革新性成像平臺
ECLIPSE Ti2實現(xiàn)了的25mm視野(FOV),*改變您的觀察方式。憑借突破性的大視野,Ti2可以隨心所欲地利用大靶面CMOS相機的傳感器區(qū)域,并顯著提高了數(shù)據(jù)采集量。
為超高分辨率成像系統(tǒng)量身打造的Ti2載物臺表現(xiàn)極其穩(wěn)定、毫無偏移,同時其*的硬件觸發(fā)功能可以輕松駕馭zui嚴苛的高速成像實驗。Ti2的智能模塊可收集內(nèi)部傳感器數(shù)據(jù),引導用戶完成成像流程,杜絕誤操作。此外,在數(shù)據(jù)采集期間,將自動記錄各個傳感器的狀態(tài),終于實現(xiàn)高質量成像,提高數(shù)據(jù)重現(xiàn)性。結合尼康強大的圖像采集和分析軟件NIS-Elements,Ti2當之無愧為成像領域的。
突破性大視野
隨著研究趨勢朝著大規(guī)模、系統(tǒng)級方式發(fā)展,市場對于更快數(shù)據(jù)采集、更高通量的能力的需求與日俱增。大靶面相機傳感器的發(fā)展和電腦數(shù)據(jù)處理能力的提高推動了這樣的研究趨勢。憑借的25mm視野,Ti2提供更別的可量測性,令研究人員真正極大限度地發(fā)揮大靶面檢測器的作用,確保其核心成像平臺在相機技術不斷快速發(fā)展的情況下適應未來需求
神經(jīng)元微管染色(Alexa Fluor 488);使用CFI Plan Apo lambda 60x物鏡和DS-Qi2相機拍攝。左圖為傳統(tǒng)視野,右圖為Ti2的全新視野。
照片由西北大學尼康成像中心Josh Rappoport提供;
標本由西北大學S. Kemal、B. Wang和R. Vassar提供。
大視野的明場照明
高功率LED 在Ti2的大視野內(nèi)提供明亮的照明,確保在高倍率微分干涉差(DIC)等嚴苛要求下帶來清晰、一致的結果。采用復眼透鏡設計,Ti2能夠提供從一邊到另一邊的均勻照明。這對于定量的高速成像和大圖拼接都大有裨益。
內(nèi)置復眼透鏡
我們?yōu)榇笠曇俺上裨O計了專門的緊湊的落射熒光照明器。它配有石英材質的復眼照明透鏡,并能提供包括紫外在內(nèi)的廣譜的高透過率。硬鍍膜的大尺寸熒光濾塊能夠提供大視野的圖像,同時保證高信噪比。
大視野落射熒光照明器
大尺寸熒光濾塊
大直徑的觀察光路
觀察光路直徑的擴大,使得成像端口可以做到視場數(shù)25。由此得到的大視野能夠拍攝大約傳統(tǒng)透鏡兩倍的區(qū)域,使得用戶可以充分發(fā)揮諸如CMOS檢測器這樣的大靶面?zhèn)鞲衅鞯男阅堋?/span>
擴大的筒鏡
視場數(shù)為25的超大成像端口
用于大視場成像的物鏡
具有圖像平場性的物鏡確保了從一邊到另一邊的高質量圖像。充分發(fā)揮OFN25物鏡的極大潛力,可以大大加速數(shù)據(jù)的采集過程。
用于高通量數(shù)據(jù)采集的相機
高靈敏度單色相機DS-Qi2和高速彩色相機DS-Ri2擁有36.0 x 23.9 mm 尺寸、1625萬像素的CMOS傳感器,能夠充分發(fā)揮Ti2 25mm大視野的性能。
針對顯微鏡優(yōu)化的D-SLR相機技術
DS-Qi2
DS-Ri2
的尼康光學器件
尼康的高精度CFI60無限遠光學器件專為各種復雜觀察方法而設計, 憑借的光學性能和堅實的可靠性受到研究人員的廣泛好評。
切趾相差
尼康*的切趾相差物鏡采用精選的振幅濾波器,能夠顯著增強反差并減少光暈假象, 從而提供精細的高清圖像。
切趾相位板集成在APC物鏡中
使用CFI S Plan Fluor ELWD ADM 40xC物鏡拍攝的BSC-1細胞
外部相差(Ti2-E)
電動外部相差系統(tǒng)通過避免使用相差物鏡,使用戶將相差與落射熒光成像相結合,同時不影響熒光的效率。例如,高數(shù)值孔徑(NA)的液浸物鏡可被用于相差成像。通過這個外部相差系統(tǒng),用戶可以輕易結合相差和其他的成像模式,包括弱熒光成像,例如TIRF 和光鑷。
落射熒光和外部相差圖像
以GFP-alpha微管蛋白標記的PTK-1細胞,使用CFI Apo TIRF 100x Oil物鏡拍攝照片由Wadsworth Center博士科學研究員VI/教授Alexey Khodjakov提供
DIC(微分干涉差)
