大鼠肝枯否細胞公司正在出售的產(chǎn)品：去甲氧基姜黃素 24939-17-1 規(guī)格： HPLC≥96%,20mg/支 訂購|咨詢
甘草次酸 1449-05-4; 471-53-4 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
大車前苷 104777-68-6 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
土荊皮乙酸；土荊乙酸; 土槿皮乙酸 82508-31-4
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠肝枯否細胞 |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
分類 | 原代細胞 |
貨號 | GOY-01X1100 |
商品介紹：
名稱 大鼠肝枯否細胞 2.組織來源：肝臟組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠枯否細胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接?？莘袷霞毎?/span>(Kupffer細胞)是肝臟的肝血竇內(nèi)一些固定于竇壁的巨噬細胞，它能吞噬和清除大部分從腸道來的抗原微粒，并能吞噬和清除肝血竇中的細菌、異物和衰老的紅細胞，并把血紅蛋白分解成。此外，肝巨噬細胞也有處理抗原，誘導T細胞增殖，參與免疫調(diào)節(jié)的作用?？莘袷霞毎鸵话憔奘杉毎煌莘袷霞毎痪哂性黾涌乖庖咴缘哪芰?，相反有消除或減弱抗原性的作用?？莘袷霞毎芡淌蓙碜匝貉h(huán)的抗原抗體復合物和其他有害物質(zhì)，以消除這些物質(zhì)對機體的損害?？莘窦毎δ苷系K可導致腸源性內(nèi)毒素血癥。電鏡下有很多皺褶和微絨毛。 5.方法簡介： ()實驗室分離的大鼠肝枯否細胞采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心、差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： ()實驗室分離的大鼠肝枯否細胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R132 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)梭形、巨噬細胞 傳代特性屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群 消化液（12mM） 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2 ug pLNCX pLNCX 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/ml 豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸檢測試劑盒
亞硫酸鐵素B瓊脂 Sulfite Iron Agar 250g 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Interleukin-8
1瓶 N/N1003A(RLE)細胞株 N/N1003A(RLE) 低溫運輸和保存 0.156-10 ng/mL 人生長分化因子9(GDF9)ELISA試劑盒
MEE肉湯 MEE Broth 250g 37.5-2
大鼠肝枯否細胞0.1mg 山羊抗兔IgG，熒光素555標記 Goat Anti-Rabbit IgG ,IF555 Conjugate 4℃保存
KChIP2 鉀通道相互作用蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
50次 真菌RNAout Fungal RNAOUT 4℃保存
2mg L- 氨基酸氧化 L-Amino Acid Oxidase 4℃保存
IGSF1 抑制素結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Cy5 Cy5標記的兔抗小鼠IgG-Fc 規(guī)格: 0.1mlRabbit anti-Goat IgM whole serum 兔抗羊IgM抗清 規(guī)格: 1ml
BIN1 橋連整合因子蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
PRKAR1 蛋白激A調(diào)節(jié)亞基a1抗體 規(guī)格: 0.1mlKLHL8 Kelch樣蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml
FNDC1 Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白1 規(guī)格: 0.2ml
TIM4 T淋巴細胞膜蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml
Acetyl-p53(K382) 乙?；疨53(Lys382)抗體 規(guī)格: 0.1ml
Bcl-6/5 原基因Bcl-6抗體 規(guī)格: 0.2mlFCAR/CD89 免疫球蛋白A Fc段受體1抗體 規(guī)格: 0.1ml
