英文名稱 | AAV293:AAV-293 | 貨號 | A01X652 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
分類 | 人細(xì)胞系 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
商品介紹：
別稱 | AAV293 |
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 胎兒 |
組織來源 | 腎；以腺病毒5DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
詳情簡介 | AAV-293細(xì)胞源自普遍使用的293 [HEK-293]細(xì)胞株，但AAV-293細(xì)胞產(chǎn)生的病毒滴度更高。293 [HEK-293]細(xì)胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞。跟293 [HEK-293]細(xì)胞一樣，AAV-293細(xì)胞反式表達(dá)腺病毒E1基因，當(dāng)共轉(zhuǎn)染三個(gè)AAV助質(zhì)粒(一個(gè)含ITR的質(zhì)粒、pAAV-RC和E1缺失助質(zhì)粒)時(shí)，AAV-293細(xì)胞可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒；因此，我們推薦使用AAV-293細(xì)胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。 |
生物安全等級 | 2 |
生長培養(yǎng)基 | DMEM＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
注意事項(xiàng) | 該細(xì)胞貼壁松散，操作時(shí)請盡量輕柔；換液時(shí)需預(yù)熱培養(yǎng)基；收貨如有大塊脫落的細(xì)胞團(tuán)，為正?，F(xiàn)象，請按照收貨處理。 |
細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別：
一、概念不同
1、細(xì)胞株：細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株（Cell Strain）。
2、細(xì)胞系：細(xì)胞系（cell line）指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。 也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。
二、形成方法不同
1、細(xì)胞株：通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物成為細(xì)胞株。
2、細(xì)胞系：經(jīng)過40-50次分裂的渡過第二次死亡危機(jī)，原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功成為細(xì)胞系。
三、細(xì)胞的延續(xù)性不同
1、細(xì)胞株：原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細(xì)胞的生長就會(huì)出現(xiàn)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去，這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40--50代，這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。
2、細(xì)胞系：細(xì)胞株的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)”，不能再傳下去。但是有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，并且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，有可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去，這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系。
公司正在出售的產(chǎn)品：
肌間蛋白3抗體 1號染色體開放閱讀框185抗體
肌球蛋白7a/常染色體隱性耳聾蛋白2抗體 1號染色體開放閱讀框54抗體
肌肉特異性環(huán)指蛋白2抗體 20號染色體開放閱讀框106抗體
肌營養(yǎng)不良蛋白相關(guān)蛋白1抗體 20號染色體開放閱讀框27抗體
基質(zhì)金屬蛋白酶-14單克隆抗體 21號染色體開放閱讀框7抗體
β淀粉樣肽（1-28）單克隆抗體 英文名；beta Amyloid 1-28 磷酸化促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH抗體
β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體 英文名；Beta catenin 磷酸化蛋白激酶MST抗體
γ氨基丁酸γ2受體/GABAA Rγ2抗體 英文名；GABA A Receptor gamma 2 磷酸化鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶4抗體
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶輕鏈2抗體 英文名；GGTLC2 磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體
癌/睪丸抗原113抗體 英文名；Tex14 磷酸化肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體
癌細(xì)胞高表達(dá)蛋白Hec1抗體 英文名；HEC1 磷酸化結(jié)蛋白抗體
氨基糖苷類磷酸結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 英文名；Hydroxylysine kinase 磷酸化磷酯酶Cγ2抗體
白介素11受體α/IL-11Rα抗體 英文名；IL-11RA 磷酸化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體
AAV-293人胚腎細(xì)胞白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體 英文名；IRAK1 磷酸化神經(jīng)細(xì)胞鳥苷酸置換因子Ephexin1抗體
白介素8抗體 英文名；IL-8/CXCL8 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗體
Smad核轉(zhuǎn)錄共抑制因子抗體 英文名；SnoN 跨膜蛋白106B抗體
細(xì)胞培養(yǎng)的步驟：
細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備
細(xì)胞變質(zhì)的征象包括核周出現(xiàn)顆粒、細(xì)胞與基質(zhì)解離以及細(xì)胞質(zhì)空泡形成。
這些變質(zhì)征象可能為多種原因所致，例如：培養(yǎng)物污染、細(xì)胞系衰老或培養(yǎng)基中存在毒性物質(zhì)，或者這些征象僅表明培養(yǎng)物需要更換培養(yǎng)基。
變質(zhì)嚴(yán)重時(shí)將會(huì)成為不可逆的變化。
細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥的消毒及布局
保持細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥內(nèi)的整潔有序，將所有物品置于直視范圍內(nèi)。
向放入通風(fēng)櫥內(nèi)的所有物品噴灑70%乙醇，擦拭清潔進(jìn)行消毒。
在通風(fēng)櫥中部開闊處放置細(xì)胞培養(yǎng)容器；移液器置于右前方易于取用；試劑和培養(yǎng)基置于右后方便于吸??；試管架置于中后部；小型容器置于左后部用于盛放廢液。
培養(yǎng)瓶/皿等物品的無菌操作
細(xì)胞培養(yǎng)污染物主要分為兩類：
化學(xué)污染物,如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)、內(nèi)毒素、增塑劑和去污劑。
生物污染物，如細(xì)菌、霉菌、酵母、病毒、支原體以及其他細(xì)胞系的交叉污染。
可通過充分了解污染源以及采用良好的無菌技術(shù)，降低污染發(fā)生的頻率和嚴(yán)重程度。
交叉污染的確認(rèn)
為細(xì)胞換液時(shí)，要沿著培養(yǎng)瓶的一側(cè)輕輕地加入，而不是直接加到細(xì)胞中，以免損傷細(xì)胞，當(dāng)培養(yǎng)的細(xì)胞株較為脆弱時(shí)尤其需要注意。
使用無菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液體時(shí)，每支吸管只能使用一次，以免交叉污染。
細(xì)胞傳代的時(shí)間把握
當(dāng)細(xì)胞呈指數(shù)增殖，貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞已占據(jù)所有可用基質(zhì)、沒有擴(kuò)增空間，或懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞已超過培養(yǎng)基質(zhì)所支撐的能力，無法進(jìn)一步生長時(shí)，細(xì)胞增殖速度將大大降低甚至停止。為了將細(xì)胞密度維持在最佳水平，以便細(xì)胞繼續(xù)生長，并且刺激進(jìn)一步增殖，必須對細(xì)胞進(jìn)行傳代。
