產(chǎn)品名稱:BW25113 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50包裝
包裝:100ul*50
分類:克隆感受態(tài)細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.BW25113 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50包裝研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
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操作方法:
1. BW25113 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50包裝從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí),30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
技術(shù)傳授:
BW25113 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50包裝凍存培養(yǎng)基
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
本公司供應(yīng)的BW25113 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50包裝細(xì)胞,提供售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細(xì)產(chǎn)品名稱的說明書或價(jià)格信息,點(diǎn)擊了解更多公司產(chǎn)品。
* 人支氣管上皮細(xì)胞總RNA 英文名稱:HBEpiC tRNA
* 人氣管上皮細(xì)胞總RNA 英文名稱:HTEpiC tRNA
* 人小氣道上皮細(xì)胞總RNA 英文名稱:HSAEpiC tRNA
* 人肺成纖維細(xì)胞總RNA 英文名稱:HPF tRNA
* 人支氣管平滑肌細(xì)胞總RNA 英文名稱:HBSMC tRNA
* 人氣管平滑肌細(xì)胞總RNA 英文名稱:HTSMC tRNA
* 人骨骼肌細(xì)胞總RNA 英文名稱:HSkMC tRNA
中國倉鼠肺細(xì)胞,CHL細(xì)胞 原裝/進(jìn)口 500 ml
中國倉鼠卵巢細(xì)胞k1 亞克隆系,CHO-K1細(xì)胞 500 ml
人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞,OCM-1A細(xì)胞 * 500 ml
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞,NK-92細(xì)胞 原裝/進(jìn)口 500 ml
人惡性黑色素瘤細(xì)胞,A375-EGFP細(xì)胞 500 ml
人惡性黑色素瘤細(xì)胞,MeWo細(xì)胞 * 500 ml
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,HCC827細(xì)胞 原裝/進(jìn)口 500 ml
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H358細(xì)胞 500 ml
BW25113 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50包裝Osterix蛋白檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
Otubain 1蛋白檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
Otubain 2蛋白檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
O-巖藻糖肽3-β-N-酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
O-唾液糖蛋白內(nèi)肽酶檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
p21蛋白激活激酶4檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
p53上調(diào)凋亡調(diào)節(jié)因子檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
p53上調(diào)凋亡調(diào)節(jié)因子檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
Paladin蛋白檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
Palmdelphin蛋白檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T