CX22奧林巴斯顯微鏡
光學(xué)顯微鏡是一種利用光學(xué)透鏡產(chǎn)生影像放大效應(yīng)的顯微鏡。
由物體入射的光被至少兩個(gè)光學(xué)系統(tǒng)(物鏡和目鏡)放大。首先物鏡產(chǎn)生一個(gè)被放大實(shí)像,人眼通過作用相當(dāng)于放大鏡的目鏡觀察這個(gè)已經(jīng)被放大了的實(shí)像。一般的光學(xué)顯微鏡有多個(gè)可以替換的物鏡,這樣觀察者可以按需要更換放大倍數(shù)。這些物鏡一般被安置在一個(gè)可以轉(zhuǎn)動(dòng)的物鏡盤上,轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡盤就可以使不同的目鏡方便地進(jìn)入光路,物鏡盤的英文是Nosepiece,又譯作鼻輪。
十八世紀(jì),光學(xué)顯微鏡的放大倍率已經(jīng)提高到了1000倍,使人們能用眼睛看清微生物體的形態(tài)、大小和一些內(nèi)部結(jié)構(gòu)。直到物理學(xué)家發(fā)現(xiàn)了放大倍率與分辨率之間的規(guī)律,人們才知道光學(xué)顯微鏡的分辨率是有極限的,分辨率的這一極限限制了放大倍率的無限提高,1600倍成了光學(xué)顯微鏡放大倍率的較高極限,使得形態(tài)學(xué)的應(yīng)用在許多領(lǐng)域受到了很大限制。
光學(xué)顯微鏡的分辨率受到光波長的限制,一般不超過0.3微米。假如顯微鏡使用紫外線作為光源或物體被放在油中的話,分辨率還可以得到提高。
光學(xué)顯微鏡依樣品的不同可分為反射式和透射式。反射顯微鏡的物體一般是不透明的,光從上面照在物體上,被物體反射的光進(jìn)入顯微鏡。這種顯微鏡經(jīng)常被用來觀察固體等,多應(yīng)用在工學(xué)、材料領(lǐng)域,在正立顯微鏡中,此類顯微鏡又稱作金相顯微鏡。透射顯微鏡的物體是透明的或非常薄,光從可透過它進(jìn)入顯微鏡。這種顯微鏡常被用來觀察生物組織。
光學(xué)顯微鏡依其聚光鏡(condenser)和物鏡(Objective)的設(shè)計(jì),可用來觀察不同的樣品。明視野(Brightfield)用來觀察薄的染色生物組織樣品,暗視野(Darkfield)功能的視野下,背景為黑色,能突顯樣品的細(xì)微面貌,觀察未染色樣品時(shí),如活細(xì)胞,可利用相位差(Phase)功能。另外還有微分干涉差(differential interference contrast,DIC)功能,都常搭配在光學(xué)顯微鏡上。
依光源的不同,還有熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等類別。
2014年10月8日,諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)?lì)C給了艾力克·貝齊格 (Eric Betzig),W·E·莫爾納爾 (William Moerner)和斯特凡·W·赫爾 (Stefan Hell),獎(jiǎng)勵(lì)其發(fā)展超分辨熒光顯微鏡 (Super-Resolved Fluorescence Microscopy),這將帶來光學(xué)顯微鏡進(jìn)入納米級尺度中。
CX22奧林巴斯顯微鏡顯微鏡成像原理
現(xiàn)在的光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造非常的復(fù)雜精密,為了精準(zhǔn)成像,顯微鏡的光學(xué)路徑必須嚴(yán)謹(jǐn)?shù)脑O(shè)計(jì)與控制。盡管如此,光學(xué)顯微鏡的運(yùn)作原理是非常簡單的。
簡單的物鏡是由高分辨率的玻璃鏡制成,有非常短的焦距,大概是160 mm左右,顯微鏡廠家都在采用這種45mm的齊焦距離,如OLYMPUS、LEICA、ZEISS;而產(chǎn)生了放大倒立成像,因此像是非??拷嚻瑏碛^察,經(jīng)由對焦,其產(chǎn)生的是實(shí)像,不用經(jīng)由目鏡即可用肉眼看到,或者成像于紙張上。在多數(shù)的顯微鏡,目鏡是雙鏡組成的,一個(gè)在眼睛,產(chǎn)生虛像,使肉眼看到放大成像;一個(gè)則靠近物鏡,產(chǎn)生實(shí)像