上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司涉足新的生物領(lǐng)域ELISA試劑盒,ELISA試劑盒研發(fā)的種屬涵蓋:人,大鼠,小鼠,豬,牛,羊,兔,植物,農(nóng)殘類,魚類等。公司常備現(xiàn)貨gibco10270-106胎牛血清,BI胎牛血清04-001-1cas,上百株人的細(xì)胞帶STR鑒定,具有完善的實(shí)驗(yàn)技術(shù)開發(fā)平臺,成熟的抗原、抗體研發(fā)系統(tǒng),熟練掌握各種酶聯(lián)技術(shù),結(jié)合公司的研發(fā)團(tuán)隊(duì),可以有效的保證公司產(chǎn)品強(qiáng)的穩(wěn)定性和高的準(zhǔn)確性,同時又具有競爭力的價格。公司目前主要提供生化試劑、分子生物學(xué)試劑及試劑盒,各種抗體及免疫學(xué)試劑盒、實(shí)驗(yàn)耗材等多門類產(chǎn)品,產(chǎn)品涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)的各個領(lǐng)域。
【產(chǎn)品名稱】:小鼠丙二醛(MDA)ELISA試劑盒
【供貨期】: (現(xiàn)貨供應(yīng))
【產(chǎn)品用途】:被測樣品定性定量分析
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T(兩種規(guī)格)
【檢測方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
【保存條件】:2-8℃
【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝
【產(chǎn)品價格】:我們?nèi)烫峁〦LISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費(fèi)代測
【銷售優(yōu)勢】:價格行業(yè)優(yōu)勢、質(zhì)量可靠、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問題包換退
【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。
例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦斧液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
琛藝供應(yīng)的種屬有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELSA試劑盒等
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠白介素1α(IL-1α)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠白介素1α(IL-1α)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
小鼠丙二醛(MDA)ELISA試劑盒處理及要求
1. 血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將*碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。*在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測
試劑盒組成
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
* | 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進(jìn)行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
注:標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S5)濃度依次為:0、30、60、120、240、480 U/ml
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:低檢測濃度小于1.0ng/ml。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個月
7. elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法類型和操作步驟?:
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體,②酶標(biāo)記的抗原或抗體,③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法。(一)雙抗體夾心法、(二)一步法、(三)間接法測抗體、(四)競爭法。
elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集、處理及保存方法:
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,10×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能
不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
問題 | 可能原因 | 解決方案 |
標(biāo)準(zhǔn)曲線差 | 吸取及洗滌不充分 | 充分的吸取及洗滌 |
移液不精確 | 檢查和校正移液器 | |
精密度低 | 洗滌不充分 | 按說明書要求充分洗滌和浸泡 |
混勻不充分和吸取試劑不足 | 充分混勻和吸取試劑 | |
重復(fù)利用吸頭、容器和覆膜 | 使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜 | |
加樣不精確 | 檢查和校正移液器 | |
O.D值低 | 每孔加的試劑量不精確 | 校正移液器,精確加入試劑 |
溫育時間不正確 | 保證充足的溫育時間 | |
溫育溫度不正確 | 試劑要平衡至室溫并保證準(zhǔn)確的溫育溫度 | |
酶標(biāo)記物或底物失效 | 通過混合酶標(biāo)記物和底物,顏色應(yīng)迅速顯現(xiàn)來檢查 | |
沒有加入終止液 | 按照說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟加入終止液 | |
超出讀數(shù)時間讀數(shù) | 在說明書*的讀數(shù)時間內(nèi)讀數(shù) | |
樣本值 | 不正確的樣本儲存方式 | 正確儲存樣本,使用新鮮樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn) |
不正確的樣本收集和處理方法 | 采取正確的樣本收集和處理方法 | |
待測物質(zhì)在樣本中含量低 | 使用新鮮樣本,重復(fù)實(shí)驗(yàn) |
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