尼康備受贊譽的DIC光學器件在各個放大倍數(shù)下都可以提供均勻、精細、高分辨率和對比度的圖像。DIC棱鏡是專門針對各個物鏡定制的, 能夠為每個標本提供高品質的DIC圖像。
物鏡轉盤中安裝與各個物鏡相匹配的DIC棱鏡
微分干涉差(DIC)和落射熒光圖像
25mm視野大小的神經(jīng)元圖像(DAPI,Alexa Fluor 488,Rhodamine-Phalloidin);使用CFI Plan Apo lambda 60x物鏡和DS-Qi2相機拍攝照片由西北大學尼康成像中心Josh Rappoport提供;標本由西北大學S. Kemal、B. Wang和R. Vassar提供。
NAMC(尼康調(diào)制反差)
這是一種兼容塑料板的高對比度成像技術。它適用于未被染色的透明樣品,比如卵母細胞。NAMC通過投影效果來提供仿三維圖像。用戶可針對每個標本輕松調(diào)節(jié)反差方向。
NAMC通過投影效果來提供仿三維圖像
小鼠胚胎
尼康調(diào)制反差(NAMC)圖像:小鼠胚胎,使用CFI S Plan Fluor ELWD NAMC 20x物鏡拍攝
自動校正環(huán)(Ti2-E)
標本厚度、蓋玻片厚度、標本折射率分布及溫度上的變化都可能導致球差和圖像扭曲。zui高質量的物鏡經(jīng)常配置調(diào)節(jié)環(huán)來補償這些變化。而校正環(huán)的準確調(diào)節(jié)是獲取高分辨率和高對比度圖像的關鍵。這款全新的自動校正環(huán)通過采用諧波驅動和自動校正算法,幫助用戶每次都能輕易地調(diào)到適宜位置,進而發(fā)揮出物鏡的性能。
用于精確控制校正環(huán)調(diào)節(jié)的諧波驅動機制
超高分辨率圖像
超高分辨率圖像(DNA PAINT):
表達α微管蛋白(綠色)和TOMM-20(洋紅色)的CV-1細胞,使用CFI Apo TIRF 100x Oil物鏡拍攝。
落射熒光
λ系列物鏡采用了尼康獲得的納米水晶鍍膜技術(Nano Crystal Coat),使得它是高要求、弱信號、多通道熒光成像的理想選擇。因為這些應用都要求系統(tǒng)在很寬的波長范圍內(nèi)保持高的傳輸效率和像差校準。新的熒光濾塊的熒光透過率更高,并且有諸如噪聲消除(Noise Terminator)這樣的雜散光消除技術。配合這樣的熒光濾塊,λ系列物鏡已經(jīng)證明其在弱熒光觀察領域的能力,包括單分子成像和基于冷光的應用。
用于精確控制校正環(huán)調(diào)節(jié)的諧波驅動機制
冷光圖像
冷光圖像:
表達基于BRET的鈣指示劑蛋白、納米鈣籠的Hela細胞。
標本由日本大阪大學科學與工業(yè)研究所的Takeharu Nagai博士提供
對焦
即使是溫度的zui輕微變化和成像環(huán)境的極輕微振動, 也可能大大影響焦面穩(wěn)定性。Ti2采用靜態(tài)和動態(tài)措施消除焦面偏移,從而在長時實驗中能夠真實呈現(xiàn)納觀和微觀景象。
機械再設計, 實現(xiàn)超高穩(wěn)定性(Ti2-E)
為提高對焦穩(wěn)定性,電動Z軸和對焦系統(tǒng)(PFS)的自動調(diào)焦結構經(jīng)過*的重新設計。全新的Z軸調(diào)焦結構尺寸更小,并且緊鄰物鏡轉盤,以更大程度地減少振動。即使在擴展(雙層光路)配置中,它也緊鄰物鏡轉盤,確保在所有應用中均具有出色的穩(wěn)定性。
即使在擴展配置中,具有高穩(wěn)定性的Z軸調(diào)焦結構也緊鄰物鏡轉盤
對焦系統(tǒng)(PFS)的檢測器部分已經(jīng)從物鏡轉盤分離,以減少物鏡轉盤上的機械負載。這種全新的設計還能更大程度減少熱傳遞,有助于創(chuàng)造更加穩(wěn)定的成像環(huán)境。因此,電動Z 軸電機的耗電量也有所降低。這些機械上的重新設計賦予成像平臺*的穩(wěn)定性,使其非常適合單分子成像和超高分辨率應用。
采用PFS 的新一代自動調(diào)焦結構:堪稱(Ti2-E)
新一代的對焦系統(tǒng)(PFS)能夠自動修正溫度變化和機械振動帶來的焦點漂移(往往向標本添加試劑和多點成像時會引入此類干擾)。
PFS 實時檢測并跟蹤參考面的位置(例如使用浸液物鏡時的蓋玻片表面),從而保持焦面。*的光學補償技術允許用戶在參考面的任意相對位置保持焦面。用戶可以直接對焦所需平面,然后啟用PFS。PFS通過內(nèi)置線性編碼器和高速反饋機制自動工作,并保持焦面,即使在長時、復雜的成像任務中亦能提供高度可靠的圖像。
