QX100 微滴式數(shù)字PCR可對靶 DNA 分析進行定量分析,定量的結(jié)果不再依賴于Ct值,直接給出靶序列的起始濃度,實現(xiàn)真正意義上的定量,適用于多種 PCR 定量分析領(lǐng)域, QX100 微滴式數(shù)字PCR被贊譽為第三代 PCR。
QX100 微滴式數(shù)字PCR的特點
l 無需標準品,標準曲線,即可確定靶分子的起始濃度和拷貝數(shù)
l 有效區(qū)分濃度差異微小的樣品
l 檢測含量極低的核酸序列
n 以*的靈敏度檢測稀有靶DNA拷貝
n 以的精度測量細微的差異
特別適合如下應(yīng)用:拷貝數(shù)變異、突變檢測和基因相對表達研究等,并對遺傳病、癌癥、傳染病的研究提供了一種全新的技術(shù)思路與手段。
QX100 微滴式數(shù)字PCR技術(shù)原理
QX100 系統(tǒng)由兩個組件構(gòu)成:QX100 微滴生成儀和 QX100 微滴分析儀。為完成 Droplet Digital PCR 工作流程,還需要配備Bio-Rad 的96 深孔反應(yīng)模塊PCR儀。
QX100微滴生成儀(droplet generator)將含有核酸分子的反應(yīng)體系形成成千上萬個納升級的微滴,其中每個微滴或不含待檢核酸靶分子,或者含有一個至數(shù)個待檢核酸靶分子,且每個微滴都作為一個獨立的PCR反應(yīng)器。經(jīng)PCR擴增后,每個樣品的微滴將依次流過 QX100 微滴分析儀,微滴分析儀(droplet reader)逐個對每個微滴進行檢測,終根據(jù)泊松分布原理以及陽性微滴的比例,分析軟件可計算給出待檢靶分子的濃度或拷貝數(shù),實現(xiàn)對靶 DNA 進行定量分析。