產(chǎn)品簡介:
Filmplate系列微生物檢驗測試片主要應(yīng)用于食品、飲料及相關(guān)行業(yè)的微生物檢測,在全國食品檢測領(lǐng)域均有廣泛的使用。2007年,微生物檢驗測試片被正式列為中國出入境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),該方法正逐漸被越來越多的食品生產(chǎn)加工企業(yè)及各類檢測機(jī)構(gòu)所認(rèn)可。
Filmplate測試片方法與傳統(tǒng)培養(yǎng)皿培養(yǎng)方法相比:
1. 更簡單高效:顯著縮短測試時間,操作程序更加簡便,不需要很高的操作技巧,有助于提高微生物實驗質(zhì)量和提高實驗室效率。
2. 更節(jié)省成本:免除了培養(yǎng)基制備環(huán)節(jié),也就因此省去了培養(yǎng)基配制和滅菌、培養(yǎng)皿清洗和滅菌等大量輔助性工作和因此帶來的不必要的實驗成本。
附:Filmplate菌落總數(shù)測試片產(chǎn)品說明。
1、原理及適用范圍
菌落總數(shù)是指樣品經(jīng)過處理,在一定條件下培養(yǎng)后所得1mL(g)檢樣或單位面積樣品中所含菌落的總數(shù),是的微生物檢測項目。
Filmplate菌落總數(shù)測試片是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,含有標(biāo)準(zhǔn)的營養(yǎng)培養(yǎng)基,冷水可溶性的吸水凝膠和脫氫酶指示劑氯化三苯基四氮唑(TTC);經(jīng)加樣、培養(yǎng)后,菌落在測試片上顯現(xiàn)出紅色菌斑,通過計數(shù)報告結(jié)果。這樣無需培養(yǎng)基制備和滅菌過程,顯著縮短計數(shù)時間和增強(qiáng)計數(shù)效果。
本產(chǎn)品適合于各類食品及食品原料中菌落總數(shù)的測定,也可用于檢測食品加工容器、操作臺和其他設(shè)備表面的菌落總數(shù)。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定(GB/T 4789.2-2010)。產(chǎn)品亦可用于生活飲用水和水源水的微生物快速檢測。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液,必要時用1mol/LNaOH或1mol/L HCl溶液調(diào)節(jié)樣品勻液pH至6.6~7.2。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi),振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類推,做出1:1000等稀釋度的樣品勻液,每次換一支吸管。
2.2、接種:一般食品選2~3個稀釋度進(jìn)行檢測,含菌量少的液體樣品(如飲用純水和礦泉水等)可直接吸取原液進(jìn)行檢測。將菌落總數(shù)測試片(BB202)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固,每個稀釋度接種兩片。同時做一片空白陰性對照。
2.3、培養(yǎng):將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過12片。一般食品培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h;水產(chǎn)品培養(yǎng)溫度為30℃±1℃,培養(yǎng)48h。
3、結(jié)果判讀
細(xì)菌在測試片上生長后會顯示紅色斑點(diǎn),選擇菌落數(shù)適中(30~300個)的測試片進(jìn)行計數(shù),乘以稀釋倍數(shù)后即為每毫升(或每克)樣品中所含的細(xì)菌菌落總數(shù)。
4、計數(shù)原則及報告方式
4.1、若只有一個稀釋度紙片上的菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi),計算兩個紙片菌落數(shù)的平均值,再將平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù),作為每毫升(或克)樣品中菌落總數(shù)結(jié)果。
4.2、若有兩個連續(xù)稀釋度的紙片菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)時,按式(1)計算:
(圖11)
式中:
N——樣品中菌落數(shù);
∑C——測試片上(含適宜范圍菌落數(shù)的測試片)菌落數(shù)之和;
n1——個適宜稀釋度測試片數(shù);
n2——第二個適宜稀釋度測試片數(shù);
d——稀釋因子(稀釋度)。
示例(圖12):
上述數(shù)據(jù)經(jīng)“四舍五入”后,表示25000或2.5×104。
4.3、若所有的稀釋度菌落總數(shù)均大于300CFU,則對稀釋度的測試片進(jìn)行計數(shù),其他測試片可記錄為多不可計,結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。
4.4、若所有的稀釋度菌落總數(shù)均小于30CFU,則應(yīng)按稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。
4.5、若所有的稀釋度(包括液體樣品原液)均無菌落生長,則以小于1乘以稀釋倍數(shù)計算。
4.6、若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30CFU~300CFU之間,其中一部分小于30CFU或大于300CFU,則以30CFU或300CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。
4.7、菌落總數(shù)的報告
4.7.1、菌落總數(shù)在100CFU以內(nèi)時,按“四舍五入”原則修約,采用兩位有效數(shù)字報告。
4.7.2、大于或等于100CFU時,第三位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后,取前兩位數(shù)字,后面的0代替位數(shù),也可用10的指數(shù)形式來表示,按“四舍五入”原則修約后,采用兩位有效數(shù)字。
4.7.3、若測試片上一片紅色無法計數(shù)時,則報告多不可計。
4.7.4、若空白對照上有菌落生長,則此次檢測結(jié)果無效。
4.7.5、稱重取樣以CFU/g為單位報告,體積取樣以CFU/mL為單位報告。
5、表面取樣方法
加1mL滅菌磷酸緩沖液(或生理鹽水)在測試片上,至少靜置10S,使培養(yǎng)基凝固;提起上層膜,使濾紙部分貼到待測物表面,用手在外側(cè)輕壓;然后將上蓋膜合上,置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。
6、附加說明
6.1、菌落總數(shù)測試片檢測結(jié)果與傳統(tǒng)平板計數(shù)瓊脂平板法符合率可達(dá)80%以上,山東省疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行的驗證試驗表明,24h計數(shù)測試片上菌落數(shù)為平板菌落數(shù)的87%。
6.2、磷酸緩沖液稀釋液的配制與滅菌:貯存液:稱取34.0g的溶于500mL蒸餾水中,用大約175mL的1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至7.2,用蒸餾水稀釋至1000mL后貯存于冰箱。稀釋液:取貯存液1.25mL,用蒸餾水稀釋至1000mL,分裝于適宜容器中,121℃高壓滅菌15分鐘,或者放入消毒碗柜中消毒。
6.3、生理鹽水的配制與滅菌:取8.5g分析純氯化鈉(NaCl)溶解到1000mL蒸餾水或純凈水中,先煮開后進(jìn)行分裝,取9mL加入到10mL潔凈試管中,蓋上硅橡膠塞或棉紗塞,放入紅外線消毒柜中消毒。
7、保存條件
本產(chǎn)品需存放在4℃~10℃冰箱中,保質(zhì)期為一年,鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好,放到冰箱中,一個月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水,在拆封前將整包回溫至室溫。