美國(guó)杰出BTX是專業(yè)的細(xì)胞融合、電穿孔儀的生產(chǎn)廠家。BTX細(xì)胞融合儀ECM2001
自從1983年起,苛求的科研工作者就已經(jīng)把BTX產(chǎn)品作為電融合、轉(zhuǎn)基因等應(yīng)用領(lǐng)域的優(yōu)選儀器。除了占世界的電融合、轉(zhuǎn)基因系統(tǒng)外,BTX的產(chǎn)品還包括多達(dá)25種相關(guān)的配件,其中有多種專業(yè)的電極,給用戶更多的選擇。BTX細(xì)胞融合儀ECM2001
BTX還在建立了技術(shù)數(shù)據(jù)庫(kù),提供超過(guò)5000份的參考目錄和600多份的protocols供科研工作者免費(fèi)查閱。
ECM系列產(chǎn)品在轉(zhuǎn)基因的應(yīng)用領(lǐng)域中得以廣泛的應(yīng)用,其無(wú)以倫比的高性能得到了*同行的厚愛(ài)。BTX的系列產(chǎn)品適用于動(dòng)植物、**、酵母、哺乳動(dòng)物、人類細(xì)胞(包括活體細(xì)胞)的轉(zhuǎn)基因等操作,操作方法可參照相關(guān)文獻(xiàn),及向廠商索要。
ECM2001是一臺(tái)*的細(xì)胞操作儀器,它綜合了電穿孔儀和電融合儀的特點(diǎn),
ECM2001在細(xì)胞融合時(shí),分三個(gè)階段,預(yù)融合、融合、后融合階段
ECM2001在預(yù)融合時(shí)可產(chǎn)生一種*的高頻交流波,交流波將細(xì)胞排列成雙體或株璉,以便融合的進(jìn)行,提高了融合的效率。
融合階段:交流波和直流波的轉(zhuǎn)換之間設(shè)有微秒開(kāi)關(guān),能在極短時(shí)間內(nèi)從交流電轉(zhuǎn)成直流電。在方波長(zhǎng)電波的作用下,使細(xì)胞高效融合,
融合完成后,ECM2001立即產(chǎn)生了低電壓的交流波可使已初步融合的細(xì)胞更上乘的聚集在一起,完成細(xì)胞圓體程序。
當(dāng)轉(zhuǎn)基因向?qū)Я餍枰^高的電壓和較長(zhǎng)的脈沖時(shí),直流方波長(zhǎng)脈沖可單獨(dú)使用,完成轉(zhuǎn)基因。
應(yīng)用舉例
•胚胎操作/核移植/動(dòng)物克隆 (系統(tǒng):ECM2001/830)
核移植是將細(xì)胞核從供體轉(zhuǎn)入受體的過(guò)程。細(xì)胞核指導(dǎo)胚胎的發(fā)育,導(dǎo)致新生體安全出生。在這個(gè)過(guò)程中,電融合用于將供體細(xì)胞與受體卵細(xì)胞融合,并進(jìn)一步激活細(xì)胞分裂,形成胚胎。Meng等人(1997)將核移植技術(shù)擴(kuò)展至靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型,克隆出恒河猴。技術(shù)的進(jìn)步使研究人員能夠從分裂球進(jìn)展至更高分化的胚胎細(xì)胞以及靜止的胚兒細(xì)胞,作為核的供應(yīng)來(lái)源。胚胎產(chǎn)生的細(xì)胞在體外培養(yǎng)6-13代,然后在轉(zhuǎn)入前使用血清饑餓的方法使細(xì)胞靜止。如前文所述,Roble、 Cibelli以及Stice是**次在1998年報(bào)告使用非老化胚成纖維細(xì)胞作為核的供體進(jìn)行核移植而產(chǎn)生綿羊克隆轉(zhuǎn)基因牛的人。Ian Wilmut在1996年震驚了整個(gè)世界,他從成年的細(xì)胞產(chǎn)生出**個(gè)動(dòng)物克隆——多利。使用分化的成年細(xì)胞進(jìn)行克隆的能力打開(kāi)了核移植廣泛運(yùn)用的大門(mén)即基因**的令人激動(dòng)的模式。*近的成功事例PPL Therapeutics公司從成年體細(xì)胞克隆出豬。對(duì)于這些用途可以使用多種細(xì)胞融合樣品池及微型載玻片。
•動(dòng)物細(xì)胞融合 (系統(tǒng):ECM2001)
腫瘤及樹(shù)突的電融合目前在過(guò)繼性**療法中進(jìn)行使用。腫瘤細(xì)胞本身不能作為良好的抗原提成細(xì)胞,因此不會(huì)刺激T細(xì)胞生長(zhǎng)。樹(shù)突細(xì)胞是已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的*好的抗原提呈細(xì)胞,在融合后可以將腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)變成抗原提呈細(xì)胞。刺激后比未融合腫瘤細(xì)胞至少增加100倍。對(duì)于這些用途可以使用多種細(xì)胞融合附件及微型載玻片。
•雜交瘤/細(xì)胞雜交瘤技術(shù) (系統(tǒng):ECM2001)
在過(guò)去十年中,使用電融合技術(shù)進(jìn)行雜交瘤的產(chǎn)生及抗體大大增加。電融合的過(guò)程可以通過(guò)顯微鏡進(jìn)行觀察,與PEG相比需要的細(xì)胞數(shù)量較少。使用電融合用于這種用途還有無(wú)毒性及高效性的優(yōu)點(diǎn)。
Panova等人(1995)通過(guò)把人類B細(xì)胞與Heteromyeloma、Spam-8細(xì)胞進(jìn)行電融合增強(qiáng)了人類雜交瘤的生成。Kreutz等人(1998)引入了一種使用電融合及FACS分選的新方法產(chǎn)生細(xì)胞雜交瘤。Cao等人(1995)建立了另一種快速非選擇性方法通過(guò)電融合產(chǎn)生人類細(xì)胞雜交瘤。數(shù)據(jù)明確支持電融合用于這種重要目的的有效性。對(duì)于這些用途可以使用多種細(xì)胞融合附件及微型載玻片。
植物原生質(zhì)的融合 (系統(tǒng):ECM2001)
電融合可被用于融合植物原生質(zhì)以產(chǎn)生雜交體及創(chuàng)造具有所需特性的作物。Hofmann-Tsay等人(1994)試驗(yàn)了可以的融合促進(jìn)物質(zhì),發(fā)現(xiàn)一些多聚物可以便利融合過(guò)程而不影響細(xì)胞新生。Chen等人(1995)將原生質(zhì)從2種種屬的Porphyria進(jìn)行融合,成功率高達(dá)85%。這些鼓舞人心的數(shù)據(jù)提示電融合與傳統(tǒng)的PEG融合方法相比,可以改善融合效率以及可重復(fù)性。對(duì)于這些用途可以使用多種細(xì)胞融合附件及微型載玻片。