QIAamp DNA Mini Kit適用于分子生物學(xué)應(yīng)用。該產(chǎn)品不適用于疾病的診斷、預(yù)防或治療。
產(chǎn)品詳情
QIAcube
性能
QIAamp DNA Mini Kit可純化長(zhǎng)達(dá)50 kb的片段(參見(jiàn)"Purification of up to 50 kb genomic DNA")。這個(gè)長(zhǎng)度的DNA可*降解且有高的擴(kuò)增效率。獲得的核酸或DNA的量取決于樣本來(lái)源(見(jiàn)表)。
QIAamp樣本制備技術(shù)是*經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的,純化所得核酸可用于任何分子實(shí)驗(yàn)或其他下游應(yīng)用,而無(wú)侵犯的風(fēng)險(xiǎn)。
樣品 | 用量 | 總核酸的量(µg)* | DNA 的量(µg)† |
---|---|---|---|
血液 | 200微升 | 4–12 | 4–12 |
白膜層 | 200微升 | 25–50 | 25–50 |
細(xì)胞 | 106 | 20–30 | 15–20 |
肝臟 | 25毫克 | 60–115 | 10–30 |
大腦 | 25毫克 | 35–60 | 15–30 |
肺 | 25毫克 | 25–45 | 5–10 |
心臟 | 25毫克 | 15–40 | 5–10 |
腎臟 | 25毫克 | 40–85 | 15–30 |
脾臟 | 10毫克 | 25–45 | 5–30 |
原理
QIAamp DNA Mini Kit采用快速離心柱或真空操作,簡(jiǎn)化了從人類組織樣本中純化DNA的過(guò)程。無(wú)需*-抽提。DNA特異性結(jié)合到QIAamp硅膠膜上,污染物流走。PCR抑制劑,如:二價(jià)陽(yáng)離子和蛋白,可通過(guò)兩步有效的洗滌被去除,結(jié)合在離心柱上的純DNA可用水或試劑盒中的緩沖液洗脫。QIAamp DNA技術(shù)從人組織樣本中純化得到的基因組、線粒體、細(xì)菌、寄生蟲(chóng)或病毒DNA,可用于PCR和印跡實(shí)驗(yàn)中。
程序
試劑盒含有優(yōu)化的緩沖液,能有效裂解樣本,可穩(wěn)定核酸,并促進(jìn)DNA選擇性結(jié)合到QIAamp硅膠膜上。將乙醇加入到裂解物中,并上樣到QIAamp離心柱上。洗滌緩沖液用于去除雜質(zhì),高純的即用型DNA可用水或低鹽緩沖液洗脫。
組織用酶裂解,無(wú)需機(jī)械勻質(zhì)化操作,方便的離心柱過(guò)程只需20分鐘的手工操作時(shí)間(裂解時(shí)間取決于樣品來(lái)源)。樣品可用離心處理,或已處理過(guò)的血液或其他體液可用QIAvac 24 Plus或QIAvac 6S真空底座處理。此外,嚴(yán)密的裂解過(guò)程使得QIAamp DNA Mini Kit非常適合于從細(xì)菌或寄生物中純化基因組DNA。在QIAcube*上純化基因組DNA用以減少手動(dòng)操作時(shí)間。
真空處理
可用真空裝置替代離心機(jī)處理血液或體液,可更快更方便地進(jìn)行DNA純化。QIAamp Mini離心柱可在QIAvac 24 Plus真空底座上配合VacValves和VacConnectors使用。在樣本流速顯著不同時(shí),需使用VacValves以確保一致的真空條件。一次性的VacConnectors用于避免交叉污染。使用VacConnectors,也可使QIAamp離心柱操作在帶有QIAvac Luer Adapters的QIAvac 6S上進(jìn)行。
應(yīng)用領(lǐng)域
QIAamp DNA Mini Kit非常適合于從常規(guī)人組織樣本中純化DNA,包括:肌肉、肝臟、心臟、大腦、骨髓和其他組織、拭子(口腔、眼睛、鼻子、咽喉和其他)、CSF、血液、體液和尿液細(xì)胞。DNA可在20分鐘內(nèi)從多達(dá)25 mg的組織或200 µl的液體中純化,洗脫體積50–200 µl。
技術(shù)指標(biāo)
特征 | 技術(shù)指標(biāo) |
應(yīng)用 | PCR,Southern印跡 |
洗脫體積 | 50–200微升 |
規(guī)格 | 旋轉(zhuǎn)柱 |
主要樣本類型 | 全血,組織,細(xì)胞 |
處理 | 手動(dòng)(離心或真空) |
純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | 基因組DNA,線粒體DNA,細(xì)菌DNA,寄生蟲(chóng)DNA,病毒DNA |
樣本量 | 200微升/ 25毫克/ 5 x 10e6 |
技術(shù) | 二氧化硅技術(shù) |
每次運(yùn)行或制備時(shí)間 | 20分鐘 |
產(chǎn)量 | 4–12微克 |