英文名称 Anti-phospho-ECT2 (Ser370)
中文名称 磷酸化上皮细胞癌转化蛋白2抗体
别 名 ECT2 (phospho S370); ECT2 (phospho Ser370); p-ECT2 (Ser370); ECT 2; ECT2; ECT-2; ECT2 protein; Epithelial cell transforming sequence 2; Epithelial cell transforming sequence 2 oncogene; Epithelial cell transforming sequence 2 oncogene protein; FLJ10461; MGC138291; Protein ECT2; ECT2_HUMAN; Epithelial cell-transforming sequence 2 oncogene.
| 产品名称 | Anti-phospho-ECT2 (Ser370)抗体 |
| 规格 | 0.1ml/200μg |
| 货号 | YSRIBIO-016321 |
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human ECT2 around the phosphorylation site of Ser370
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
抗体的荧光标记法：
（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
抗体的制备过程：
1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物：常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集：一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血，家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血，家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定：得到的抗血清需要进一步的纯化，利用偶联了抗原的亲和柱进行层析，具有高效，特异性强，纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存：抗体一般比较稳定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
AQP9 水通道蛋白-9抗体
Annexin A3 膜粘连蛋白A3抗体
Annexin IV 膜粘连蛋白 A4抗体
APG8A 自噬相关蛋白8A抗体
phospho-Akt (Thr450) 磷酸化蛋白激酶B抗体
phospho-AMPK alpha-1 (Thr198) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体
phospho-Akt(Thr308) 磷酸化蛋白激酶B抗体
APOBEC3G 脱氧胞苷脱氨酶蛋白抗体
AKAP13 蛋白激酶锚定蛋白13抗体
AP1M2 AP-1μ2抗体
大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞；RBL-1
大鼠纤维母细胞；1/EJ 1-1
黄胸鼠肺成纤维细胞；YCR
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞；PC-12 [PC12]
黑化大家鼠肺成纤维细胞；NRm
大鼠肺细胞；WTRL1
仓鼠源细胞
二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞；CHO/dhFr-
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆)；CHO-K1
叙利亚仓鼠肾细胞；BHK-21
中国仓鼠卵巢细胞；CHO
人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株；7WCY1.0
人APP基因转染CHO细胞株；7WD10
人APP-PS1(M146L)双基因转染CHO细胞株；7WML6.0
人APP-PS1双基因转染CHO细胞株；7WPS1
Anti-phospho-ECT2 (Ser370)抗体中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆)；CHO-K1
叙利亚仓鼠肾细胞；BHK-21
中国仓鼠卵巢细胞－二氢叶酸还原酶缺陷型；CHO/dhFr-
叙利亚仓鼠肾细胞；BHK-21
抗体分子标记技术：
（一）原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
（二）准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体；0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5；无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5）；胺T反应终止缓冲液；
2.仪器
凝胶过滤柱；￥-记数器；玻璃纤维滤。
（三）操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行；
2.如果氧化反应损伤蛋白质，可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m，并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml；
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年；
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天）；
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低；
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
