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兔子肝細胞生長因子elisa檢測試劑盒品牌 兔子肝細胞生長因子(HGF)ELISA檢測試劑盒 英文簡稱:HGFELISAKit 我司在保證產(chǎn)品質(zhì)量的同時,以價格優(yōu)、到貨快、服務(wù)周到等優(yōu)點獲得了科研人士的*好評,我們致力于各種ELISA試劑盒、抗體、生物試劑等優(yōu)質(zhì)科研產(chǎn)品的、銷售。竭誠為廣大科研用戶提供較全面,優(yōu)質(zhì),價格具優(yōu)勢的產(chǎn)品,免費為您提供全程技術(shù)指導(dǎo),解決您的后顧之憂。,別名: 兔子肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒 產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
兔子肝細胞生長因子elisa檢測試劑盒品牌 | HGFELISAKit | 48T/96T |
實驗儀器:酶標儀、洗板機、離心機、培養(yǎng)箱等
試劑盒檢測:操作簡單、快速、敏感性高、特異性強
elisa規(guī)格:96T/48T
elisa原理:應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中5-NT水平。
主要成分:酶標包被板、試劑、標準品等。
標本齊全:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水等等。
操作流程示意:
兔子肝細胞生長因子elisa檢測試劑盒品牌標本的采集及保存:
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 其它生物標本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
4. 樣本處理:血清或血漿標本推薦稀釋5,000倍。
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:①標本因素;②試劑因素;③操作因素。下面就一些常見ELISA操作過程中的問題一一分析。
1.樣品稀釋 酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng),如果血清不稀釋,不可避免會產(chǎn)生很強的非特異性反應(yīng),出現(xiàn)假陽性。因此,國外檢測血清抗體的試劑盒,均規(guī)定將血清稀釋至適當(dāng)?shù)谋稊?shù),以降低非特異性反應(yīng),使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過大量試驗確定,以保證試驗的靈敏度和特異性。但是,有些用戶未能嚴格按使用說明書操作,如某些產(chǎn)品應(yīng)取10μl樣品進行稀釋,個別用戶取5μl甚至1μl樣品進行稀釋,由于吸嘴上不可避免地沾有樣品以及微量移液器的精度不夠,因此造成樣品稀釋倍數(shù)不準確,檢測結(jié)果出現(xiàn)問題。
2.試劑盒平衡 試劑盒中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上。平衡時間太短會造成試劑混勻不夠,樣品孵育時間相對縮短,ELISA反應(yīng)不夠充分。冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。
3.樣品和試劑的混勻 稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗的均一性。
操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
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菥蓂英文名稱:Pennycress規(guī)格:1g保存:-20℃,避光
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構(gòu)骨葉英文名稱:Ilex latifolia Thunb規(guī)格:2g保存:-20℃,避光
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