商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品分類 | 規(guī)格 | 貨號 |
HotStart Bst 4.2 Basic Mix(可凍干) | 恒溫擴增系列 | 200Tx25μl | BJ-PJ6571 |
描述:
2.5xBst4.2 Basic Mix 包含了 Helicaser、dNTP、Mg2+、反應緩沖鹽、凍干賦形劑和穩(wěn)定劑。HotStart Bst4.2DNA/RNA 聚合酶為單獨的組分。本品不僅可作為常規(guī)檢測試劑,對于具有凍干經(jīng)驗的研究者,
本品還直接進行后續(xù)凍干,無需再加入任何其它輔料。
Bst4.2 具有以下性能:
(1)Bst 4.2 全系包含熱啟動Aptamer,該配體確保酶在<30℃時,酶活封閉效率>95%,在>60℃時 1min 內(nèi)釋放酶活。該特性利于室溫建立反應體系,并大幅降低了低溫條件下的非特異擴增;
(2)反應溫度提升到 70℃,大幅降低引物 Dimer 的形成,提高擴增特異性,并使得粗樣品核酸釋放更加充分;
(3)全系包含 Helicaser,因此,允許在不使用 F3/B3 引物的情況下進行 LAMP 擴增(easy LAMP),并允許 FIP/BIP 的引物用量降低一倍。這將進一步降低非特異擴增,并使得擴增均一性大幅提升。本品為多用途的試劑,適用于 LAMP 進行 MolecularBeacon 探針、DP-LAMP 探針、試紙條等檢測。
儲存:長期保存請置于-20℃以下(12 個月有效);制品反復凍融10 次不影響性能,但應避免反復凍融;制品由于含有高濃度的糖組分,-20℃保存的制品,在融化時可能會有結(jié)晶物。此時 2.5xBst4.2Mix 可在 37℃進行融化,而 Bst4.2 酶制品在 30℃的溫度下融化,過高的溫度可能會導致熱啟動性能下降。一經(jīng)融化推薦置于2-8℃保存,在此條件下制品穩(wěn)定儲存 6 個月。
特殊說明:
(1) Bst4.2 DNA/RNA Polymerase 在用于 LAMP 擴增時的推薦反應溫度為 65-70℃,最佳反應溫度為 70℃。因此其可替代 的 Bst4.0 系列,用于標準 LAMP 的擴增。
(2) 由于 Helicaser 的反應溫度為 70℃,因此在進行 eLAMP 擴增時,反應溫度為 70℃。
(3) 制品中包含高濃度的鹽組分,使用時做好個人防護,防止制品與皮膚、眼、鼻、呼吸道等接觸和吸入,一旦接觸或吸入,請用大量的清水沖洗。
(4)防止氣溶膠污染,盡可能進行分區(qū)操作。
1. 標準 LAMP 和 eLAMP 擴增的區(qū)別本試劑既可以用于標準 LAMP 擴增,也可以用于 eLAMP擴增。
1.1 10x 標準 LAMP Primer MixFIP/BIP=16 μM each; LF/LB=4 μM each; F3/B3=2 μM each
1.2 10xeLAMP Primer MixFIP/BIP=8 μM each; LF/LB=4 μM each
注意:eLAMP(easy LAMP)為去除 F3/B3 引物的方法,為 Bst4.2系列專用的使用策略,對于大多數(shù)引物組,在 Helicaser 的加持下,擴增速度幾乎不受影響。如引物擴增效率低,可提高 FIP/BIP 濃度到 12~16uM。
1.3 擴增溫度不同標準 LAMP 擴增 eLAMP 擴增65-70°C 均可 70°C 反應
2. 配制 LAMP 反應體系
2.5xBst4.2 Basic Mix 10 μl
10x Primer Mix 2.5 μl
HotStart Bst 4.2(8U/μl) 1 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到總體積 25 μl
反應體系配好后,置于 65-70°C 反應 20~30min。
3. 試劑的凍干反應(僅限專業(yè)人員)本試劑可供具有凍干經(jīng)驗的人員直接進行后續(xù)凍干,試劑的配方對凍干條件不苛刻。但對于不同的用戶來講,由于凍干形式、凍干體積、上機量、凍干容器、凍干磨具等因素存在差異,以下程序僅供參考。進一步的程序優(yōu)化均需根據(jù)具體情況自行調(diào)整。對于非專業(yè)人員來講,請直接采購 的凍干制品,或委托訂制。
2.5xBst4.2 Basic Mix 10 μl
25xPrimer Mix 1 μl
HotStart Bst 4.2(8U/μl) 1 μl
Total 12 μl
制品成型后的凍干程序:
-50℃預凍 10min; -50℃ 4-8h(真空段);-50℃升溫到 25℃(每小時升溫 5℃);25℃ 2h; 25℃恒溫。
下列是公司正在出售的產(chǎn)品:
鋅指蛋白186抗體 英文名;ZNF186 | 細胞信號轉(zhuǎn)導分子SMAD5 重組兔單克隆抗體 英文名;Smad5 |
阿爾茨海默病淀粉樣蛋白相關膠原蛋白抗體 英文名;CLACP | THAP11單克隆抗體 英文名;THAP11 |
COPA蛋白抗體 | 辣椒素受體5抗體 |
磷酸化蛋白激酶C/p-PKC ε抗體 英文名;phospho-PKC Epsilon (Ser729) | APC標記小鼠CD117單克隆抗體 |
COP9信號復合體亞基3抗體 英文名;COPS3 | 跨膜蛋白208抗體 英文名;TMEM208 |
微管蛋白特定伴侶蛋白E抗體 英文名;TBCE | APC標記小鼠CD107b單克隆抗體 英文名;mouse CD107b/APC |
RAS癌基因相關蛋白Rab6C抗體 英文名;RAB6C | 死亡相關蛋白5抗體 英文名;DAP5 |
堿性螺旋環(huán)螺旋蛋白MESP2抗體 | PE-Cy5標記人CD69單克隆抗體 英文名;human CD69/PE-Cy5 |
9號染色體開放閱讀框59抗體 | 肌動蛋白結(jié)合蛋白2B抗體 |
鉀離子通道多聚體結(jié)構域蛋白15抗體 英文名;KCTD15 | 1號染色體開放閱讀框104抗體 |
9號染色體開放閱讀框57抗體 英文名;C9orf57 | 環(huán)指蛋白62抗體 英文名;RNF62/MKRN2 |
細絲蛋白A抗體 | 1號染色體開放閱讀框103抗體 英文名;C1orf103 |
鋅指蛋白350/乳腺癌易感基因1結(jié)合蛋白抗體 | HotStart Bst 4.2 Basic Mix(可凍干)磷酸化活化T細胞核因子1蛋白抗體 |