產(chǎn)品名稱:胎牛血清(AusgeneX原裝, 特級)供應商
規(guī)格:500ml
儲存條件:—20℃,12個月
用途:又稱培養(yǎng)細胞消化液,用于培養(yǎng)細胞的消化,或者一些組織的消化。
注意事項:無菌溶液,經(jīng)過濾除菌處理。主要由胰酶或胰蛋白酶、EDTA組成,含酚紅。自備材料:
1、 PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液
2、 顯微鏡
3、 離心機
操作步驟(僅供參考):
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項:
1、 盡量減少反復凍融的次數(shù),以免失效。
2、在使用 Trypsin-EDTA solution 過程中,要特別注意避免消化液被細菌污染。
3、Trypsin-EDTA solution 消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。使用說明:
1. 貼壁細胞的消化:
a.吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
b.加入少量胰酶細胞消化液(含酚紅,不含EDTA),略蓋過細胞,室溫放置30秒至2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同。
c.顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細胞消化液(含酚紅,不含EDTA)。加入含血清的*細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
d.如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細胞消化液(含酚紅,不含EDTA)重新消化。 如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液(含酚紅,不含EDTA)后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2. 組織的消化:
a.不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。 附錄:不同胰酶細胞消化液的比較和選擇
1. 如果希望消化能力比較強,推薦選擇C0201胰酶細胞消化液(0.25%胰酶)和C0203 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅),這兩種胰酶細胞消化液都含有EDTA,消化能力相對更強一些。
2. 如果希望觀察比較方便,推薦選擇含酚紅的C0203 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅)和C0207 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅,不含EDTA)。
3. 對于酚紅可能會干擾后續(xù)的測試分析,推薦選擇不含酚紅的C0201 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶)和C0205 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,不含EDTA)。
4. 對于EDTA可能會干擾后續(xù)的測試分析時,推薦選擇不含EDTA的C0205 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,不含EDTA)和C0207 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅,不含EDTA)。
5. 對于胰酶特別敏感的細胞,即對于消化時間特別快、消化時間比較難控制的情況,推薦選擇C0202胰酶細胞消化液(0.05%胰酶)或C0204 胰酶細胞消化液(0.05%胰酶, 含酚紅)。
DreamTaq Green PCR Master Mix 1000 rxns
Fast Tissue-to-PCR Kit 200 react
Fast Tissue-to-PCR Kit 200 rxns
InsTAclone? PCR Cloning Kit 10 react
InsTAclone? PCR Cloning Kit 30 react
CloneJET? PCR Cloning Kit 20 react
CloneJET? PCR Cloning Kit 40 react
Rapid DNA Ligation Kit 50 react
Rapid DNA Ligation Kit 150 react
First Strand cDNA Synthesis Kit 20 react
First Strand cDNA Synthesis Kit 20 rxns
First Strand cDNA Synthesis Kit 100 react
First Strand cDNA Synthesis Kit 100 rxns
RevertAid? First Strand cDNA Synthesis Kit 20 react
RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit 20 rxns
RevertAid? First Strand cDNA Synthesis Kit 100 react
RevertAid? H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit 20 react
RevertAid H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit 20 rxns
RevertAid? H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit 100 react
RevertAid H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit 100 rxns
Maxima? First Strand cDNA Synthesis Kit 50 react
Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit for RT-qPCR 50 rxns