PFS兼容各種應用,從塑料培養(yǎng)皿的常規(guī)實驗到單分子成像和多光子成像均可適用。它還兼容各種波長,從紫外線到紅外線,這意味著它能夠用于多光子和光鑷應用。
輔助向導
不再需要記住復雜的顯微鏡校準和操作步驟。Ti2可以整合來自傳感器的數(shù)據(jù),引導您完成這些步驟,避免人為操作失誤, 使研究人員能夠將精力集中到數(shù)據(jù)上。
持續(xù)顯示顯微鏡狀態(tài)(Ti2-E/A)
一系列內(nèi)置傳感器檢測并傳遞顯微鏡各個組件的工作狀態(tài)信息。當您使用計算機獲取圖像時,所有狀態(tài)信息將記錄在元數(shù)據(jù)中,確保您能夠輕松調(diào)出采集條件和/或檢查設置錯誤。 此外,內(nèi)置相機允許用戶查看后焦平面,便于校準相差環(huán)和DIC的消光十字。它還為TIRF等應用提供了一種安全的激光器校準方法。
內(nèi)置傳感器檢測顯微鏡組件的狀態(tài)
顯微鏡狀態(tài)既可以通過平板查看, 也可以通過顯微鏡前面板的狀態(tài)指示燈查看。這使得暗室中的狀態(tài)檢查也成為可能。
狀態(tài)指示燈
操作步驟向導(Ti2-E/A)
Ti2的輔助向導功能為顯微鏡操作提供互動式逐步引導。該功能可在平板或電腦上查看,并且融合了來自內(nèi)置傳感器和內(nèi)部相機的實時數(shù)據(jù)。輔助向導可以幫助用戶完成實驗設置和故障排除。
自動檢測錯誤(Ti2-E/A)
通過檢查模式(Check Mode),用戶可以在平板或電腦上輕松確認所選觀察方法的所有相應的顯微鏡組件是否到位。當所選觀察方式未能實現(xiàn)時,這種檢查模式可以減少排除故障所需要的時間和精力。該功能對多用戶使用的環(huán)境尤其有用,因為每位用戶都可能改變顯微鏡設置。用戶也可以預先編程自定義檢查程序。
顯示設置錯誤的組件
直觀的操作
Ti2經(jīng)過*的重新設計——從總體機身結構到每個按鈕和切換的選擇與布局都煥然一新——帶來了很好的用戶體驗。這些控件即使在暗室也能被輕松使用(大多數(shù)實驗都是在暗室中進行)。Ti2提供一個直觀和輕松的用戶界面, 確保研究人員能夠專注于數(shù)據(jù)而不是顯微鏡操作和控制。
針對顯微鏡控制精心設計的布局(Ti2-E/A)
所有按鈕和切換的布局均以其控制的照明類型為基礎。用于控制透射觀察的按鈕位于顯微鏡的左側,而用于控制落射熒光觀察的按鈕位于右側。用于控制常規(guī)操作的按鈕在前面板上。這種分區(qū)方式便于記憶, 在暗室內(nèi)操作顯微鏡時尤其實用。
?往復式切換(Ti2-E)
顯微鏡設計中集成了往復式切換,用以控制熒光濾塊轉盤和物鏡轉盤等裝置。這些切換動轉動上述裝置的感覺,實現(xiàn)直觀控制。這些往復式切換中還可融合其他功能,確保單個切換可以操作多個相關裝置。例如,熒光濾塊轉盤的往復式切換不僅可以轉動轉盤,而且在用戶按壓切換時還可以開關熒光光閘。此外,還可以對這些切換編程,以操作發(fā)射濾片轉盤和外部相差單元。
?可編程的功能按鈕(Ti2-E/A)
快捷鍵的設計能夠方便用戶對功能進行自定義設置。用戶可以從超過100個功能中做出選擇,包括對快門等電動裝置的控制,甚至是通過用于觸發(fā)式采集的I/O端口至外部設備的單一輸出。還可以為這些按鈕模式功能,這樣就可以通過保存各個電動裝置隨時切換觀察方式。
?調(diào)焦旋鈕(Ti2-E)
調(diào)焦加速按鈕和對焦系統(tǒng)(PFS)啟用按鈕在調(diào)焦旋鈕旁邊。根據(jù)不同的形狀,可以非常容易地通過觸摸識別不同功能的按鍵。調(diào)焦速度根據(jù)當前使用的物鏡自動調(diào)節(jié)。這使得用戶可以在不同物鏡下得到各自理想的調(diào)焦速度,使得顯微鏡操作非常輕松。
使用控制桿和平板進行直觀控制(Ti2-E)
Ti2控制桿不僅能夠控制載物臺移動,而且能夠控制顯微鏡的大多數(shù)電動功能,包括對焦系統(tǒng)(PFS)的激活狀態(tài)。它可以顯示XYZ坐標和顯微鏡組件的狀態(tài),極大的方便用戶進行遠程操控。用戶也可以從通過無線局域網(wǎng)與顯微鏡相連的平板控制Ti2的電動功能,實現(xiàn)對顯微鏡的可視化操作體驗。