抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、產(chǎn)品僅用于科研鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Anti-eIF2C2/Ago2 |
貨號 | FSK6330 |
別 名 Ago 2; AGO2_HUMAN; Argonaute 2; Argonaute2; dAgo2; eIF 2C 2; eIF-2C 2; eIF2C 2; Eif2c2; Eukaryotic translation initiation factor 2C 2; hAgo2; MGC3183; PAZ Piwi domain protein; PPD; Protein argonaute-2; Protein slicer; Q10; Slicer protein.
英文名稱 Anti-eIF2C2/Ago2
中文名稱 真核翻譯起始因子2C2抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
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實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
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抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:產(chǎn)品僅用于科研抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
小鼠白介素28A(IL-28A)elisa分析檢測試劑盒Anti-ADRA2A Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué)
人甲狀旁腺激素1-34(PTH 1-34)抗體elisa分析檢測試劑盒Anti-ADRB2 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 激酶和磷酸酶
人基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)elisa分析檢測試劑盒Anti-ADRB2 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 細胞周期蛋白 細胞分化
人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)elisa分析檢測試劑盒Anti-ADRB3 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細胞生物 發(fā)育生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 細胞骨架
人肌細胞生成素(MYOG)elisa分析檢測試劑盒Anti-ADRB3 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細胞生物 發(fā)育生物學(xué) 細胞凋亡 細胞骨架
人肌紅蛋白(MYO/MB)elisa分析檢測試劑盒Anti-AFG3L2 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué)
人饑餓激素(GHRL)elisa分析檢測試劑盒Anti-AEBP2 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 表觀遺傳學(xué)
人核糖體合成蛋白NSA2同源物(NSA2)elisa分析檢測試劑盒Anti-ADRBK2 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 免疫學(xué)
人核糖核酸酶核糖核酸酶A家族elisa分析檢測試劑盒Anti-AFF4 Antibody研究領(lǐng)域
人果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)elisa分析檢測試劑盒Anti-AFM Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 細胞周期蛋白 細胞分化 表觀遺傳學(xué)
人過氧化氫酶(CAT)elisa分析檢測試劑盒Anti-AFP Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 表觀遺傳學(xué)
人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)elisa分析檢測試劑盒Anti-AFP Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 通道蛋白 跨膜蛋白
人甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨酸肽1(MASP1)elisa分析檢測試劑盒Anti-AGER Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)
人二氫嘧啶酶樣2(DPYSL2)elisa分析檢測試劑盒Anti-Afm Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué) 通道蛋白
人多肽YY(Peptide-YY)elisa分析檢測試劑盒Anti-Aggrecan(ACAN) Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細胞生物 免疫學(xué)
真核翻譯起始因子2C2抗體曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基(EMB)2250g藥品中大腸桿菌、沙門氏菌檢測。
Nutirent Broth No.2 2 號營養(yǎng)肉湯 Oxoid 500g incubation media Nutirent Broth No.2 2 號營養(yǎng)肉湯 Oxoid 500g
釀酒酵母 支/瓶
山梨醇麥康凱瓊脂基礎(chǔ)(SMAC)250g大腸桿菌O離培養(yǎng)
CaseinDigestSoyLecithinPolysorbate20Medium
卵黃甘露醇高鹽瓊脂基礎(chǔ) Egg-Yolk Mannitol Salt Agar Base 250克 金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)
改良Giolitti-Cantobi肉湯 Modified Giolitti-Cantobi Broth 250克 金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)
甘露醇鹽瓊脂 Mannitol Salt Aga 250克 金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)
卵黃瓊脂培養(yǎng)基 Egg-Yolk Salt Agar 250克 金黃色葡萄球菌的選擇性分離