細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號(hào) |
小鼠肝枯否細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 原代細(xì)胞 | GOY-01X1099 |
產(chǎn)品介紹:
名稱 小鼠肝枯否細(xì)胞
2.組織來源:肝臟組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠枯否細(xì)胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接??莘袷霞?xì)胞(Kupffer細(xì)胞)是肝臟的肝血竇內(nèi)一些固定于竇壁的巨噬細(xì)胞,它能吞噬和清除大部分從腸道來的抗原微粒,并能吞噬和清除肝血竇中的細(xì)菌、異物和衰老的紅細(xì)胞,并把血紅蛋白分解成。此外,肝巨噬細(xì)胞也有處理抗原,誘導(dǎo)T細(xì)胞增殖,參與免疫調(diào)節(jié)的作用??莘袷霞?xì)胞和一般巨噬細(xì)胞不同,枯否氏細(xì)胞不具有增加抗原免疫原性的能力,相反有消除或減弱抗原性的作用??莘袷霞?xì)胞能吞噬來自血液循環(huán)的抗原抗體復(fù)合物和其他有害物質(zhì),以消除這些物質(zhì)對(duì)機(jī)體的損害??莘窦?xì)胞功能障礙可導(dǎo)致腸源性內(nèi)毒素血癥。電鏡下有很多皺褶和微絨毛。
5.方法簡(jiǎn)介:
()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肝枯否細(xì)胞采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心、差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測(cè):
()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肝枯否細(xì)胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
產(chǎn)品貨號(hào)CM-M132
換液頻率每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性貼壁
細(xì)胞形態(tài)梭形、巨噬細(xì)胞
傳代特性屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液(12mM)
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%
處理方法:
收到細(xì)胞后,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。
4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5. ①若細(xì)胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,進(jìn)行傳代。
實(shí)驗(yàn)操作步驟:
a.采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。
b.立即在無菌超凈臺(tái)內(nèi)用70%乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,
避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗
并*清除殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
抗生素檢定培養(yǎng)基1號(hào)(PH6.5-6.7) 250g 78-5000 pg/mL 人NAD從屬脫乙酰6(NAD-dependent deacetylase sirtuin-6)ELISA試劑盒
1mg 重組蛋白A Recombinant Protein A -20℃保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Fatty acid-binding protein, intestinal
2 ug pTRE2 pTRE2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人
小鼠肝枯否細(xì)胞PCDHA12 原鈣粘蛋白12抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-rat IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
Nestin 巢蛋白/神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Gab1 (Tyr627) 磷酸化接蛋白Gab 1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗豬IgG 規(guī)格: 0.1ml
phospho-AQP2(Ser269) 磷酸化水通道蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1mlBCMA/CD269 B淋巴細(xì)胞成熟因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
mucin 5B/Muc5B 粘蛋白-5B抗體 規(guī)格: 0.2ml
1瓶 FIP293細(xì)胞株 FIP293 低溫運(yùn)輸和保存
50T 副流感病毒Ⅰ型PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
20次 天凈沙SPIA 擴(kuò)增試劑盒(用于擴(kuò)增DNA 模板)
2 ug pCold-SUMO pCold-SUMO 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
LBS瓊脂 LBS agar 250g