公司向您推薦PrimaCell™人小梁網(wǎng)細(xì)胞試劑盒價(jià)格的詳細(xì)說明:
產(chǎn)品名稱 | PrimaCell™人小梁網(wǎng)細(xì)胞試劑盒價(jià)格 |
規(guī)格 | 6次/盒 |
貨號(hào) | YS-X6670 |
細(xì)胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng):
用于檢測(cè)細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10%小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)對(duì)細(xì)胞因子有依賴性的細(xì)胞株時(shí)還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5% CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)特性,在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候進(jìn)行傳代,一般3~4 天傳代一次。
懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞的傳代:
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細(xì)胞,一般按1:2-1:5 稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
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實(shí)驗(yàn)操作步驟:
a.采用認(rèn)可的方案處死人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞嚙齒動(dòng)物。
b.立即在無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)用70%乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。
c.用無(wú)菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無(wú)菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無(wú)菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無(wú)菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無(wú)菌的含有無(wú)菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè); 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞線粒體NADH氧化酶活性定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
波形蛋白(Vimentin)結(jié)合分子(binding molecules)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
多參數(shù)細(xì)胞周期全周期流式細(xì)胞分析試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10次
TNF BETA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:25次
細(xì)胞MKK6激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
超敏型ECL免疫印跡化學(xué)發(fā)光溶 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:A:100毫升B:500微升1000cm2
細(xì)胞PARP蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10/50 次
胰蛋白酶(TRYPSIN)酶解法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50次
5-HTP高效相色譜電化學(xué)定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
組織酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
糞便細(xì)菌DNA分離試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50次
冰凍切片NADH心肌黃酶活性染色試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50次
PrimaCell™人小梁網(wǎng)細(xì)胞試劑盒價(jià)格茴三硫 含量測(cè)定 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 1mg
三氯叔 含量測(cè)定 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 50mg
膽維 含量測(cè)定 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 1mg
葡 含量測(cè)定 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 1mg
羥 檢查 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 50mg
對(duì)酚 檢查 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 50mg
磺脲 供打假 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 1mg
氯解磷定 HPLC法含量測(cè)定 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 1mg
賽啶 含量測(cè)定 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 50mg
氨基比林 含量測(cè)定 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 2mg
沙利度 含量測(cè)定 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 50mg
貝那替秦 含量測(cè)定 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 1mg
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號(hào)16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。