組成及試劑配制:
1、嗜肺軍團桿菌(LP)核酸檢測試劑盒圖片品牌酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 價格 |
嗜肺軍團桿菌(LP)核酸檢測試劑盒圖片品牌 | 48T | 電詢 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進行PCR擴增反應。
4. PCR擴增反應管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數(shù)設置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點熒光檢測在60℃,反應體系為25?l。
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。
ODC ELISA Kit磷酸化相關死亡促進因子抗體鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA試劑盒
OCT ELISA Kit人β亞基人絨毛膜促性腺激素抗體鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)ELISA試劑盒
FAK ELISA Kit鈣激活鉀通道蛋白 α 1抗體黏著斑激酶(FAK)ELISA試劑盒
MAdCAM-1 ELISA Kit鈣激活鉀通道蛋白 α 1抗體黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒
ERP29/C12orf8/ERP28 ELISA Kit蛇毒巴曲酶抗體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白29(ERP29/C12orf8/ERP28)ELISA試劑盒
visfatin ELISA KitBH3結構域凋亡誘導蛋白抗體內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒
visfatin ELISA KitBax抗體內(nèi)脂素(visfatin)ELISA試劑盒
vaspin ELISA KitBcl-2抗體內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒
GC ELISA Kit腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素(GC)ELISA試劑盒
esRAGE ELISA Kit堿性成纖維細胞生長因子抗體內(nèi)源性分泌型糖基化終產(chǎn)物受體(esRAGE)ELISA試劑盒
EL ELISA Kit癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒
ES ELISA Kit牛血清白蛋白抗體內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒
eNOS-3 ELISA Kitβ-酪蛋白抗體內(nèi)皮型一氧化氮合酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒
eNOS ELISA Kitβ葡聚糖受體抗體內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)ELISA試劑盒
eNOS-3 ELISA Kit蛇毒蛋白巴曲酶抗體內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒
eNOS ELISA Kit非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒
ESM-1 ELISA Kit磷酸化非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體內(nèi)皮細胞特異分子-1(ESM-1)ELISA試劑盒
ENG/CD105 ELISA Kit磷酸化相關死亡促進因子抗體內(nèi)皮糖蛋白(ENG/CD105)ELISA試劑盒
EDN2 ELISA KitBarX1蛋白抗體內(nèi)皮素2(EDN2)ELISA試劑盒
EDNRA ELISA Kitβ1,3半乳糖轉(zhuǎn)移酶3抗體內(nèi)皮素1受體(EDNRA)ELISA試劑盒
ET-1 ELISA Kit紅細胞陰離子交換蛋白1抗體內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒
ET-1 ELISA Kit腦特定蛋白Brn3B抗體內(nèi)皮素(ET-1)ELISA試劑盒
EM-2 ELISA KitBcl-2同源結構域蛋白抗體內(nèi)嗎啡肽-2(EM-2)ELISA試劑盒
EM-2 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白4抗體內(nèi)嗎啡肽2(EM-2)ELISA試劑盒
EG-VEGF ELISA Kit腦和急性白血病胞漿蛋白抗體內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒
ET ELISA Kit骨髓基質(zhì)干細胞抗原抗體2抗體內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒
BDNF ELISA Kit組蛋白相關Bmi1抗體腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒
BDNF ELISA Kit癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體腦源性神經(jīng)生長因子(BDNF)ELISA試劑盒
BNP ELISA Kit大腦富含鳥苷酸激酶相關蛋白抗體腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒
BNP ELISA Kit腦富含膜附著信號蛋白1抗體腦鈉素(BNP)ELISA試劑盒
NGB ELISA Kit卵黃狀黃斑病蛋白3抗體腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒
ENK ELISA Kit卵黃狀黃斑病蛋白抗體腦啡肽(ENK)ELISA試劑盒
Ghrelin ELISA Kit卵黃狀黃斑病蛋白4抗體腦腸肽(Ghrelin)ELISA試劑盒
BGP/Gehrelin ELISA Kit炭疽桿菌菌體蛋白抗體腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒
CYT Ab ELISA KitEBV立即早期基因BRLF1抗體囊蟲病抗體(CYT Ab)ELISA試劑盒
TOXB ELISA Kit腦表達X連鎖蛋白4抗體難辨梭狀芽孢桿菌毒素B(TOXB)ELISA試劑盒
TOXA ELISA KitB淋巴細胞新型蛋白1抗體難辨梭狀芽孢桿菌毒素A(TOXA)ELISA試劑盒
SLC6A6/TAUT ELISA Kit核突觸蛋白β抗體鈉-氯化物依賴性?;撬徂D(zhuǎn)運體(SLC6A6/TAUT)ELISA試劑盒
Smad 4 ELISA KitBTRC2蛋白抗體母親DPP同源物4(Smad 4)ELISA試劑盒
TdT ELISA KitBEND3蛋白抗體末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA試劑盒
TCC C5b-9 ELISA KitBEND4蛋白抗體末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒
ANPEP ELISA KitBEND6蛋白抗體膜內(nèi)氨酰氨基肽酶(ANPEP)ELISA試劑盒
AnnexinA5 ELISA Kit胎兒阿茲海默病抗原抗體/核小體重塑因子抗體膜聯(lián)蛋白A5(AnnexinA5)ELISA試劑盒
ANX-Ⅶ ELISA Kit巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白2抗體膜聯(lián)蛋白Ⅶ(ANX-Ⅶ)ELISA試劑盒
ANX-Ⅵ ELISA Kit巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白5抗體膜聯(lián)蛋白Ⅵ(ANX-Ⅵ)ELISA試劑盒
ANX-Ⅴ ELISA Kit巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白4抗體膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒
ANX-Ⅳ ELISA Kit巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白7抗體膜聯(lián)蛋白Ⅳ(ANX-Ⅳ)ELISA試劑盒
ANX-Ⅲ ELISA Kit巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白9抗體膜聯(lián)蛋白Ⅲ(ANX-Ⅲ)ELISA試劑盒
ANX-Ⅱ ELISA Kit巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白10抗體膜聯(lián)蛋白Ⅱ(ANX-Ⅱ)ELISA試劑盒
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。