溫條件下有效期為壹年,貯存時要求放在陰涼、干燥和避光處,有條件者放于 4 ℃冰箱中*。
(6)速測卡開封后*在三天內(nèi)用完,如一次用不完可存放在干燥器中。
(7)速測卡對農(nóng)藥非常敏感,測定時如果附近噴灑農(nóng)藥或使用衛(wèi)生殺蟲劑,以及操作者和器具沾有微量農(nóng)藥,都會造成對照和測定藥片不變藍。
(8)紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)的時間以3min為準(zhǔn),3min后藍色會逐漸加深,24h后顏色會逐漸退去。
第三節(jié) 儀器維護、注意事項
1.儀器維護
(1)存放儀器的地方必須保持干燥、無塵、無振動。
(2)儀器內(nèi)部通道應(yīng)保持干凈,無灰塵,若有污物,應(yīng)及時用棉質(zhì)物擦拭干凈。
2.注意事項
(1)儀器使用前必須仔細閱讀儀器使用說明書,根據(jù)說明書上的操作步驟進行操作。
(2)禁止在儀器DC輸入孔插入非本公司配套的其他電源。
(3)用戶不得自行拆卸維修,否則將影響本公司按照儀器維修條款提供的服務(wù)。