分光光度計(jì)的原理是由一光源產(chǎn)生的連續(xù)輻射光經(jīng)色散系統(tǒng)(單色器)分解成波長(zhǎng)連續(xù)的單色光,單色光通過照射到樣品池上,經(jīng)過池中樣品時(shí)會(huì)產(chǎn)生吸收,通過檢測(cè)出射光的強(qiáng)度S和入射光的強(qiáng)度R,透射率T=S/R。如果連續(xù)調(diào)整波長(zhǎng)(即掃描),就可以得到在生化樣品關(guān)于波長(zhǎng)分布的透射率,其透射率關(guān)于波長(zhǎng)的分布和樣品的成分和濃度相關(guān)。從而判斷樣品的成分,濃度。
分光光度儀通常用作物質(zhì)鑒定、純度檢查,有機(jī)分子結(jié)構(gòu)的研究。在定量方面,可測(cè)定結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的化合物和混合物中各組分的含量,也可以測(cè)定物質(zhì)的離解常數(shù),絡(luò)合物的穩(wěn)定常數(shù),物質(zhì)分子量鑒別和微量滴定中指示終點(diǎn)以及在高效液相色譜中作檢測(cè)器等。