試劑配制
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
服務(wù)：
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Mouse thyroid stimulating hormone (TSH) ELISA Kit |
貨號 | YS-M9917 |
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樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
Cy5.5標記的驢抗人IgG 0.1mlDonkey Anti-human IgG/Cy5.5
2型豬鏈球菌菌體蛋白 1mgStreptococcus suis 2 (Cell protein)
異硫氰酸熒光素(FITC)標記糖尿病相關(guān)肽1-37 1mlAmylin1-37/FITC
苷酸環(huán)化酶1多肽抗原 0.5mgADCY1 peptide
丙型肝炎病毒-NS4a（抗原） 0.5mgHCV-NS4a
ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗原 0.5mgKir6.2 peptide
心肌肌凝蛋白多肽 0.5mgSM-MHC(Cardiac myosin heavy chain)
細胞表面趨化因子受體2A抗原 0.5mgCCR-2A(C-C Chemokine receptor 2A)
細胞角蛋白7抗原 0.5mgCK7(Cytokeratin 7)human
發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白多肽抗原 0.5mgNadrin peptide
生長分化因子8抗原 0.5mgGDF8/MSTN(growth differntiation factor 8)
結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白抗原 0.5mgHpt/HP(haptoglobin)
腸上皮干細胞蛋白（多肽） 0.5mgLgr5/GPR49
活化T細胞核因子1蛋白 0.5mgNFATc1
小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA檢測試劑盒香荊芥酚 499-75-2 規(guī)格： 20mg
吳茱萸內(nèi)酯 6989-38-4 規(guī)格： 20mg
α-三聯(lián) 1081-34-1 規(guī)格： 20mg
升素苷 80681-45-4 規(guī)格： 20mg
5-羥基-6,7-二甲氧基黃 740-33-0 規(guī)格： 10mg
?；撬?/font> 107-35-7 規(guī)格： 20mg
沒食子酸 149-91-7 規(guī)格： 20mg
連翹酯苷A 79916-77-1 規(guī)格： 20mg
肌醇 87-89-8 規(guī)格： 20mg
酪醇 501-94-0 規(guī)格： 20mg
甘松新 23720-80-1 規(guī)格： 20mg
粉防己堿 518-34-3 規(guī)格： 20mg
1,3-O-二啡酰奎寧酸 1182-34-9 規(guī)格： 20mg
對傘 規(guī)格： 20mg
操作步驟：
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
