以下是節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書的訂購(gòu)信息：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書 | 50T | 電詢 |
需要自備的器材：
1．節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
PCR檢測(cè)試劑盒：
(一)節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-15min。
(2)移入1.5mlEP管中，4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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技術(shù)概論：
節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡(jiǎn)便、重復(fù)性好、易自動(dòng)化等突出優(yōu)點(diǎn)；能在一個(gè)試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷；可從一根毛發(fā)、一滴血、甚至一個(gè)細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測(cè)鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情，用PCR幾小時(shí)便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性創(chuàng)舉和里程碑。
PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系：
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10～100pmol
模板DNA 0.1～2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
PCR反應(yīng)五要素： 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物： 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3’端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)，被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)，這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
α2-微球蛋白樣蛋白1(α2ML1)elisa英文名稱：α2ML1 ELISA Kit，英文縮寫：α2ML1，產(chǎn)品別名：α2-微球蛋白樣蛋白1(α2ML1)ELISA，α2-微球蛋白樣蛋白1(α2ML1)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
Tescalcin蛋白(TSC)elisa英文名稱：TSC ELISA Kit，英文縮寫：TSC，產(chǎn)品別名：Tescalcin蛋白(TSC)ELISA，Tescalcin蛋白(TSC)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)elisa英文名稱：VCC1 ELISA Kit，英文縮寫：VCC1，產(chǎn)品別名：VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)ELISA，VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
Smad同源物1(Smad1)elisa英文名稱：Smad1 ELISA Kit，英文縮寫：Smad1，產(chǎn)品別名：Smad同源物1(Smad1)ELISA，Smad同源物1(Smad1)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
R-脊椎蛋白3(RSPO3)elisa英文名稱：RSPO3 ELISA Kit，英文縮寫：RSPO3，產(chǎn)品別名：R-脊椎蛋白3(RSPO3)ELISA，R-脊椎蛋白3(RSPO3)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
PTB結(jié)合核蛋白2(RAVER2)elisa英文名稱：RAVER2 ELISA Kit，英文縮寫：RAVER2，產(chǎn)品別名：PTB結(jié)合核蛋白2(RAVER2)ELISA，PTB結(jié)合核蛋白2(RAVER2)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
N-酰轉(zhuǎn)移酶5(NAT5)elisa英文名稱：NAT5 ELISA Kit，英文縮寫：NAT5，產(chǎn)品別名：N-酰轉(zhuǎn)移酶5(NAT5)ELISA，N-酰轉(zhuǎn)移酶5(NAT5)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
Nischarin蛋白(NISCH)elisa英文名稱：NISCH ELISA Kit，英文縮寫：NISCH，產(chǎn)品別名：Nischarin蛋白(NISCH)ELISA，Nischarin蛋白(NISCH)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
Misato同源物1(MSTO1)elisa英文名稱：MSTO1 ELISA Kit，英文縮寫：MSTO1，產(chǎn)品別名：Misato同源物1(MSTO1)ELISA，Misato同源物1(MSTO1)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
Kintoun蛋白(KTU)elisa英文名稱：KTU ELISA Kit，英文縮寫：KTU，產(chǎn)品別名：Kintoun蛋白(KTU)ELISA，Kintoun蛋白(KTU)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
G抗原10(GAGE10)elisa英文名稱：GAGE10 ELISA Kit，英文縮寫：GAGE10，產(chǎn)品別名：G抗原10(GAGE10)ELISA，G抗原10(GAGE10)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
Midline 1蛋白(MID1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 現(xiàn)貨供應(yīng)
Midline 2蛋白(MID2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 現(xiàn)貨供應(yīng)
Misato同源物1(MSTO1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 現(xiàn)貨供應(yīng)
Misato同源物1(MSTO1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 現(xiàn)貨供應(yīng)
MRG結(jié)合蛋白(MRGBP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 現(xiàn)貨供應(yīng)
Muskelin 1蛋白(MKLN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 現(xiàn)貨供應(yīng)
節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書*人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞，CCRF-CEM細(xì)胞英文名稱：
*人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞，CEM/C1細(xì)胞英文名稱：
*人狀腺癌狀細(xì)胞，Bcpap細(xì)胞英文名稱：
*人狀腺癌細(xì)胞，F(xiàn)TC-133細(xì)胞英文名稱：
*人狀腺癌細(xì)胞，K1細(xì)胞英文名稱：
*人狀腺癌細(xì)胞，SW579細(xì)胞英文名稱：
*人狀腺癌細(xì)胞，TT細(xì)胞英文名稱：
人狀腺癌細(xì)胞，K1細(xì)胞*
人狀腺癌細(xì)胞，SW579細(xì)胞原裝/進(jìn)口
人狀腺癌細(xì)胞，TT細(xì)胞
人肺成纖維細(xì)胞，HPF細(xì)胞原代細(xì)胞*
人肝Kuffer細(xì)胞原代細(xì)胞原裝/進(jìn)口
人肝癌原代細(xì)胞原代細(xì)胞
人肝單核細(xì)胞，HLMC細(xì)胞原代細(xì)胞*
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞，HHSECP細(xì)胞原代細(xì)胞原裝/進(jìn)口
